In this work, to develop soil inoculant which maintains stable viable cells and normalized quality, studies on micro-encapsulation with bacteria and yeast cells were performed by investigating materials and methods for micro-encapsulation as well as variation and stability of encapsulated cells. Preparation of capsule was conducted by application of extrusion system using micro-nozzle and peristaltic pump. K-carragenan and Na-alginate were selected as best carrier for gelation among K-carageenan, Na-alginate, locust bean gum, cellulose acetate phthalate (CAP), chitosan and gelatin tested. Comparing the gels prepared with Bacillus sp. KSIA-9 and carriers of 1.5% concentration, although viable cell of K-carragenan and Na-alginate was six times higher than those of other, Na-alginate was finally selected as carrier for gelation because it is seven times cheaper than K-carragenan. The gel of 1.5% Na-alginate was also observed to have the best morphology with circular hardness polymatrix and highest viable cell. When investigating the stability of encapsulated cells and the stabilizer effect, free cells were almost dead within 30 or 40 days whereas encapsulated cells decreased in 10% after 30 days and 15-30% even after 120 days. As stabilizer for maintaining viable cell, both 1% starch and zeolite appeared to possess the level of 70-80% cell for bacteria and yeast until after 120 days.
A curd yogurt was prepared by fermenting milk added with skim milk powder and purple sweet potato by culture of 5 types of lactic acid bacteria(Lactobacillus delbruekii sub. sp. lactis, Streptococcus lactis, acidity, number of viable cell, stability of purple sweet potato's pigment and keeping qualify. Among the organisms tested, the acid production and number of viable cell by the culture of L bulgaricus remarkably increased for the first 12 hem which showed 1.04${\times}$10$\^$9/ CFU/mL in number of viable cell and 4.22 In pH where as fermentation by the culture of B. bifidum was slow. After 36 hours of incubation which showed 3.3 ${\times}$ l0$\^$8/ CFU/mL in number of viable cell and 5.1 in pH. In stabilities of purple sweet potato anthocyanin pigment n fermentation, yogurt by B. bifidum was found to be most stable followed by Leuc. lactis, L. delbruekii sub. sp. lactis, L bulgaricus, but yogurt by St. lactis was not stable. When curd yogurt added with Purple sweet Potato was kept at 2∼3$^{\circ}C$ for 14 day, its keeping quality(pH, titratable acidity, number of viable cell) was relative good except product by L. bulgaricus was found to be decreased most of viable cell. After 2 weeks of keeping, pigment of yogurt was decreased by B. bifidum, stable by L. delbruekii sub. sp. lactis.
Carbon nanotubes (CNTs) stand at the frontier of nanotechnology and are destined to stimulate the next industrial revolution. Rapid increase in their production and use in the technology industry have led to concerns over the effects of CNT on human health and the environment. The prominent use of CNTs in biomedical applications also increases the possibility of human exposure, while properties such as their high aspect ratio (fiber-like shape) and large surface area raise safety concerns for human health if exposure does occur. It is crucial to develop viable alternatives to in vivo tests in order to evaluate the toxicity of engineered CNTs and develop validated experimental models capable of identifying CNTs' toxic effects and predicting their level of toxicity in the human respiratory system. Human lung epithelial cells serve as a barrier at the interface between the surrounding air and lung tissues in response to exogenous particles such as air-pollutants, including CNTs. Monolayer culture of the key individual cell types has provided abundant fundamental information on the response of these cells to external perturbations. However, such systems are limited by the absence of cell-cell interactions and their dynamic nature, which are both present in vivo. In this review, we suggested two viable alternatives to in vivo tests to evaluate the health risk of human exposure to CNTs.
Conventional molecular detection methods cannot distinguish between viable and dead Escherichia coli O157 cells. In this study, the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method combined with propidium monoazide (PMA) treatment was developed to selectively detect viable E. coli O157 cells. Four primers, including outer primers and inner primers, were specially designed for the recognition of six distinct sequences on the serogroups (O157) of the specific rfbE gene of the E. coli O157 genome. PMA selectively penetrated through the compromised cell membranes and intercalated into DNA. Amplification of DNA from dead cells was completely inhibited by $3.0{\mu}g/ml$ PMA, whereas the DNA derived from viable cells was amplified remarkably within 1 h by PMA-LAMP. Exhibiting high sensitivity and specificity, PMA-LAMP is a suitable method for evaluating the inactivation efficacy of slightly acidic electrolyzed water in broth. PMA-LAMP can selectively detect viable E. coli O157 cells. This study offers a novel molecular detection method to distinguish between viable and dead E. coli O157 cells.
Kim, Mi-Ree;Seo, Eun-Young;Choi, Seung-Ik;Ahn, Tae-Seok
Korean Journal of Microbiology
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v.42
no.3
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pp.205-209
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2006
For measuring the viable cells in lakes, quantitative direct viable count (qDVC) method is applied. In the qDVC process, the final concentration of glycine is fixed as 2%. For confirming the effectiveness of qDVC for enumerating the viable cells, the viable bacterial numbers were measured by plate count, CTC reduction method and qDVC method at 5 different lakes. Among these 3 methods, the bacterial numbers by qDVC is $2.4{\sim}6.0$ times higher than those by the other 2 methods. And by the qDVC method, the viable cells were easily discriminated from dead or dormant cells.
It has been proved that co-cultivation of human neroblastoma cells and human fibroblast cells can enhance nerve cell growth and the production of BDNF in perfusion cultivation. In batch co-cultivation, maximum cell density was increased up to 1.76${\times}$106 viable cells/mL from 9${\times}$105 viable cells/mL of only neuroblastoma cell culture. The growth of neuroblastoma cells was greatly improved by culturing both nerve and fibroblast cells in a perfusion process, maintaining 1.5${\times}$106 viable cells/mL, which was much higher than that form fed-batch cultivation. The nerve cell growth was greatly enhance in both fed-batch and perfusion cultivations while the growth of fibroblast cells was not. It strongly implies that the factors secreted from human fibrobast cells and/or the environments of co-culture system can enhance both cell growth and BDNF secretion. Specific BDNF production rate was not enhanced in co-cultures; however, the production period was increased as the cell growth was lengthened in the co-culture case. Competitive growth between nerve cells and fibroblast cells was not observed in all cases, showing no changes of fibroblast cell growth and only enhancement of the neuroblastoma cell growth and overall BDNF production. It was also found that the perfusion cultivation was the most appropriate process for cultivating two cell lines simultaneously in a bioreactor.
Sanitary condition for raw milk in Korea was investigated in this study. It is hoped that the information will be used for reference in future endeavors of study in the field of public health and food sanitation in Korea. The results were summerized as follows: 1) The viable cell counts of bacteria in raw milk were tend to be increased under the various atmospheric temperature, and the correlation coefficient between temperature and total viable cells was r=+0.921(p<0.01). 2) The correlation coefficient between methylene blue reduction time test and viable cell counts of bacteria in raw milk was r=-0.799(p<0.01). 3) The relationship between total solid rate(%) and milk fat rate(%) was highly significant level as r=+0.745(p<0.01). 4) Highly significant correlation coefficient was r= +0.945(p<0.01) between milk fat and protein rate in raw milk.
Previous studies have confirmed that fermented whey produced by Leuconostoc mesenteroides CJNU 0147 or Lactobacillus casei CJNU 0588 display bifidogenic growth stimulator (BGS) activity. The present study sought to determine if the strain itself can improve the growth of bifidobacteria in co-cultures. In reinforced clostridial medium (RCM), both strains stimulated the growth of a Bifidobacterium lactis strain during the exponential phase and also stimulated the growth during almost all growth phases in whey broth. Fermented whey containing viable Leu. mesenteroides CJNU 0147 and L. casei CJNU 0588 cells maintained viability of the B. lactis strain stored at $10^{\circ}C$ in MRS broth. Viable cell count of the B. lactis strain without the fermented whey was decreased to 5.6 log cfu/mL after 15 days, whereas that of the strain with the fermented whey was slightly increased to 7.1 log cfu/mL as compared with initial viable cell count of 6.9 log cfu/mL.
Soybean curd residue (SCR) was fermented by lactic acid bacteria, Lactobacillus rhamnosus LS and Entercoccus faecium LL, isolated from SCR. The pH, titratable acidify and viable cell counts were determined from the fermented SCR to evaluate the lactic acid production and growth of lactic acid bacteria. Optimal amounts of pretense enzyme and glucose, and ideal fermentation time for SCR fermentation were estimated by response surface methodology (RSM). Raw SCR fermented by indigenous microorganisms had 0.78 % titratable acidity, The acid production in SCR fermented by L. rhamnosus LS was greatly enhanced by the addition of glucose and lactose. However only glucose increased acid production by Ent. faecium LL. The proof test of SCR fermentation demonstrated that similar results for titratable acidity, tyrosine content and viable cell counts to that predicted could be obtained by the at optimized fermentation conditions. In the presence of 0.029 % (w/w) pretense enzyme and 0.9% (w/w) glucose, the SCR fermented by Ent. faecium LL showed 1.07% (w/v) of titratable acidity, 1.02 mg% tyrosine content and 2$\times$10$^{9}$ (cfu/g) of viable cell counts. With the SCR fortified with 0.033% pretense enzyme and 1.7% glucose, L. rhamnosus LS showed 1.8% (w/v) of titratable acidity, 0.92 mg% of tyrosine content and 2$\times$10$^{9}$ (cfu/g) of viable cell counts.
Hara, Kazutaka;Zhang, Daizhou;Yamada, Maromu;Matsusaki, Hiromi;Arizono, Koji
Asian Journal of Atmospheric Environment
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v.5
no.3
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pp.152-156
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2011
Viable bacteria on water-insoluble airborne particles were detected in the urban atmosphere of Kumamoto ($134^{\circ}45'E$, $32^{\circ}28'N$), Japan, in autumn 2008. Airborne particles were collected onto film-covered Cu meshes under clear weather conditions. The samples were stained by fluorescent stains, and then viewed and photographed with an epifluorescent microscope. Non-biological and bacterial parts in particles larger than 0.8 ${\mu}m$ were distinguished by their morphologies, fluorescent colors and fluorescent intensities. Bacterial viable statuses were discriminated according to cell membrane damage. In total, 2681 particles were investigated and it was found that 78 airborne particles were associated with bacteria. Viable bacteria were identified on 48 particles. A few particles carried multiple viable bacteria. These results provide the evidence that airborne particles act as carriers of viable bacteria in the atmosphere.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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