The aim of this study was to detect the efficiency of arsenic trioxide (ATO) alone or together with bortezomib to inhibit proliferation and induce apoptosis in a multiple myeloma (MM) RPMI 8266 cells. Mechanisms of action were also investigated. RPMI 8266 cells were treated with ATO alone and in combination with bortezomib for 24 hours, and cell viability was assessed by modified MTT. Annexin V-F1TC and PI staining was used to detect the apoptosis rate and cell cycling was investigated by flow cytometry, along with expression of cell surface death receptor-4(DR4) and death receptor-5 (DR5). Western blotting was applied to detect the expression of bcl-2, caspase-3, caspase-8, and caspase-9. As a result, the ATO combined with bortezomib group showed more inhibition of RPMI 8266 cell viability than theATO group. Expression of DR4 and DR5 on the cell surfaces, and the apoptosis rate were increased after treatment by ATO alone or combined with bortezomib. The cells appeared to arrest in G2/M phase after treatment. Expression of bcl-2 was more significantly decreased in the combination group, and that of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 was significantly increased as well. Therefore, bortezomib can enhance ATO actions to induce apoptosis in RPMI 8266 cells, with decrease in expression of bcl-2 and increase of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 proteins.
Khoshtabiat, Laya;Mahdavi, Majid;Dehghan, Gholamreza;Rashidi, Mohammad Reza
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.17
no.9
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pp.4267-4273
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2016
Previous studies suggested that dithio-carbamates are potent apoptosis and anti-apoptosis inducing agents in various cancer cells. Here, the anti-proliferative and apoptosis inducing effects of a new derivative (2-NDC) from the dithio-carbamate family was examined in human leukemia K562 cells. We use thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT) to measure viability and cell growth inhibition. The 2-NDC showed effects on viability in a dose and time-dependent manner, inhibiting proliferation at concentrations of $10-30{\mu}M$ after 24-48 hours of treatment and increasing values after 72 hours at $40-120{\mu}M$. The cytotoxic effect of the compound was calculated with an $IC_{50}$ of $30{\mu}M$ after 24-hour. Apoptosis induction was confirmed by acridine orange-ethidium bromide (AO/EtBr) staining, DNA fragmentation assay, flow cytometric assessment and also caspase-3 activation assay. Furthermore, enzymes level such as superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) involved in oxidative stress were evaluated. The results of this study demonstrated insignificant increase of intracellular ROS levels for 24 hours and reduction after 48-72 hours. In addition to reduction of intracellular thiol, caspase-3 like activity was also decreased in a time-dependent manner in cells treated with 2-NDC. Thus 2-NDC can be considered as a good candidate for further pharmaceutical evaluations.
Lee, Dahae;Lee, Dong-Soo;Jung, Kiwon;Hwang, Gwi Seo;Lee, Hye Lim;Yamabe, Noriko;Lee, Hae-Jeong;Eom, Dae-Woon;Kim, Ki Hyun;Kang, Ki Sung
Journal of Ginseng Research
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v.42
no.1
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pp.75-80
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2018
Background: The aim of the present study was to evaluate the potential protective effects of six ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg1, and Rg3) isolated from Panax ginseng against tacrolimus (FK506)-induced apoptosis in renal proximal tubular LLC-PK1 cells. Methods: LLC-PK1 cells were treated with FK506 and ginsenosides, and cell viability was measured. Protein expressions of mitogen-activated protein kinases, caspase-3, and kidney injury molecule-1 (KIM-1) were evaluated by Western blotting analyses. The number of apoptotic cells was measured using an image-based cytometric assay. Results: Reduction in cell viability by $60{\mu}M$ FK506 was ameliorated significantly by cotreatment with ginsenosides Rg1 and Rb1. The phosphorylation of p38, extracellular signal-regulated kinases, and KIM-1, and cleavage of caspase-3, increased markedly in LLC-PK1 cells treated with FK506 and significantly decreased after cotreatment with ginsenoside Rb1. The number of apoptotic cells decreased by 6.0% after cotreatment with ginsenoside Rb1 ($10{\mu}M$ and $50{\mu}M$). Conclusion: The antiapoptotic effects of ginsenoside Rb1 on FK506-induced apoptosis were mediated by the inhibition of mitogen-activated protein kinases and caspase activation.
In the present study, we investigate the protective effect of antioxidant strain Lactobacillus gasseri KACC 91155, isolated from Korean infant feces(Obstetrics & Gynecology, Suwon, Korea) on the oxidative stress damage on the Jurkat T cells. To estimate the extent of cellular lipid peroxidation inhibition, MDA(malondialdehyde) production was measured Furthermore, cell viability was detected by the MTT assay, DNA damage was tested by the comet assay. Cell grown in medium with or without L gasseri lysate$(100\~1,000{\mu}g)$ were treated with $H_2O_2,\;Fe^{2+}$ as an oxidative stimulus. From the result obtained, the supplementation of Jurkat T cells with L. gasseri lysate significantly decreased in MDA production (1,250 vs. 835 nmol/mg protein), and DNA damage(31.6 vs. 22.6 tail moment). Also L gasseri increase cell viability against oxidative damage. We concluded that the L. gasseri KACC 91155 showed a protective effect against oxidative stress.
MicroRNAs (miRNAs) are emerging as critical regulators in carcinogenesis and tumor progression. Recently, miR-99a has been reported as a tumor suppressor gene in various human cancers, but its functions in the context of anaplastic thyroid cancer (ATC) remain unknown. In this study, we reported that miR-99a was commonly downregulated in ATC tissue specimens and cell lines with important functional consequences. Overexpression of miR-99a not only dramatically reduced ATC cell viability by inducing cell apoptosis and accumulation of cells at G1 phase, but also inhibited tumorigenicity in vivo. We then screened and identified a novel miR-99a target, mammalian target of rapamycin (mTOR), and it was further confirmed by luciferase assay. Up-regulation of miR-99a would markedly reduce the expression of mTOR and its downstream phosphorylated proteins (p-4E-BP1 and p-S6K1). Similar to restoring miR-99a expression, mTOR down-regulation suppressed cell viability and increased cell apoptosis, whereas restoration of mTOR expression significantly reversed the miR-99a antitumor activity and the inhibition of mTOR/p-4E-BP1/p-S6K1 signal pathway profile. In clinical specimens and cell lines, mTOR was commonly overexpressed and its protein levels were statistically inversely correlated with miR-99a expression. Taken together, our results demonstrated for the first time that miR-99a functions as a tumor suppressor and plays an important role in inhibiting the tumorigenesis through targeting the mTOR/p-4E-BP1/p-S6K1 pathway in ATC cells. Given these, miR-99a may serve as a novel prognostic/diagnostic and therapeutic target for treating ATC.
Nepeta cataria L. has been used in traditional medicine of some countries. Here the cytotoxic and apoptogenic activity of methanol extracts, n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, n-butanol, and acqueous extracts and the essential oil obtained from the aerial parts of the plant were evaluated with PC3, DU-145 and MCF-7 cell lines. Cell viability, histograms of PI stained fragmented DNA in apoptotic cells and Western blot analysis of proteins involved in the cascade of apoptosis were compared in all samples. Thirty components were identified as volatile, representing 99.7% of essential oil composition after GC-MS analysis of the oil obtained from aerial parts of the N. cataria by hydro-distillation. The major oil components of the essential oil were nepetalactone stereoisomers. Comparing IC50 values showed estrogen receptor positive PC3 cells were more sensitive to the cytotoxic effects of N. cataria in comparison with low hormone-receptor presenting DU-145 cells. Among multiple extracts and essential oils of the plant, only the ethyl acetate extract could significantly decrease cell viability in PC3 cells, in a concentration dependent manner. Ethyl acetate extract of N. cataria treated cells showed a sub-G1 peak in PC3 cells in a concentration dependent manner that indicates the involvement of an apoptotic process in ethyl acetate extract-induced cell death. Western blotting analysis showed that in PC3 cells treated with ethyl acetate (48 h) caspase 3 and PARP were cleaved to active forms. Overall, the results suggest that further analytical elucidation of N. cataria in respect to finding new cytotoxic chemicals with anti-tumor activity is warranted.
Lee, Kang Pa;Choi, Nan Hee;Kim, Jin Teak;Park, In-Sik
Nutrition Research and Practice
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v.9
no.3
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pp.256-261
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2015
BACKGROUND/OBJECTIVES: Yacon (Samallanthus sonchifolius), a common edible plant grown throughout the world, is well known for its antidiabetic properties. It is also known to have several other pharmacological properties including anti-inflammatory, anti-oxidant, anti-allergic, and anti-cancer effects. To date, the effect of yacon on gliomas has not been studied. In this study, we investigated the effects of yacon on the migration and proliferation of C6 glioma cells stimulated by fetal bovine serum (FBS). MATERIALS/METHODS: Cell growth and proliferation were determined by evaluating cell viability using an EZ-Cytox Cell Viability Assay Kit. FBS-induced migration of C6 glioma cells was evaluated by performing the scratch wound healing assay and the Boyden chamber assay. We also used western blot analysis to determine the expression levels of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), a major regulator of migration and proliferation of glioma cells. Matrix metallopeptidase (MMP) 9 and TIMP-1 levels were measured by performing reverse transcription PCR. RESULTS: Yacon ($300{\mu}g/mL$) reduced both the FBS-induced proliferation of C6 glioma cells and the dose-dependent migration of the FBS-stimulated C6 cells. FBS-stimulated C6 glioma cells treated with yacon (200 and $300{\mu}g/mL$) showed reduced phosphorylation of ERK1/2 and inhibition of MMP 9 expression compared to those shown by the untreated FBS-stimulated C6 cells. In contrast, yacon (200 and $300{\mu}g/mL$) induced TIMP-1 expression. CONCLUSIONS: On the basis of these results, we suggest that yacon may exert an anti-cancer effect on FBS-stimulated C6 glioma cells by inhibiting their proliferation and migration. The most likely mechanism for this is down-regulation of ERK1/2 and MMP9 and up-regulation of TIMP-1 expression levels.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.30
no.5
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pp.301-307
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2016
The purpose of this study is to research the whitening effects of fermentation extract made from the Rice bran and Dendropanax(FRD) Fermentation conditions were as follows; 1) Dendropanaxand and Rice bran were blended in a ratio of 1 to 1, 2) a weight of sugar was 10% of the total weight, 3) an amount of enzyme was 0.1%, and 4) a temperature was 20℃. It has been fermented for 90 days. In order to observe the whitening effects of FRD, the author measured the cell viability and the inhibition rate of the melanin biosynthesis, the activity of tyrosinase and SOD (superoxide dismutase) in malignant melanoma, B16F10 cells. As a result, FRD significantly inhibited the cell viability of B16F10 in more than 500 ㎍/㎖. FRD significantly suppressed the generation of melanin, and that induced by α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH) in more than 1,000 ㎍/㎖. FRD significantly decreased the activity of tyrosinase and that induced by α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH) in more than 500 ㎍/㎖. FRD did not changed the activity of SOD in dose dependent manner. Therefore, the author considered that the fermentation extract made from a Rice bran and Dendropanax will be able to produce high value-added products, if used as a commercial. Therefore, the author considered that the fermentation extract made from a Rice bran and Dendropanax will be able to produce high value-added products, if used as a commercial.
Soil column experiments were evaluated effects of silver nanoparticles (i.e., 0, 2.5, 5, and 10 mg/L) on the microbial viability which is strongly associated with the degradation of organic matter, pharmaceutically active compounds(PhACs) and biological oxidation of nitrogenous compounds during river bank filtration. The addition of silver nanoparticles resulted in almost no change in the aqueous matrix. However, the intact cell concentration decreased with addition of silver nanoparticles from 2.5 to 10 mg/L, which accounted for 76% to 82% reduction compared to that of control (silver nanoparticles free surface water). The decrease in adenosine triphosphate was more pronounced; thus, the number and active cells in aqueous phase were concurrently decreased with added silver nanoparticles. Based on the florescence excitation-emission matrix and liquid chromatograph - organic carbon detection analyses, it shows that the removal of protein-like substances was relatively higher than that of humic-like substances, and polysaccharide was substantially reduced. But the extent of those substances removed during soil passage was decreased with the increasing concentration of silver nanoparticles. The attenuation of ionic PhACs ranged from 55% to 80%, depending on the concentration of silver nanoparticles. The attenuation of neutral PhACs ranged between 72% and 77%, which was relatively lower than that observed for the ionic PhACs. The microbial viability was affected by silver nanoparticles, which also resulted in inhibition of nitrifiers.
The objective of this study is to investigate the effects of Cynanchum wilfordii (CW) on cell viability, anti-oxidant activity, volatile fatty acid (VFA) production and methane gas production. Collected rumen fluid incubated with CW powder (1% w/v) for 12 and 24 hours were analyzed for pH, VFAs and methane. Alamar blue assay showed no significant difference on the viability of 3T3-L1 and C2C12 cells treated with CW for 24 hours. TBARS data showed a dose dependent increase on the antioxidant activity of CW. VFAs increased in the CW-treated groups compared to the control group. In addition, propionate increased more than other VFAs by the treatment with CW. There was a significant decrease in methane gas production in batch culture treated with CW in 12hrs. In conclusion, it was suggested that Cynanchum wilfordii could manipulate rumen fermentation considered by increasing VFA production and inhibition of methanogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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