Autophagy is one of the lysosomal degradation pathways to maintain cellular homeostasis. The damaged proteins or organelles are uptaken through extra- and intra-cellular stress, starvation and infected pathogens, subsequently, autophagosomes are fused with lysosomes to break down the molecules. Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium), intracellular bacteria, cause acute gastroenteritis and food poisoning. Given that autophagy induced by S. Typhimurium plays an important role in the cells to control the infection, we identify whether the induction of autophagy with rapamycin, chemical inducer of autophagy, before infection regulates S. Typhimurium infection. After treatment of rapamycin or 3-methyladenine (3-MA), autophagy inhibitor, RAW264.7 cells were infected with S. Typhimurium. Pretretment of rapamycin decreased the growth rate of S. Typhimurium in the cells; otherwise, pretreatment of 3-MA increased the growth rate of S. Typhimurium. The expression of autophagy-related genes was significantly increased in the S. Typhimurium-infected cells pretreated with rapamycin. To examine whether induced autophagy by rapamycin control the infection with increase the production of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO), antibacterial radical substrates were measured in infected cells followed by the treatment with either rapamycin or 3-MA. NO production increased in RAW264.7 cells; otherwise, ROS production remained unchanged during the infection. These findings suggest that inducing autophagy with rapamycin reveals antimicrobial activity as producing NO against S. Typhimurium infection in mouse macrophages.
In an effort to evaluate Salmonella food safety using combinations of preservation techniques, its viabilities when exposed to HCl, acetic acid, and the oxidative agents (hydrogen peroxide and butyl hydrogen peroxide), were analyzed using sub-lethal heat-shocked Salmonella Typhimurium at $56^{\circ}C$. 2D gel electrophoresis and MALDI-TOF MS analyses were also conducted to determine the expression and repression of proteins in heat-shocked cells. Heat-shocked S. Typhimurium evidenced a reduction of viable counts by 1-2 log CFU/mL. However, viality of non heat-shocked S. Typhimurium decreased markedly by 5-6 log CFU/mL at a pH 4 in response to acid and oxidative stresses. Sub-lethal heat treatment greatly increased the resistance of S. Typhimurium against acid and oxidant agents. As for 2D gel electrophoresis and protein identification via MALDI-TOF MS, 17 major proteins in non heat-shocked S. Typhimurium were detected, and only 13 proteins among these proteins were detected in heat-shocked S. Typhimurium. The heat shock proteins such as DnaK and small heat shock proteins were included, and may be associated with the resistance of S. typhimurium against exposure to acids and oxidants. Therefore, even though the promising hurdle technology using the combined mild treatments including heat was applied to S. Typhimurium, the proper heat treatment to reduce its crossprotection activity toward the following preservative agents might be considered.
In this study, the antibacterial activity and mechanisms of bitter orange extract, a natural antibacterial agent, were investigated, with a focus on its potential application in washing water for controlling Salmonella Typhimurium contamination of salad, a ready-to-eat food. The minimum inhibitory concentration (MIC) of bitter orange extract against S. Typhimurium was determined using the broth dilution method. Subsequently, S. Typhimurium was exposed to various concentrations of bitter orange extract (1/16 MIC-2 MIC) and growth curves were measured. Following treatment with bitter orange extract, we investigated its antibacterial mechanism by measuring intracellular reactive oxygen species (ROS) levels, alterations in membrane potential and integrity, and nucleic acid leakage in S. Typhimurium. Additionally, salads artificially contaminated with S. Typhimurium were treated with different concentrations of bitter orange extract using the dipping method for various durations to assess the reduction effect. The MIC of bitter orange extract against S. Typhimurium was 195.313 mg/L, and bacterial growth was completely inhibited at a concentration of 1 MIC. Furthermore, an increase in bitter orange extract concentration correlated with elevated intracellular ROS levels, membrane potential disruption, membrane damage, and nucleic acid release. Importantly, salads treated with bitter orange extract exhibited a significant reduction in S. Typhimurium counts compared to the control, and prolonged treatment times resulted in further reductions in bacterial counts. Bitter orange extract was more effective than sodium hypochlorite and can be used as a safer salad wash. These findings indicate the potential treatment of salads to prevent foodborne illnesses.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.6
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pp.1163-1166
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2002
Antimicrobial activity of silver ion was tested against 3 kinds of food-borne microorganisms-Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus and Vibrio parahaemolyticus-using paper disk and broth medium methods. In paper disk method, silver ion showed antimicrobial activity against S. typhimurium and V. parahaemolyticus at the concentration above 2 ppm and 10 ppm, respectively, where as it was not detected in S. aureus with 20 ppm of silver ion concentration. In broth medium, the growth of S. typhimurium and V. Porahaemolyticus could be retarded at 0.3 ppm and 0.5 ppm of silver ion concentration respectively. In the presence of 1.0 ppm of silver ion, the growth of S. typhimurium was inhibited completely. In S. aureus, the growth was retarded at 5 ppm and was inhibited at l5 ppm completely.
Kim, Sang-Yun;Lee, Hee-Moo;Kim, Sin;Hong, Hyon-Pyo;Kwon, Heon-Il
Korean Journal of Veterinary Service
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v.24
no.1
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pp.69-82
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2001
The result of studying the pathogenicity of Salmonella typhimurium and S enteritidis isolated from domestic animals in Gyeongbuk province were summarized as follows. In Congo-red binding test, S typhimurium had much more rough types than S enteritidis. In colicin production test, 4 strains of S typhimurium were positive but all of S enteritidis were negative. In hemolysin production test, all of S typhimurium and S enteritidis were negative. In Guinea pig serum resistant test, all of S typhimurium and S enteritidis were positive. As a result of pathogenicity test to mice, 54.4% of mice were died. Therefore, S typhimurium and S enteritidis were considered as highly pathogenic. S typhimurium DT104 and S enteritidis PT4 were more pathogenic to mice than other phage types of same serovar. S typhimurium and S enteritidis were considered not so pathogenic for 6-day-old chickens. The recovery rates of Salmonella stains from mice and chickens inoculated were 96.8%, and 54%, respectively. In chickens, proportional to the time from 2 weeks after challenge inoculation, the recovery rates were noticeably decreased.
This study was performed to predict the multiplication growth patterns of Salmonella typhimurium according to the holding methods and times in cooked foods served at foodservice institutions. When simmered pork in soy sauce and ham and cucumber salad were inoculated with S. typhimurium (7.00 logCFU/g) and tested according to holding methods and times, room temperature holding showed a continuous increase in S. typhimurium count as time passed, whereas 80$^{\circ}C$ heating table sharply reduced the count to 4.00 (logCFU/g) after 2hrs of holding and to zero after 6hrs, which suggested that all S. typhimurium were destroyed. However, 5$^{\circ}C$ refrigerator holding showed a count increase, although it wasis still lower than that at room temperature and at 10$^{\circ}C$ cold table holding, which suggested that S. typhimurium is comparatively resistive to low temperature.
The purpose of this study was to examine the cellular response of Salmonella typhimurium exposed to tea polyphenols (TPP) extracted from Korean green tea (Camellia sinensis L.). TPP showed a dose-dependent bactericidal effect on S. typhimurium. Analysis of cell membrane fatty acids of S. typhimurium cultures treated with TPP identified unique changes in saturated and unsaturated fatty acids, while scanning electron microscopic analysis demonstrated the presence of perforations and irregular rod forms with wrinkled surfaces in cells treated with TPP. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis of soluble protein fractions from S. typhimurium cultures showed 16 protein spots increased by TPP. These up-regulated proteins including proteins involved in antioxidants and chaperons, transcript and binding proteins, energy and DNA metabolism were identified by peptide mass fingerprinting using MALDI-TOF. These results provide clues for understanding the mechanism of TPP induced stress and cytotoxicity on S. typhimurium.
Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) is a facultative intracellular pathogen that causes salmonellosis and mortality worldwide. S. Typhimurium infects macrophages and survives within phagosomes by avoiding the phagosome-lysosome fusion system. Phagosomes sequentially acquire different Rab GTPases during maturation and eventually fuse with acidic lysosomes. Lysophosphatidylcholine (LPC) is a bioactive lipid that is associated with the generation of chemoattractants and reactive oxygen species (ROS). In our previous study, LPC controlled the intracellular growth of Mycobacterium tuberculosis by promoting phagosome maturation. In this study, to verify whether LPC enhances phagosome maturation and regulates the intracellular growth of S. Typhimurium, macrophages were infected with S. Typhimurium. LPC decreased the intracellular bacterial burden, but it did not induce cytotoxicity in S. Typhimurium-infected cells. In addition, combined administration of LPC and antibiotic significantly reduced the bacterial burden in the spleen and the liver. The ratios of the colocalization of intracellular S. Typhimurium with phagosome maturation markers, such as early endosome antigen 1 (EEA1) and lysosome-associated membrane protein 1 (LAMP-1), were significantly increased in LPC-treated cells. The expression level of cleaved cathepsin D was rapidly increased in LPC-treated cells during S. Typhimurium infection. Treatment with LPC enhanced ROS production, but it did not affect nitric oxide production in S. Typhimurium-infected cells. LPC also rapidly triggered the phosphorylation of IκBα during S. Typhimurium infection. These results suggest that LPC can improve phagosome maturation via ROS-induced activation of NF-κB pathway and thus may be developed as a therapeutic agent to control S. Typhimurium growth.
The aim of this study was to investigate the antimicrobial characteristics of citral against Salmonella Typhimurium and Staphylococcus aureus. Antimicrobial activities were determined according to the citral concentration and initial pH. The tested citral concentrations were 0-1,000 ppm in tryptic soy broth (TSB) and 0-5,000 ppm in Angelica keiskei juice (NokJeup). The initial pHs tested were 4-7. Antimicrobial activities increased as citral concentration increased. S. aureus was more susceptible than S. Typhimurium during culture in TSB. But S. aureus was less susceptible to pH changes. Citral caused about 1-2 log reduction of S. aureus and 2-5 log reduction of S. Typhimurium after 10 min exposure at different pHs. As the citral concentration in the Algelica keiskei juice increased, S. aureus was easily inactivated but S. Typhimurium was not inactivated.
Sohn, Jun Hyung;Kim, Mee Suk;Lee, Young Mi;Do, Jae Cheul
Korean Journal of Veterinary Service
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v.40
no.2
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pp.83-87
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2017
59 strains of Salmonella enterica subspecies enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) were isolated from pigs in Gyeongbuk province, collected from 2011 to 2016. The isolates were investigated for the presence of antimicrobial resistance and multi drug resistance patterns. All 59 S. Typhimurium isolates were resistant to at least one of 10 antibiotics used in this study, 100% of S. Typhimurium isolates from pigs were resistant to two or more antimicrobials. As many as 5 isolates of isolates from pigs were resistant to 8 of 10 antimicrobials tested in this study. The ACSTNaGmKNaCf, ACSTGmAuKT/S, ACSTGmKCfT/S resistance phenotype was observed in 3.4%, 3.4%, 1.7% of the 59 isolates, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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