• BMB Reports
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• 제42권5호
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• pp.260-264
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• 2009

Tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$) exhibits cytotoxicity towards various tumor cells in vitro and induces apoptotic necrosis in transplanted tumors in vivo. It also shows severe toxicity when used systemically for the treatment of cancer patients, hampering the development of TNF-$\alpha$ as a potential anticancer drug. In order to understand the structure-function relation of TNF-$\alpha$ with respect to receptor binding, we selected four regions on the bottom of the TNF-$\alpha$ trimer that are in close contact with the receptor and carried out mutagenesis studies and computational modeling. From the study, various TNF-$\alpha$ muteins with a high therapeutic index were identified. These results will provide a structural basis for the design of highly potent TNF-$\alpha$ for therapeutic purposes. By conjugating TNF-$\alpha$ muteins with a high therapeutic index to a fusion partner, which targets a marker of angiogenesis, it could be possible to develop TNF-$\alpha$ based anticancer drugs.

• 생명과학회지
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• 제16권7호
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• pp.1207-1213
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• 2006

Tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$는 염증성 골질환에서의 골조직의 손실과 밀접한 관련이 있다. 본 연구에서는 인체 골수 유래 중간엽 줄기세포의 골세포로의 분화과정에 대한 $TNF-{\alpha}$의 영향을 조사하였다. $TNF-{\alpha}$는 골수 유래 중간엽 줄기세포의 골세포로의 분화를 나타내는 표시인 세포외 무기질 축적과 alkaline phosphatase의 발현의 증가를 일으켰으며 2ng/ml의 농도에서 최대의 증가를 나타내었다. $TNF-{\alpha}$에 의한 골세포로의 분화는 $NF_kB$의 저해제에 의해서는 영향받지 않았으나 JNK 특이 저해제인 SP600125에 의해 완벽하게 억제되었다. 이는 $TNF-{\alpha}$에 의한 골수 유래 중간엽 줄기세포의 골세포로의 분화과정에 JNK가 중요한 역할을 한다는 것을 제시한다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제26권1호
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• pp.97-101
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• 1999

Male genital tract inflammatory conditions may be associated with unexplained infertility. The presence of cytokine such as tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) was reported in the semen of infertile men. However, the effect of these cytokines on human sperm function is still unclear. The purpose of this study was to investigate the in-vitro effects of TNF-alpha on human sperm motility with computer assisted sperm analysis. Washed sperm from 16 normal men were incubated without and with TNF-${\alpha}$ (0.1, 10, 1000 ng/ml). The changes of parameters of sperm motility were recorded at different time intervals (0, 5, 24 hour). There was no significant change of parameters of sperm motility in the incubation with TNF-${\alpha}$. It is suggested that TNF-${\alpha}$ alone does not interfere with the sperm motility and more studies are needed.

• Toxicological Research
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• 제11권2호
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• pp.169-173
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• 1995

The effects of tumor necrosis factor alpha $(TNF-{\alpha})$ on growth and tubular formation of bovine aortic endothelial cells were examined using an in vitro angiogenesis model system. The growth of endothelial cells was enhanced in a dose-dependent manner when the cells were cultured with $TNF-{\alpha}$ for 3 days, but $TNF-{\alpha}$, at the concentration of 1 nM or higher, produced a growth inhibition of endothelial cells when the cells were cultured for 8 days. The endothelial cells incubated with $TNF-{\alpha}$ for 48-h exhibited a typical morphologic change. Then, they showed a fibroblastoid organization of overlapping, elongated, and spindle-shaped cells. $TNF-{\alpha}$, at the concentration of O. 1 nM or higher, inhibited the tubular formation of vascular endothelial cells in an in vitro anglogenesis model using a 3-dimensional culture system.

• Journal of Life Science
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• 제12권2호
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• pp.57-60
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• 2002

Apoptosis of vascular smooth muscle cell is observed in the vascular diseases such as atherosclerosis and restenosis. The death of vascular smooth muscle cells can be induced by cytokines and activation of Fas-pathways. It is widely accepted that apoptosis occurs without inflammation. There are, however, reports that apoptosis is not silent. Vascular smooth muscle cells dying by Fas-pathway secreted inflammatory cytokines including monocyte chemoattractant protein-1. This study have investigated whether apoptosis is associated with potent inflammatory cytokine tumor tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$. The cells which undergo apoptosis by expressing FADD in the absence of tetracycline expressed and secreted TNF-${\alpha}$. When the level of TNF-${\alpha}$ transcript was investigated, dying smooth muscle cells exhibited transcriptional activation of TNF-${\alpha}$. The data indicate that dying vascular smooth muscle cells contribute to inflammation by expressing inflammatory cytokines. The present study suggests that apoptosis could not be silent in certain pathological situations.

• BMB Reports
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• 제29권6호
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• pp.530-534
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• 1996

Astrocyte are the major glial cell type in the central nervous system (CNS), and analogous to macrophage, mediates the number of immune responses such as production of cytokines including tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) upon activation. $TNF-{\alpha}$ has been implicated in neuroimmunological disorders through killing oligodendrocytes and thus causing demyelination. It has been previously demonstrated that mitogen-activated T cells synthesized a 26 kDa precursor form of $TNF-{\alpha}$ which is bound to the surface of a membrane, and is later secreted as a 17 kDa mature version. In order to examine whether astrocytes would produce the transmembrane form of $TNF-{\alpha}$, astrocytes were stimulated with biological stimuli and the membrane form of $TNF-{\alpha}$ was analyzed by Western blot and FACS analysis. When astrocytes are stimulated with lipopolysaccharide (LPS), $IFN-{\gamma}/LPS$, or $IFN-{\gamma}/IL-1{\beta}$, they were able to express a membrane-anchored $TNF-{\alpha}$ of approximately 26 kDa protein which was immunoreactive to an $anti-TNF-{\alpha}$ antibody, whereas unstimulated astrocytes or astrocytes treated with $IFN-{\gamma}$ or $IL-1{\beta}$ alone was not. Our FACS data were also consistent with the immunoblot analysis. Our result suggests that the membrane form of $TNF-{\alpha}$ expressed by activated astrocytes may cause local damage to oligodendrocytes by direct cell-cell contact and contribute to demyelination observed in multiple sclerosis (MS) and experimental allergic encephalomyelitis (EAE).

• Archives of Pharmacal Research
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• 제22권4호
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• pp.348-353
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• 1999

Possible antiinflammatory effect of eudesmin were examined by assessing the effects on tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ production and lymphocyte proliferation as well as cytotoxicity against murine and human macrophages. the compound significantly inhibited TNF-$\alpha$, production by lipopolysaccaride (LPS)-stimulated murine macrophage RAW264.7 without displaying cytotoxicity suggesting that eudesmin may inhibit TNF-$\alpha$ production without any interference of normal cell function. It also significantly attenuated T cell proliferation stimulated by concanavalin A (Con A) in a dose-dependent manner.

• 생명과학회지
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• 제17권1호
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• pp.45-50
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• 2007

세포 배양액에 tetracycline이 없는 경우 FADD를 발현하면서 사멸하는 평활근세포 (FADD-SMC)에서 분비하는 $TNF-\alpha$의 활성을 조사하였다. 배양액에 tetracycline이 없는 경우 FADD-SMC는 약 1000 pg/ml의 $TNF-\alpha$를 분비하였다. $TNF-\alpha$를 포함하는 배양액을 분리하고, 이 배양액을 정상세포에 처리한 결과 인산화한 p38 MAPK와 nuclear, factor, kappa B (NF-kB)의 활성이 증가하였다. 또한 이 배양액을 L929 세포에 처리하는 경우 세포독성이 발생하였다. NF-kB, p38 MAPK 그리고 L929 세포에 대찬 효과는 배양액에서 suluble TNF receptor를 이용하여 $TNF-\alpha$를 제거하는 경우 감소하였다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제5권2호
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• pp.101-106
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• 2001

Insulin과 tumor necrosis factor alpha(TNF-$\alpha$)에 의한 초기 배아 발생의 조절기작을 알아보고자 생쥐의 상실배를 대상으로 이들이 첨가된 배양액에서 형태발생, 세포증식을 조사하고, 포배에서 mitogen activated protein kinase(MAPK, ERK1/2)의 활성 변화에 미치는 영향을 조사하였다. Insulin은 상실배의 체외발생 및 포배내 할구 수를 대조군에 비해 유의하게 증가시켰으며, TNF-$\alpha$는 발생율을 유의하게 감소시켰다. Insulin은 TNF- $\alpha$에 의한 배아 발생율 감소를 완화하였다. TNF-$\alpha$는 농도에 의존적으로 MAPK 활성을 감소시켰으며, insulin은 포배에서 MAPK의 활성을 유의하게 증가시킨 반면 TNF-$\alpha$는 처리농도에 의존적으로 MAPK 활성을 감소시켰다. 50 ng/ml 농도의 TNF-$\alpha$를 전처리한 포배에서는 insulin에 의한 MAPK 활성의 증가가 저해되었다. 이러한 결과로부터 생쥐의 착상전 초기 배아 발생조절에 insulin과 TNF-$\alpha$ 사이에 MAPK를 경유하는 cross talk이 존재함을 확인하였고 insulin은 TNF-$\alpha$ 에 의한 배아의 손상을 억제하는 것으로 사료된다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제34권2호
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• pp.138-147
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• 2001

배경: 폐암발생에 EGF의 자가 분비는 암의 성장과정에 직, 간접적인 영향을 주고 있으며, TNF-$\alpha$는 면역 반응의 급성체로서 폐암의 발생을 억제하고 이미 발생한 폐암종의 치료에도 이용되고 있는 실정이다. 폐암 조직과 혈장에서 epidermal growth factor(EGF)와 tumor necrosis factor-$\alpha$(TNF-$\alpha$)를 면역 방사선 분석법을 이용하여 정량분석 하여 발현 정도를 분석해보고자 하였다. 대상 및 방법: 폐암환자 20례와 양성종양 및 육아종 환자 4례에 대해서 AJCCS에 의한 조직학적 분류와 TNM 분류에 따라 구분하여 절제수술을 받은 환자를 대상으로 수술전 혈액을 채취하고 수술직후 적출한 표본을 암이 없는 건강하다고 판단되는 대조조직과 폐암조직에서 일정량의 조직을 절취하여 액화질소 내에 실험시까지 급속 냉동보관 하였다. 수술후 혈액을 재 채취하여 혈장을 분리하여 냉동고에 검사시까지 보관하였다. EGF의 정량은 Human Epidermal Growth Factor kit(Amersham Phamacia Biotech, England)를 사용하였으며, TNF-$\alpha$ 정량은 TNF-$\alpha$ IRMA kit(Biosouce, Belgium)을 사용하여 IRMA 방법으로 각각 정량분석하여 표현유무를 연구한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 결과: 1. 대조조직, 양성종양 및 육아종과 폐암 수술전후의 조직과 혈청 모두에서 EGF와 TNF-$\alpha$가 발현되었다. 2. EGF와 TNF-$\alpha$의 농도는 대조조직과 양성종양(0.11$\pm$0.06 ng/ml, 20,3$\pm$9.08 pg/ml)에 비하여 폐암조직(0.13$\pm$0.05 ng/ml, 34.34$\pm$47.74pg/ml)에서 유의하게 높은 농도가 발현되고 있었다. 3. 폐암중 선암조직에서 특히 TNF-$\alpha$(80.92$\pm$104.08 ng/ml)의 발현이 강하게 나타났다. 4. 혈청내의 EGF와 TNF-$\alpha$의 발현되는 양이 조직내의 양보다도 높았다. EGF는 5.7배정도 TNF는 1.3배정도 강하게 표현되었다. 5. 폐암의 조직학적 종류에 따라서 EGF는 거의 차이가 없었으나 TNF-$\alpha$ 정량치에는 차이가 있었다. 6. TNM stage가 진행함에 따라 EGF는 농도가 증가하였고 TNF-$\alpha$는 오히려 감소하는 반대되는 교차현상이 있었다. 7. 수술직후 EGF는 증가하였으나 TNF-$\alpha$는 오히려 감소하였다. 결론: 결론적으로 저자는 암조직과 대조조직간에 EGF와 TNF-$\alpha$의 표현량의 차이가 있음을 관찰하였으며 또한 조직과 혈청사이에도 표현량에 차이가 있으며 조직보다도 오히려 혈청내의 농도가 높다는 사실을 관찰하였다. EFG와 TNF-$\alpha$는 정상조직이나 양성조직과 폐암조직 모두에서 분비작용되는 cytokines으로 세포기능에 따라 다양하게 표현이 되며 계속적인 연구로서 밝혀야만 할 과제라고 판단된다.