Objectives : We investigated whether snake venom toxin(SVT) from Vipera lebetina turanica sensitizes HT29 human epithelial colorectal cancer cells to tumor necrosis factor(TNF)-related apoptosis-inducing ligand(TRAIL) induced apoptosis in cancer cells. Methods : Cell viability assay was used to assess the inhibitory effect of TRAIL on cell growth of HT29 human colorectal cancer cells. And 6-diamidino-2-phenylindole(DAPI), terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling assay(TUNEL) staining assay were used to evaluate cell-apoptosis. Western blot analysis were conducted to observe apoptosis related proteins and death receptor. To assess whether the synergized inhibitory effect of SVT and TRAIL on reactive oxygen species(ROS) generation was reversed by strong anti-oxidative agent. Results : SVT with TRAIL inhibited HT29 cell growth different from TRAIL alone. Consistent with cell growth inhibition, the expression of TRAIL receptors; Expression of death receptor(DR)4 and DR5 was significantly increased and intrinsic pro-apoptotic cleaved caspase-3, -9 was subsequently increased together with increase of Bax/Bcl-2 ratio and extrinsic pro-apototic caspase-8 was also activated. In addition, the expression of anti-apoptotic survival proteins, a marker of TRAIL resistance(eg, cFLIP, survivin, X-linked inhibitor of apoptosis protein(XIAP) and Bcl-2) was suppressed by the combination treatment of SVT and TRAIL. Pretreatment with the ROS scavenger N-acetylcysteine abolished the SVT and TRAIL-induced upregulation of DR4 and DR5 expression and expression of the intrinsic pro-apoptotic caspase-3 and-9. Conclusion : The collective results suggest that SVT facilitates TRAIL-induced apoptosis in $HT_{29}$ human epithelial colorectal cancer cells through up-regulation of the TRAIL receptors; DR4 and DR5 and consecutive induction of bilateral apoptosis via regulating apoptosis related proteins.
Background: There is a long standing interest in the identification of medicinal plants and derived natural products for developing cancer therapeutics. Here we investigated the antiproliferative properties of Melissa officinalis (MO) from Turkey on breast cancer. Methods: MO extracts were studied for cytotoxicity against breast cancer cell lines (MCF-7, MDA-MB-468 and MDA-MB-231). In vitro apoptosis studies were performed by annexin V staining and flow cytometry analyses. Immunohistochemistry for Ki-67 and caspase 7 in the tumoral tissue sections of DMBA-induced mammary tumors in rats was also performed, along with TUNEL assays to detect apoptotic cells. In vivo anticancer activity testing was carried out with reference to inhibition of growth of DMBA induced mammary tumors in rats. Results: MO showed cytotoxicity against three cancer cell lines, inducing increase in Annexin-positive cells. Expression of caspase-7 protein and TUNEL positive cells were much higher in rats treated by MO, compared with the untreated control group, while expression of Ki-67 was decreased. Furthermore, in vivo studies showed that mean tumor volume inhibition ratio in MO treated group was 40% compared with the untreated rats. Conclusion: These results indicated that MO extrcts have antitumoral potential against breast cancer.
Purpose: To investigate the antitumor activity and mechanism of chloroquine (CQ) in combination with cisplatin (DDP) in nude mice xenografted with gastric cancer SGC7901 cells. Materials and Methods: 35 cases of gastric cancer patients with malignant ascites were enrolled and intraperitoneal cisplatin injection was performed. Ascites were collected before and 5 days after perfusion for assessment of autophagy levels in cancer cells. In addition, 24 tumor-bearing mice were randomly divided into control, DDP, CQ and CQ + DDP groups. Results: In 54.3% (19/35) of patients the treatment was therapeutically effective (OR), 5 days after peritoneal chemotherapy, 13 patients had the decreased ascites Beclin-1 mRNA levels. In 16 patients who had NR, only 2 cases had decreased Beclin-1 (P=0.001). Compared with the control group, the xenograft growth in nude mice in the DDP group was low, and the inhibition rate was 47.6%. In combination with chloroquine, the inhibition rate increased to 84.7% (P<0.01). The LC3-II/I ratio, and Beclin1 and MDR1/P-gp expression were decreased, while caspase 3 protein levels increased (P<0.05). Conclusions: Antitumor ability of cisplatin was associated with autophagy activity and chloroquine can enhance chemosensitivity to cisplatin in gastric cancer xenografts nude mice.
Shin, Tai-Sun;Choi, Kap Seong;Chun, Jiyeon;Kho, Kang-Hee;Son, Seon Ah;Shim, Sun-Yup
한국미생물·생명공학회지
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제50권1호
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pp.22-30
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2022
Haliotis discus hannai called abalone, is the valuable marine mollusks and the by-products of abalone processing are viscera. Brownish abalone male viscera (AMV), which have not been reported as having anti-inflammatory effects, was extracted with acetone and fractionated by different six acetone/hexane ratios (0, 10, 20, 30, 40, and 100%) using a silica column via in vitro ABTS and DPPH radical and nitric oxide (NO) production assay-guided fractionation. Among the fractions, the acetone/hexane ratio 40%, A40 exhibited the most potent radical scavenging activities and inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced NO production without cytotoxicity. A40 inhibited LPS-induced intracellular reactive oxygen species (ROS) production in a dose-dependent manner. Western blot analysis revealed that A40 down-regulated the activation of NF-κB, MAPK (ERK 1/2, p-38, and JNK), and inflammatory enzymes, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase (COX)-2. Moreover, this fraction inhibited the generation of pro-inflammatory cytokines such as interleukin (IL)-1β, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF)-α. These results suggested that AMV containing A40 with anti-inflammatory and anti-oxidantive effects, is the effective therapeutic and functional material for treating inflammatory disorders.
Kim, Ji Sung;Park, Yun Soo;Kim, Ju Young;Kim, Yong Guk;Kim, Yeon Jin;Lee, Hong Kyung;Kim, Hyung Sook;Hong, Jin Tae;Kim, Youngsoo;Han, Sang-Bae
IMMUNE NETWORK
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제12권6호
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pp.247-252
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2012
Pancreatic cancer is the fourth commonest cause of cancer-related deaths in the world. However, no adequate therapy for pancreatic cancer has yet been found. In this study, the antitumor activity of cytokine-induced killer (CIK) cells against the human pancreatic cancer was evaluated in vitro and in vivo. Human peripheral blood mononuclear cells were cultured with IL-2-containing medium in anti-CD3 for 14 days. The resulting populations of CIK cells comprised 94% $CD3^+$, 4% $CD3^-CD56^+$, 41% $CD3^+CD56^+$, 11% $CD4^+$, and 73% $CD8^+$. This heterogeneous cell population was called cytokine-induced killer (CIK) cells. At an effector-target cell ratio of 100 : 1, CIK cells destroyed 51% of AsPC-1 human pancreatic cancer cells, as measured by the $^{51}Cr$-release assay. In addition, CIK cells at doses of 3 and 10 million cells per mouse inhibited 42% and 70% of AsPC-1 tumor growth in nude mouse xenograft assays, respectively. This study suggests that CIK cells may be used as an adoptive immunotherapy for pancreatic cancer patients.
In order to investigate the antitumor effect by Dangguihwalhyultang after B-l6 cells were transplanted in C57BL/6 mice, and the immune responses in mice induced by methotrexate, the extract of Dangguihwalhyultang was orally administered to the ICR mice. Experimental studies were performed for measurance of metastasis, cell cytotoxicity in vitro, life extention, weight of cancer, natural killer cell activity. productivity of interleukin-2. The results were summarized as follows: 1. Mean survival time in Dangguihwalhyultang-treated group was prolonged, as compared with control group(14.63%) significantly(P<0.05). 2. Inhibition of metastasis in Dangguihwalhyultang-treated group was higher than control group with significance on 14th day(P<0.05). 3. On the weight of solid tumor. Dangguihwalhyultang-treated group was less than control group with significance(P<0.05). 4. On the MTT assay. Dangguihwalhyultang concentration inhibited cell viability was $368.8{\mu}g/well$. 5. Natural killer cell activity in Dangguihwalhyultang-treated group was significantly increased on 100:1, 50:1 E/T(effect cell/target cell) ratio(P<0.05). 6. Production of interleukin-2 in Dangguihwalhyultang-treated group was significantly increased(P<0.05).
한국산 담자균류인 갓버섯 Lepiota procera의 균사를 액내 배양하여 항암성분인 단백성 다당체를 분리하였다. 이 성분은 DEAE-Sephadex A-50 이온교환수지와 Sepharose-4B gel Filtration을 이용하여 정제하여 Fraction C1을 얻었으며 이 Fr, Cr은 단백질과 다당체로 구성되어 있으며 항암 효과는 10mg/kg/day 투여군에서 64%의 저지유을 나타내었다. 이러한 항암작용의 기전을 밝히기 위한 연구의 일환으로 면역에 미치는 영향을 실험함 결과 이 단백다당체는 용혈반형성 세포수를 증가시켰으며, 저하된 지연성 과민반응을 회복시켰을 뿐만 아니라, carrageenan 투여에 의해 억제된 면역능을 다시 증강시켰음을 알 수 있었다. 이러한 결과들은 이 버섯의 항암작용이 세포독성에 의한 것이 아니라 종양에 대한 면역능을 강화시켜 발휘됨을 제시하고 있다.
한국산 고등 균류의 항암성분을 연구하고자 강원도에서 채집한 붉은싸리버섯 Ramaria formosa $(Fr.)Qu\acute{e}l$. 로 부터 추출, 농축, 침전시킨후, 그 침전을 원심분리하고 Visking tube를 사용하여 정제한 결과 단백질-다당체를 얻었다. 이 물질의 항암 효과를 쥐에 이식된 sarcoma 180에 대하여 시험하였으며 50 mg/kg/day의 용량으로 10일간 투여한 결과 그 종양억제율은 66%였다. 8마리중 2마리에서는 완전한 종양 퇴화를 관찰하였다. 이 항암 성분을 화학적으로 분석하여 그 다당체의 대부분은 4종의 단당으로 구성되었고 단백질 부분은 14종의 아미노산으로 구성되어 있음을 밝혔다.
To investigate antitumor components of Korean higher fungi, the carpophores of Schizophyllum commune and Auricularia auricula-judae collected in Kyeong Buk Province were extracted with hot water or 0.1N-NaOH solution. The concentrated extracts were precipitated by addition of ethanol, and the precipitates were purified by dialyzing through visking tube and polysaccharide fractions were obtained. They were found to show antitumor activity against sarcoma 180 implanted in mice. Especially, the inhibition ratio of the extract of Auricularia adicula-judae was 90.8% in the doses of 100mg/kg/day for the period of ten days. The tumor in five of the eight mice was completely regressed. The components of these aqueous extracts were found to be polysaccharide and protein. The hydrolysis of the respective polysaccharide yielded four monosaccharides. After hydrolysis of the protein fraction, 15 amino acids were identified in the respective fraction of S. commune and A. auricula-judae.
The carpophores of Cryptoporus volvatus collected in Gyeong-gi Province of Korea were extracted with water and a protein-polysaccharide fraction was obtained after dialysis and lyophilization. The antitumor activity of this fraction was tested against sarcoma 180 implanted in A-strain mice. The tumor inhibition ratio was 80.4% in case of the high dose group (50mg/kg, ip, 10 days) and 70.3% in the low dose group (20mg/kg, ip, 10 days). The proteinpolysaccharide fraction was chemically analyzed and was found to be a complex of a protein which was 18.2% of the fraction when determined by Lowry-Folin method, and a polysaccharide which was 55.3% of ther fraction when determined by Anthrone method. Their subunits were identified as four monosaccharides and 18 amino acids by gas-liquid chromatography and amino acid autoanalysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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