Enterococcus faecium MJ-14, having strong antilisterial activity, was isolated from Korean fermented food, Meju. MJ-14 showed the same phenotypic characteristics, but different sugar utilization, as reference strain, E. faecium KCCM12118. It could utilize D-xylose, amygdaline, and gluconate, whereas E. faecium KCCM12118 could not. Optimal condition for bacteriocin production by E. faecium MJ-14 was at $37^{\circ}C$ and pH 7.0. Bacteriocin activity appeared in mid exponential phase and increased rapidly up to stationary phase. Activity was significantly promoted in MRS broth containing 3.0% glucose, 1.5% lactose, 2.0% peptone, or 1.5% tryptone. Bacteriocins effectively inhibited Enterococcus faecalis and Listeria spp. of Gram-positive bacteria, and Helicobacter pylori of Gram-negative bacteria, but did not inhibit yeasts and molds. They were stable against heat (for 30 min at $100^{\circ}C$), pH (3.0-9.0), long-term storage (for 60 days at 4 or $-20^{\circ}C$), and enzymatic digestion by catalase, proteinase K, papain, lysozyme, trypsin, chymotrypsin, and lipase, etc. Bacteriocin activity was completely inhibited by protease and pepsin, and 50% by ${\alpha}$-amylase. Studies on PCR detection of enterocin structural genes revealed bacteriocins are identical to enterocins A and B.
Klebsiella sp. L-10 was treated with physical and chemical mutagens, and one of the NTG mutant which increased hyaluronic acid complex yield 2.5 folds was selected. The yield of hyaluronic acid complex from Klebsiella sp. L-10 NTG 50 mutant reached maximum level I the YPD medium containing 0.1% yeast extract, 3% Bacto-tryptone, 3% dextrose, each 30mM of $K_2HPO_4$ and $KH_2PO_4$ (pH 6.0-6.5) with shaking culture at $37^{\circ}C$ for 24 hrs, and 2900mg of hyaluronic acid complex per litre of culture was produced under the above condition.
We investigated the effect of nutritional and environmental factors on Ophiocordyceps longissima mycelial growth. The longest colony diameter was observed on Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Sabouraud dextrose agar (SDA); however, malt-extract yeast-extract agar, SDA plus yeast extract, yeast-extract malt-extract peptone dextrose agar, SDA, oatmeal agar, and potato dextrose agar showed higher mycelia density. A temperature of $25^{\circ}C$ was optimum and 7.0 was the optimum pH for mycelial growth. Colony diameter was similar under light and dark conditions. Maltose and yeast extract showed the highest mycelial growth among carbon and nitrogen sources respectively. The effect of mineral salts was less obvious; however, $K_3PO_4$ showed slightly better growth than that of the other mineral salts tested. Among all nutrition sources tested, complex organic nitrogen sources such as yeast extract, peptone, and tryptone were best for mycelial growth of O. longissima. Ophiocordyceps longissima composite medium, formulated by adding maltose (2% w/v), yeast extract (1% w/v), and $K_3PO_4$ (0.05% w/v) resulted in slightly longer colony diameter. In vitro mycelial O. longissima growth was sustainable and the production of fruiting bodies could be used for commercial purposes in the future.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.21
no.6
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pp.681-685
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1992
Low molecular weight RNA(LMW RNA : 5S rRNA and tRNAs, <150 nucleotides) profiles of several bacteriocin production lactic acid bacteria from pig meats and reference lactic acid bacteria were generated on 10% denaturing polyacrylamide gel electrophoresis. Data evaluation including three molecular weight markers enabled the calculation of relative nucleotide units(RNU) for every band. Gels profiles and RNU evaluations were effective for identification of lactic acid bacteria species. LMW RNA profiles of lactic acid bacteria showed no variation in dependence on APT(All Purpose Tryptone Broth), TSB(Tryptic Soy Broth), MRS(Lactobacilli MRS Broth) different cultural medium.
$\alpha $-Arabinofuranosidase was produced by E. coli HB101 haboring the recombinant plasmid pKMG11 which contained the arfI gene of Bacillus stearothermophilus. The maximum production of the enzyme was observed when E. coli HB101 cells were grown at 37$\circ$C for 20 hours in the medium containing 0.5% arabinose, 1.0% tryptone, 0.5% yeast extract, and 1% NaCl. The $\ALPHA $-arabinofuranosidase produced was purified to homogeneity using a combination of 20-50% ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose CL-6B ion exchange column chromatography and Sepharose 6B-100 gel filtration. The purified enzyme was most active at 55$\circ$C and pH 6.5. The K$_{m}$ and V$_{max}$ values of the enzyme on $\rho $-nitrophenyl-$\alpha $-arabinofuranoside was determined to be 2.99 mM and 0.43 $\mu $mole/min (319.74 $\mu $mole/min/mg), respectively. The pI value was 4.5. The molecular weight of the native protein was estimated to be 289 kDa. The SDS-polyacrylamide gel clectrophoresis analysis suggested that the functional protein was a trimer of the 108 kDa identical subunits. The N-terminal amino acid sequence of the a-arabinofuranosidase was identified as X-Ser-Thr-Ala-Pro-Arg( \ulcorner )-Ala-Thr-Met-Val-Ile-Asp-X-Ala-Phe.
Among 294 Actinomycetes isolated from soil, a strain that had appeared to produce the highest level of chitinase selected for further studies. The selected strain was identified as a Streptomyces lydicus based on the data obtained from the morphological, biochemical and cultural experiments. The cultural conditions for the enzyme production were also examined, and the results obtained were as follows: the maximal enzyme production was attained when the cells were cultured at $30^{\circ}C$ for 6 days in the medium supplemented with 2% of colloidal chitin. The optimum initial pH of the medium was observed to be 8. It was also found that the most effective carbon and nitrogen sources were soluble starch and ammonium oxalate, respectively.
In the present study, an efficient mercury-tolerant bacterial strain (RS-5) was isolated from heavy-metalcontaminated industrial effluent. Under shake flask conditions, 97% of the supplemented mercuric chloride was sequestered by the biomass of RS-5 grown in a tryptone soy broth. The sequestered mercuric ions were transformed inside the bacterial cells, as an XRD analysis of the biomass confirmed the formation of mercurous chloride, which is only feasible following the reaction of the elemental mercury and the residual mercuric chloride present within the cells. Besides the sequestration and intracellular transformation, a significant fraction of the mercury (63%) was also volatilized. The 16S rRNA gene sequence of RS-5 revealed its phylogenetic relationship with the family Bacillaceae, and a 98% homology with Lysinibacillus fusiformis, a Gram-positive bacterium with swollen sporangia. This is the first observation of the sequestration and volatilization of mercuric ions by Lysinibacillus sp.
Thermal resistance and heat activation characteristics of Clostridium botulinum ATCC 25763 spores were evaluated. The effects of nisin and pH on the activation and subsequent germination were also investigated. Spores of C. botulinum were not inactivated by heat treatments up to $92^{\circ}C$ for 2 hr. Heat treatment at $85^{\circ}C$ for 90 min was selected as the optimal activation condition based on monitoring subsequent germination. L-alanine alone or in combination with L-cysteine was not sufficient to germinate the spores of this strain. Tryptone-Peptone- Glucose-Yeast extract (TPGY) broth supplemented with L-alanine was used as a suitable germination medium. Decreasing pH of activation suspension increased the degree of phase darkening, i.e., germination. In addition, the presence of nisin during activation increased the degree of phase darkening. The majority of spore populations were dormant at a pH of less than 2.8, and these populations required heat activation to increase the culturability on TPGY agar medium. However, extended heating in the presence of nisin at pH 2.8 decreased the spore count; however, heat activation was less necessary at pH 3.4, compared at pH 2.8.
A bacterium K-4-3, producing $\beta$-glucan hydrolyzing enzyme, was isolated from soil and identified to be Bacillus subtilis by its morpholohical and physiological characteristics. $\beta$-glucan was coloured using cibacron blue 3G-A and cross linded by the addition of 1, 4-butanedioldiglycidyl ether. This substrate was used for the isolation of $\beta$-glucanase producing microorganism. The $\beta$-glucan hydrolyzing enzyme actibity from isolated K-4-3 strain was also measured using the modified substrate. Bacillus subtilis K-4-3 produced the highest extracellular $\beta$-glucan hydrolyzing activity in the basal medium containing $\beta$-glucan as a carbon source, peptone and tryptone as a nitrogen source, and magnesium sulfate as an inorganic salt. The optimum temperature and initial pH for $\beta$-glucanase production by Bacillus subtilis K-4-3 were $37^{\circ}C$ and pH6. The highest enzyme activity was obtained at the culture age of 54 hrs with rotary shaking at $37^{\circ}C$. The crude enzyme showed the highest activity at pH 7.5-8.0 and $65^{\circ}C$.
Lactobacillus acidophilus A12 was isolated from chicken feces for use as an immunostimulating livestock probiotic. The purpose of this study was to optimize the production of L. acidophilus A12 using response surface methodology (RSM). Initially, the influence of growth medium was studied in terms of carbon sources (glucose, fructose, lactose, glycerol, sucrose, ethanol, and mannitol), nitrogen sources (beef extract, yeast extract, malt extract, and tryptone), and inorganic salts ($CaCl_2$, $MgSO_4$, $KH_2PO_4$, $(NH_4)_2SO_4$, $FeSO_4$, and NaCl). Through one factor-at-a time experiment, lactose, yeast extract, and $CaCl_2$ were determined to be the best sources of carbon, nitrogen, and inorganic salt, respectively. The optimum composition was found to be 17.7 g/L lactose, 18.6 g/L yeast extract, and 0.9 g/L $CaCl_2$. Under these conditions, a maximum cell density of 9.33 Log CFU/mL was produced, similar to the predicted value.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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