본 연구에서는 진생베리로부터 활성 성분인 ginsenoside Re와 Rb1의 함량과 항산화 활성이 높은 추출물을 얻기 위한 최적의 추출조건을 확인하였다. 70% 에탄올과 증류수를 추출 용매로 하여 교반, 초음파 및 마이크로파를 이용하여 추출한 후 ginsenoside Re와 Rb1 의 함량, 총 폴리페놀 함량, 항산화 활성 및 친환경적 제조 방법 여부를 고려한 결과 증류수 용매의 마이크로파 추출법이 가장 적합한 추출방법인 것을 확인하였다. 마이크로파 추출법의 최적 추출조건을 설정하기 위해 반응표면분석법(RSM)을 사용하여 마이크로파 출력량(50 ~ 200 W, X1), 용매와 진생베리의 비율(5 ~ 20 times, X2), 추출시간(30 ~ 120 s, X3)을 독립변수로 최적화 실험을 진행한 결과 도출된 회귀방정식의 결정계수는 0.9보다 높으며 p-value값은 0.05보다 작아 모델의 적합성이 확인되었다. Ginsenoside와 총 폴리페놀 함량을 위한 최적 추출조건은 마이크로파 출력량(200 W), 진생베리와 추출 용매 비율(20 times), 추출시간(90 s)로 확인되었다. 최적 추출조건에서 총 폴리페놀 함량이 6.23 mg GAE/g, ginsenoside Re 17.69 mg/g, Rb1 16.01 mg/g으로 예측되었고, 실제 실측검증에서 각각 6.33 mg GAE/g, 17.79 mg/g, 15.59 mg/g으로 예측된 값에 대하여 유사한 결과를 확인할 수 있었다.
0.5 mg of natural ginsenoside mixture and 0.8 $\mu$Ci of synthesized 14C-ginsenosides were administered orally to a rat and killed at one hour after the ginsenoside administration and the liver was fractionated into nuclear fraction, mitrochondria microsomes and cytosol fraction. Radioactivity distribu lion in subcellular fractions of the liver showed that 32o1c of total radioactivity absorbed in the liver was in cytosol fraction but a significant portion of the radioactivity was also found in mitochondria (26.6%) and microsomal fraction (18.l%). 5.8% of the total radioactivity was recovered from the nuclear fraction as well. This suggested that ginsenosides might be distributed into all subcellular fractions. Activities of mitochondrial aldehyde dehydrogenase, lactate dehydrogenase and malate dehydrogenase of the liver of rat at two hours after the ginsenoside administraion were found appreciably stimulated, suggesting that the ginsenoside concentration in the liver might be around 10-5%, since optimum concentrations for most enzyme catalyzed reactions in vitro were known to be 10-6% 10-4%. A significant portion of the radioactivity recovered from subcellular fractions of the liver was found in protein fractions, suggesting that proteins might interact with ginsenosides. Examination of protein-ginsenoside interation by gel filtration, equilibrium dialysis and amonium sulfate precipitation technique suggesting that proteins and ginsenosides do not bound covalently but weakl\ulcorner combined. When purified ginsenoside Rbl and Rgl were incubated with rat liver cytosolic enzymes for 20 min, the above ginsenosides were hydrolyzed quickly, suggesting that ginsenosides might be rapidly hydrolyzed and metabolized in the liver. It was also observed in vitro that the ginsenosides such as Rbl and Rgl were easily hydrolyzed by rat liver cytosol preparation suggesting that absorbed ginsenosides might be quickly hydrolyzed and metabolized in the liver.
한국산 6개 지역(금산, 강화, 풍기, 음성, 진안, 홍천) 수삼의 ginsenoside 함량을 비교 분석하여 평균 및 분산분석(일원배치법)을 통계 처리한 결과, 함량의 평균치가 4년근 수삼이 가장 높은 함유량을 나타내었고, 다음으로 5년근, 6년근 순 이었으나, 인삼사포닌에 대한 연근별 차이에 있어서 통계적 처리에 의한 유의적 차이는 없었다. 동북아시아의 또 다른 인삼 재배지인 중국 길림성과 일본의 나가노산 수삼과의 ginsenoside 함량에 있어서는 한국 금산산 수삼이 중국 길림성산 및 일본산에 비하여 높은 함유량을 나타내었다.
This study was carried out to investigate change of ginsenoside contents according to tissue ratio in ginseng root by age and diameter. The epidermis-cortex and xylem-pith extent, fresh weight, dry weight of ginseng increased with the root age increase. They increased higher in xylem-pith than in epidermis-cortex. The ratio of epidermis-cortex decreased and xylem-pith increased as the main root diameter increased. In case of same diameter, the xylem-pith ratio increased by the increase of root age. The epidermis-cortex ratio was 4 > 5 > 6 years, respectively. The total 10 ginsenosides of epidermis- cortex increased with the root age increase. However, the total ginsenoside of xylem-pith decreased and it was 2~5 times lower than epidermis-cortex. The most of ginsenoside contents existed in epidermis-cortex. The diameter decrease in main root is related to the increase of epidermis-cortex ratio. It leads to increase of ginsenoside contents. In order to select high level of ginsenoside cultivar, it suggested that it should be selected main root having narrow diameter and lower epidermis- cortex ratio.
To study on antioxidant effects in the liver of 40-week-old mouse, the sample were orally pretreated 5mg/kg/day for 5 days with red ginseng saponin components(total saponin, protopanaxadiol saponin, protopanaxatriol saponin, ginsenoside-Rd, ginsenoside-Re, compound-K) for 5 days. The ability of saponin to protect the mouse liver from oxidative damage was examined by determining the activity of superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GPx) and the contents of glutathione, the level of malondialdehyde, The only protopanaxadiol among the ginseng saponin fractions was significantly increased the hepatic SOD activity(p<0.01). The red ginseng saponin induced a slight increase of GPx activity, especially ginsenoside Rd, compound K and protopanaxatriol treatments significantly increased its activity. The content of glutathione was significantly increased by total saponin, protopanaxadiol and ginsenoside Rd(p<0.01), but the oxidized glutathione level was lowered in all the red ginseng saponin. Finally, the level of malondialdehyde was significantly decreased by ginsenoside Rd and protopanaxadiol. In conclusion, protopanaxadiol and ginsenoside Rd among the saponin fraction were especially increased in the activity of hepatic antioxidative enzyme and decreased the lipid peroxidation that was expressed in term of MDA formation. This comprehensive antioxidant effects of red ginseng saponin seems to be by a certain action of saponin other than a direct antioxidant action.
백삼 가공품과 홍삼 가공품의 사포닌 분포 내용과 함량을 비교하기 위하여 시판되고 있는 백삼 농축액(WGC)과 홍삼 농축액(RGC)을 각각 1종 선정하여 조 사포닌의 함량과 개별 ginsenoside의 함량분포를 조사하였다. Shibata의 방법과 우리나라 식품공전에 따라 측정한 조 사포닌의 양은 WGC가 각각 10.65와 21.77%이었으며 RGC는 5.80와 10.94%이였고, HPLC에 의한 총 사포닌의 양은 WGC가 7.40와 10.64%, RGC는 3.31와 3.13%로서 백삼 농축액의 사포닌 함량이 홍삼 농축액의 경우 보다 전반적으로 높았다. HPLC로 분석한 인삼 사포닌, ginsenoside $Rb_1,\;Rb_2,\;Rc,\;Rd,\;Re,\;Rf,\;Rg_1,\;20(S)\;Rg_3,\;20(R)Rg_3,\;20(S)\;Rh_1$ 그리고 $20(R)\;Rh_1$ 이었으며 대부분 홍삼농축액 보다는 백삼농축액의 함량이 높았으며, 특히 ginsenoside $Rb_1,\;Rg_1$ 그리고 $Rb_2$은 백삼 농축액에 3배 이상 더 함유되어 있었다. 또한 protopanaxadiol group과 protopanaxatriol group의 비율(PD/PT)에 있어서는 농축액간의 차이는 크지 않았다. 홍삼의 특유 사포닌으로 알려진 20(S)- 및 20(R)-ginsenoside $Rg_3$가 WGC와 RGC에 비슷하게 분포하는 것으로 확인되었다. 20(S)-ginsenoside $Rg_3$의 조 사포닌 조제법에 따라 RGC에서 0.48과 0.47% WGC에 0.40와 0.53%, 20(R)-ginsenoside $Rg_3$도 RGC에 0.10과 0.11%, WGC에 0.14와 0.22%이었다.
Streptozotocin으로 유발시킨 당뇨병성 쥐(혈당수준$430{\pm}30ml/dl$)에게 ginsenoside-$Rb_{2}$를 연속적으로 복강투여 하였다. Ginsenoside $Rb_{2}$ 투여군은 현저한 혈당감소를 보였으며 이군들의 혈당수준은 6-9일 투여로 약 160mg/dl로 떨어졌다. 한편 대조군보다 먹이섭취량이 적지만 체중은 ginsenoside-$Rb_{2}$를 투여한 당뇨쥐에서 상당히 증가하였다. Ginsenoside-$Rb_{2}$투여군은 과식, 다뇨, 당뇨 등과 같은 당뇨병 증상이 개선 되었다. 혈당을 떨어뜨리는 작용기전을 연구하기위한 일환으로 간 및 지방조직 그리고 혈청 등에 있는 탄수화물 대사물질과 지질성분 등에 미치는 ginsenoside-$Rb_{2}$의 효과를 조사하였다. 당뇨쥐에서는 ginsenoside-$Rb_{2}$가 먼저 정상쥐에서와 같이 간에서 혈당의 이용을 촉진 시키고 그결과 지방조직에 triglyceride 들이 증가되는 것으로 추측된다.
인삼(人蔘)의 근(根) 및 지상부(地上部) 사포닌을 얇은 막 크로마토그래피로 동정(同定)한 결과(結果) 인삼근(人蔘根)에 함유된 사포닌 중 $ginsenoside-Re,\;-Rg_1,\;-Rc,\;-Rf,\;-Rb_2$ 및 $-Rb_1$ 은 각각 엽(葉)과 경(莖)에서도 동정(同定)되었으며 이외에도 엽(葉)에서 10개과 경(莖)에서 9개의 unknown spot를 동정(同定)할 수 있었다. 또한 부위별(部位別) 총(總)사포닌을 50% 초산으로 온화한 조건에서 산(酸) 가수분해(加水分解)하여 생성(生成)된 prosapogenin의 조사결과(調査結果), panaxadiol계 사포닌 및 ginsenoside-Re의 산(酸) 가수분해물(加水分解物)인 $ginsenoside-Rg_3$ 및 $ginsenoside-Rg_2$가 각각 동정(同定)되었다. 한편 근(根), 엽(葉) 및 경(莖)의 총사포닌을 황산 가수분해(加水分解)하여 sapogenin 조사결과, 근(根)에서는 panaxadiol, panax atriol 및 oleanolic acid가 검출되었고, 엽(葉)과 경(莖)에서는 panaxatriol 및 panaxadiol만이 동정(同定)되었다.
Lee, Je Hyeong;Shehzad, Omer;Ko, Sung Kwon;Kim, Yeong Shik;Kim, Hyun Pyo
Journal of Ginseng Research
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제39권1호
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pp.54-60
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2015
Background: The present study was designed to prepare and find the optimum active preparation or fraction from Korea Red Ginseng inhibiting matrix metalloproteinase-13 (MMP-13) expression, because MMP-13 is a pivotal enzyme to degrade the collagen matrix of the joint cartilage. Methods: From total red ginseng ethanol extract, n-BuOH fraction (total ginsenoside-enriched fraction), ginsenoside diol-type-enriched fraction (GDF), and ginsenoside triol-type-enriched fraction (GTF) were prepared, and ginsenoside diol type-/F4-enriched fraction (GDF/F4) was obtained from Panax ginseng leaf extract. Results: The n-BuOH fraction, GDF, and GDF/F4 clearly inhibited MMP-13 expression compared to interleukin-$1{\beta}$-treated SW1353 cells (human chondrosarcoma), whereas the total extract and ginsenoside diol-type-enriched fraction did not. In particular, GDF/F4, the most effective inhibitor, blocked the activation of p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK), c-Jun-activated protein kinase (JNK), and signal transducer and activator of transcription-1/2 (STAT-1/2) among the signal transcription pathways involved. Further, GDF/F4 also inhibited the glycosaminoglycan release from interleukin-$1{\alpha}$-treated rabbit cartilage culture (30.6% inhibition at $30{\mu}g/mL$). Conclusion: Some preparations from Korean Red Ginseng and ginseng leaves, particularly GDF/F4, may possess the protective activity against cartilage degradation in joint disorders, and may have potential as new therapeutic agents.
Background: In this study, we screened and identified an endophyte JG09 having strong biocatalytic activity for ginsenosides from Platycodon grandiflorum, converted ginseng total saponins and ginsenoside monomers, determined the source of minor ginsenosides and the transformation pathways, and calculated the maximum production of minor ginsenosides for the conversion of ginsenoside Rb1 to assess the transformation activity of endophyte JG09. Methods: The transformation of ginseng total saponins and ginsenoside monomers Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rg1 into minor ginsenosides F2, C-K and Rh1 using endophyte JG09 isolated by an organizational separation method and Esculin-R2A agar assay, as well as the identification of transformed products via TLC and HPLC, were evaluated. Endophyte JG09 was identified through DNA sequencing and phylogenetic analysis. Results: A total of 32 ${\beta}$-glucosidase-producing endophytes were screened out among the isolated 69 endophytes from P. grandiflorum. An endophyte bacteria JG09 identified as Luteibacter sp. effectively converted protopanaxadiol-type ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Rd into minor ginsenosides F2 and C-K, and converted protopanaxatriol-type ginsenoside Rg1 into minor ginsenoside Rh1. The transformation pathways of major ginsenosides by endophyte JG09 were as follows: $Rb1{\rightarrow}Rd{\rightarrow}F2{\rightarrow}C-K$; $Rb2{\rightarrow}C-O{\rightarrow}C-Y{\rightarrow}C-K$; $Rc{\rightarrow}C-Mc1{\rightarrow}C-Mc{\rightarrow}C-K$; $Rg1{\rightarrow}Rh1$. The maximum production rate of ginsenosides F2 and C-K reached 94.53% and 66.34%, respectively. Conclusion: This is the first report about conversion of major ginsenosides into minor ginsenosides by fermentation with P. grandiflorum endophytes. The results of the study indicate endophyte JG09 would be a potential microbial source for obtaining minor ginsenosides.
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