• 대한본초학회지
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• 제36권3호
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• pp.1-8
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• 2021

Objective : Reflux esophagitis (RE), one of gastroesophageal reflux disease (GERD), is a disease that causes inflammation due to reflux of stomach contents such as stomach acid and pepsin due to the unstable gastroesophageal sphincter, and is currently increasing worldwide. The currently used treatment for reflux esophagitis has various side effects. Therefore, in this study the effect of Toosendan Fructus extract on chronic acid reflux esophagitis in rats was evaluated in order to find a new treatment material for reflux treatment. Methods : After inducing reflux esophagitis through surgery, the group was separated and the drug was administered for 2 weeks; Normal rats (Normal, n=8), chronic acid reflux esophagitis rats (Control, n=8), Toosendan Fructus 200 mg/kg body weight/day-treated chronic acid reflux esophagitis rats (TF, n=8). After, we were taken esophageal tissue and esophageal mucosa damage was identified, and analyzed the expression of NADPH oxidase, AP-1/MAPK-related proteins, and tight junction proteins by western blot in esophageal tissue. Results : Toosendan Fructus administration significantly protected the esophageal mucosal damage of reflux esophagitis. Also, Toosendan Fructus significantly reduced the expression of NADPH oxidases (NOX2 and p22^phox) and AP-1/MAPK-related proteins (c-Fos, c-Jun, p-p38, p-ERK, and p-JNK). In addition, it significantly increased the expression of tight junction proteins (Occludin, Claudin-3, and Claudin-4). Conclusions : These results suggest that Toosendan Fructus reduced damage to the esophageal mucosa by protecting the esophageal mucosa by upregulating tight junctions proteins as well as inhibiting the AP-1/MAPK pathway through reducing NADPH oxidases expression.

• 한국식품과학회지
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• 제53권2호
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• pp.165-173
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• 2021

본 연구에서는 UPM에 의해 유발되는 NCI-H441 세포 내 ROS 생성과 그에 따른 tight junction 단백질(N-cadherin, fibronectin, occluding, ZO-1, 및 claudin-4 등)의 발현 억제를 확인하였고 ECL의 전처리로 인하여 해당 ROS 생성 및 tight junction 단백질 발현 억제 현상이 완화되는 보호효과를 확인하였다. 그 결과, 폐 세포에서 UPM에 의해 유발된 산화 스트레스 및 tight junction 단백질의 발현 감소가 ECL을 선 처리함으로써 억제되어 결과적으로 산화 스트레스와 같은 미세먼지에 의한 폐 손상으로부터 보호 효과를 나타내고 tight junction 수준의 유지를 확인하였다. 이러한 결과를 통해 ECL 추출물은 폐와 기관지의 보호효과를 나타내며 폐 관련 질병의 예방효과가 있는 기능성 천연 물질로써 활용이 가능할 것으로 기대된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제29권5호
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• pp.731-738
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• 2016

Glucagon-like peptide-2 (GLP-2) is important for intestinal barrier function and regulation of tight junction (TJ) proteins, but the intracellular mechanisms of action remain undefined. The purpose of this research was to determine the protective effect of GLP-2 mediated TJ and transepithelial electrical resistance (TER) in lipopolysaccharide (LPS) stressed IPEC-J2 cells and to test the hypothesis that GLP-2 regulate TJ and TER through the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-protein kinase B (Akt)-mammalian target of rapamycin (mTOR) signaling pathway in IPEC-J2 cells. Wortmannin and LY294002 are specific inhibitors of PI3K. The results showed that $100{\mu}g/mL$ LPS stress decreased TER and TJ proteins occludin, claudin-1 and zonula occludens protein 1 (ZO-1) mRNA, proteins expressions (p<0.01) respectively. GLP-2 (100 nmol/L) promote TER and TJ proteins occludin, claudin-1, and zo-1 mRNA, proteins expressions in LPS stressed and normal IPEC-J2 cells (p<0.01) respectively. In normal cells, both wortmannin and LY294002, PI3K inhibitors, prevented the mRNA and protein expressions of Akt and mTOR increase induced by GLP-2 (p<0.01) following with the significant decreasing of occludin, claudin-1, ZO-1 mRNA and proteins expressions and TER (p<0.01). In conclusion, these results indicated that GLP-2 can promote TJ's expression and TER in LPS stressed and normal IPEC-J2 cells and GLP-2 could regulate TJ and TER through the PI3K/Akt/mTOR pathway.

• 대한화장품학회지
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• 제48권2호
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• pp.181-188
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• 2022

피부는 과도한 수분 손실과 화학물질, 미생물과 같은 해로운 물질의 침입으로부터 신체를 보호한다. 특히 표피의 각질층은 매우 중요한 물리적 장벽으로 인식되고 있다. 그러나 최근 몇 년 동안 치밀이음(tight junctions, TJ)이 피부의 장벽 기능에 중요한 역할을 할 수 있다는 증거가 보고되고 있다. 본 논문에서는 치밀이음을 구성하는 단백질의 종류, 치밀이음의 피부투과장벽으로서의 기능과 피부질환, permeation enhancer로서의 역할에 대해 살펴보고자 한다.

• 대한의생명과학회지
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• 제24권3호
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• pp.275-279
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• 2018

Inflammatory bowel disease (IBD) is increasing in prevalence in developed countries but the cause of this increase is unclear. In animal models of IBD and in human IBD patients, alterations in the tight junctional proteins have been observed, suggesting that the intestinal microflora may penetrate the underlying colonic tissue and promote inflammation. Enterotoxigenic Bacteroides fragilis (ETBF) causes inflammatory diarrhea in human and is implicated in inflammatory bowel diseases. However, it is unclear whether alterations in tight junctional proteins occur during ETBF infection in mice. In this brief communication, we report that ETBF infection induces up-regulation of claudin-2 and down-regulation of claudin-5 through B. fragilis toxin (BFT) activity in the large intestine of C57BL/6 mice. In contrast, BFT did not induce changes in tight junctional proteins in the HT29/C1 cell line, suggesting that analysis of biological activity of BFT in vivo is important for evaluating ETBF effects.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제27권5호
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• pp.733-742
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• 2014

The glucagon-like peptide 2 (GLP-2) that is expressed in intestine epithelial cells of mammals, is important for intestinal barrier function and regulation of tight junction (TJ) proteins. However, there is little known about the intracellular mechanisms of GLP-2 in the regulation of TJ proteins in piglets' intestinal epithelial cells. The purpose of this study is to test the hypothesis that GLP-2 regulates the expressions of TJ proteins in the mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathway in piglets' intestinal epithelial cells. The jejunal tissues were cultured in a Dulbecco's modified Eagle's medium/high glucose medium containing supplemental 0 to 100 nmol/L GLP-2. At 72 h after the treatment with the appropriate concentrations of GLP-2, the mRNA and protein expressions of zonula occludens-1 (ZO-1), occludin and claudin-1 were increased (p<0.05). U0126, an MAPK kinase inhibitor, prevented the mRNA and protein expressions of ZO-1, occludin, claudin-1 increase induced by GLP-2 (p<0.05). In conclusion, these results indicated that GLP-2 could improve the expression of TJ proteins in weaned pigs' jejunal epithelium, and the underlying mechanism may due to the MAPK signaling pathway.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제54권3호
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• pp.321-333
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• 2021

본 연구에서는 진피-황금 혼합물 (CS)이 급성 역류성 식도염에 미치는 식도 점막 보호 효과를 평가하기 위하여 CS를 경구투여한 후 수술을 통해 역류성 식도염을 유발하였으며, 실험 종료 후 혈액 채취 및 식도 조직을 적출하였다. 동물에게서 적출한 식도 점막의 손상 정도를 육안으로 확인한 결과 CS투여군에서 식도 점막의 손상이 유의하게 감소하였으며, H&E staining을 통해 관찰한 결과 마찬가지로 CS투여군에서 식도 상피의 탈락 및 염증세포의 침윤이 현저하게 감소한 것을 확인하였다. 혈액을 이용하여 역류성 식도염의 원인으로 유효하다고 알려진 ROS의 수치를 확인한 결과, CS투여군에서 ROS 수치가 유의적으로 감소하였으며, western blotting을 통해 NADPH oxidase인 NOX4, p47^phox, p22^phox의 발현을 확인한 결과, 마찬가지로 CS 투여군에서 유의하게 감소하였고, 특히 CS200투여군에서 Normal군과 비슷한 수치를 나타냈다. 또한, CS투여는 염증성 단백질인 MAPK와 NF-κB 경로를 유의적으로 억제하였을 뿐 아니라 tight junction 단백질인 claudin-1과 claudin-4의 발현을 유의하게 조절한 것을 확인하였다. 이상의 결과를 종합해보면 진피-황금 추출물은 산화적 스트레스를 억제함으로써 염증성 단백질의 발현을 조절할 뿐 아니라 tight junction 단백질의 발현을 조절하여 식도 점막을 보호하는 것으로 판단되나 역류성 식도염은 음식물의 섭취와 밀접한 관련이 있는 만큼 추후 동물의 식이 섭취량을 조사하는 등 세부적인 추가 연구가 필요할 것으로 보인다.

• 대한화장품학회지
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• 제42권4호
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• pp.403-412
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• 2016

밀착연접(tight junction, TJ)은 인접하는 표피 세포 사이를 서로 연결 및 접합하여 전해질과 수분의 이동을 조절할 뿐만 아니라 세포 내 신호를 전달하고 세포분열을 조절하는 등 다양한 기능을 갖고 있는 것으로 알려졌다. 또한 최근 연구에 따르면 TJ 관련 단백질들의 비정상적 발현은 암 발생 및 진행과 밀접한 관련이 있는 것으로 보고되었으며, TJ 구성 단백질의 발현 조절은 피부 장벽 강화 및 보습 조절과 연관된 것으로 알려졌다. 본 연구에서는 세포 장벽 조절을 통해 피부 보습 조절에 관여하는 새로운 화장품 소재를 발굴하기 위해 여러가지 소재들에 대한 스크리닝을 수행하였다. 이 중 인공 감미료 소재로 널리 사용되는 스테비올 및 당 유도체(스테비오사이드)의 미백 및 주름 개선 등의 효능에 대한 기존 보고에 따라, 이들에 의한 TJ 조절 메커니즘을 확인하기 위해 다양한 세포 활성 기능 시험을 수행하였다. MTS (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt)를 이용한 실험을 통하여 스테비올은 human keratinocyte cell line인 HaCaT 세포에 $250{\mu}M$ 까지 독성을 나타내지 않음을 확인하였다. Quantitative real-time PCR을 이용한 TJ 관련 단백질들의 mRNA 발현 변화를 통하여 스테비올에 의한 TJ 조절 기능을 확인하였다. 그 결과, 스테비올은 TJ 관련 단백질 중 특이적으로 claudin 8을 대조군 대비 30% 수준까지 감소시키는 것을 관찰하였다. 또한, 세포이동에 의한 영향을 관찰한 결과 스테비올 처리에 의해 세포이동이 현저히 저해되는 것을 확인하였다. 마지막으로 세포 장벽의 투과성 변화를 관찰하기 위해 표피세포 피부저항(transepithelial electric resistance, TEER) 분석 결과 스테비올에 의한 세포투과성(cell permeability) 또한 증가되는 것을 관찰하였다. 이에 반해, 스테비올 유도체(스테비오사이드, 리바우디오사이드)에서는 $1000{\mu}M$까지 세포 독성이 거의 나타나지 않을 뿐만 아니라 claudin 8 발현 억제 및 세포이동 저해현상도 관찰되지 않았다. 스테비올은 HaCaT 세포의 세포 독성, claudin 8 발현 억제, 그리고 세포 이동의 저해효과를 보이는 반면 스테비올 당 유도체인 스테비오사이드, 리바우디오사이드는 세포 독성 및 세포이동에 영향이 없는 것으로 나타난 본 연구 결과들은 스테비올 당 유도체가 향후 화장품 원료로써 스테비올보다 적합한 소재임을 시사한다.

• 한국동물생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.190-196
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• 2019

Tight junctions are constituents of the blood-epididymis barrier that play roles in regulating the unidirectional transcellular transport of ions, water, and solutes to maintain optimal conditions for sperm maturation and storage. Claudin 1 (Cldn1) and 4 (Cldn4) are known as tight junction proteins and are expressed in the basolateral membranes as well as tight junctions in the epididymis of rodents. Here, we examined the expression and localization of Cldn1 and 4 to determine the function of these proteins in the pig epididymis. Cldn1 was highly expressed in the basolateral membrane of epithelial cells in the caput and corpus regions of the epididymis. In the cauda region, however, Cldn1 labeling was significantly decreased in the basolateral membrane of epithelial cells. In contrast, labeling indicated that Cldn4 was expressed in the basolateral membrane in the cauda region of the epididymis and was present at punctate reactive sites in the caput and corpus regions. However, in no region of the epididymis did we detect colocalization of Cldn1 and 4 with labeled ZO-1, the distribution of which is restricted to the tight junctions. Our results indicate that Cldn1 and 4 were region-specifically expressed in the pig epididymis but not present in the tight junctions of epididymal epithelium. In addition, reciprocal regulation in specific regions of the epididymis between Cldn1 and 4 may play an important role in generating an optimal luminal environment for sperm maturation and storage in the pig epididymis.

• 생명과학회지
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• 제17권9호통권89호
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• pp.1298-1302
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• 2007

${\beta}-lapachone$은 남미지역에서 자생하는 Tabebuia avellanedae라는 나무의 수피에서 동정된 quinone계 물질로서 다양한 인체암세포에서 항암효과가 있는 것으로 알려져있다. 본 연구에서는 ${\beta}-lapachone$의 암 전이 억제에 대한 연구의 일환으로 HepG2 및 Hep3B 인체 간암 세포의 전이관련 유전자의 발현에 미치는 ${\beta}-lapachone$의 영향을 조사하였다. MTT assay 및 세포형태변화 관찰 결과에서 ${\beta}-lapachone$ 처리에 따라 HepG2와 Hep3B 세포들은 ${\beta}-lapachone$ 농도 의존적으로 세포의 증식이 억제되었으며 그 형태적 변형도 동반하였다. ${\beta}-lapachone$처리에 의한 암 전이 지표가 되는 IGF-lR, Tjs (ZO-1, claudin-3,-4) 및 Tj 조절인자(${\beta}-catenin$)의 발현을 RT-PCR과 Western blot analysis를 통하여 확인한 결과 ${\beta}-lapachone$ 처리가 IGF-1R의 발현 억제와 Tj 유전자 발현의 증가를 유도함으로써 ${\beta}-lapachone$이 Tj를 강화하여 암세포의 전이 억제작용을 하는 것으로 관찰 되었다. 이상의 결과는 인체 간암세포에서 ${\beta}-lapachone$의 항전이 작용의 이해에 중요한 기초 자료가 될 것으로 생각한다.