홍삼및 백삼에서 용매추출법(溶媒抽出法)에 의해 fr. 1과 fr. 2를 분리하여 양자의 차이점(差異點)을 몇가지 관점에서 조사하고 홍삼에서 강하게 나타나는 항산화(抗酸化) 활성물질(活性物質)을 단리(單離)하여 실험한 결과는 다음과 같다. 1. fr. 1과 fr. 2에서의 항산화(抗酸化) 활성(活性)은 공히 홍삼(紅蔘) 분획(分劃)이 백삼(白蔘) 분획(分劃)보다 강했다. 2. 홍삼의 fr. 2에 비해 fr. 1이 비활성(比活性)이 훨씬 강했다. 3. 홍삼의 fr. 1에서 단리(單離)한 Spot a는 강력한 항산화 활성을 가졌으로 indophenol용액을 탈색(脫色)시켰다. 4. 홍삼의 fr. 2에서 단리(單離)한 Spot b도 항산화활성물질(抗酸化活性物質)로서 남색의 indophenol용액을 홍색으로 변색시켰다. 5. 인삼제품으로부터 fr. 1과 fr. 2를 분리하여 TLC 또는 HPLC에 의해 그 패턴을 조사하며 원료삼(原料蔘)이 홍삼인지 백삼인지 식별(識別)할 수 있는 지표(指標)로 활용할 수 있을 것이다.
Microorganism producing extracellular CFTase was isolated from soil and designated as Bacillus polymyxa MGL21. The gene encoding the CFTase (cft) from B. polymyxa MGL21 was cloned and sequenced. The ORF of the cf gene was composed of 3,999 nucleotides, encoding a protein (1,333 amino acids) with a predicted molecular mass of 149,375 Da. Sequence analysis indicated that CFTase was divided into five distinct regions. CFTase contained three regions of repeat sequences at the N-terminus and C-terminus. The endo-inulinase region of homology (ERH) of CFTase was similar to that of Pseudomonas mucidolens endo-inulinase ($50\%$ identity, 259 amino acids). Furthermore, CFTase possessed a highly conserved core region, which is considered to be functional for the hydrolysis reaction of inulin. The cft gene was expressed in a His-tagged form in Escherichia coli cells, and the His-tagged CFTase was purified to homogeneity. The optimal temperature and pH for CFTase activity were found to be $50^{\circ}C$ and 9.0, respectively. The enzyme activity was completely inhibited by 10 mM $Ag^+\;and\;Cu^2+$. Thin-layer chromatography analyses indicated that CFTase catalyzed not only the cyclization reaction ut also disproportionation and hydrolysis reactions as well.
Fructans are polyfructose molecules that function as nonstructural storage carbohydrates in several plants. In addition, it has been suggested that, due to their solubility, they can play an important role in helping plants survive periods of osmotic stress. In order to study the effect of levan synthesis on plant growth, the coding region of the levansucrase gene, which was isolated from Zymomonas mobilis, was introduced into tobacco plants using Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. The presence of the levansucrase gene in transgenic plants was verified by genomic DNA gel blot analysis. RNA gel blot and immunoblot analyses showed an accumulation of the corresponding transcript and protein product of the bacterial levansucrase gene in transgenic plants. Furthermore, a thin layer chromatography analysis revealed that fructans were synthesized and deposited in transgenic tobacco plants. When $T_1$ seeds were germinated and grown under polyethylene glycol-mediated drought stress or cold stress, the transgenic seedlings displayed a substantially higher level of growth than that of untransformed plants. These results suggest that fructans may playa significant role in the tolerance of plants under osmotic stress.
Metabolism of DWP401, recombinant juman epidermal growth factor, was examined in vivo and in vitro in rats. When $^{125}I$-labeled DWP401 was administered at a dose of 50 ${\mu}g$/kg by i.v. injection. $^{125}I$-labeled DWP401 was rapidly degraded within 30 minytes above 93%. Thin layer chromatography analysis of urine collected for 24 hr after i.v. administration of $^{125}I$-labeled DWP401 showed ohly one spot on a X-ray film which was considered as diiodo-tyrosine. This result suggests tha $^{125}I$-labeled DWP401 was completely digested into free amino acids without any specific intermediate polypeptides. About 42.1% of the administered iodine was recovered in 24 hr. For in vitro degradation study, $^{125}I$-labeled DWP401 was added to plama and tissue homogenates of rats and incubated at $37^{\circ}C$. Almost 98% of the added radioactivity recovered from the protein fraction of the liver, kidey, small intestine, stomach and spleen decreased rapidly. For examplem the recovery rates of $^{125}I$-labeled DWP401 were 58.6, 63.2, 39.9, 52.9 and 66.8% after 4hrs of incubation in respective organ homogenates.
The most economically important species used in a wide range of fermentation industries throughout Asia belong to Aspergillus section Flavi, which are morphologically and phylogenetically indistinguishable, with a few being toxigenic and therefore a major concern. They are frequently isolated from Korean fermentation starters, such as nuruk and meju. The growing popularity of traditional Korean alcoholic beverages has led to a demand for their quality enhancement, therefore requiring selection of efficient non-toxigenic strains to assist effective fermentation. This study was performed to classify the most efficient strains of Aspergillus section Flavi isolated from various types of traditional wheat nuruk, based on a polyphasic approach involving molecular and biochemical evaluation. A total of 69 strains were isolated based on colony morphology and identified as Aspergillus oryzae/flavus based on internal transcribed spacer and calmodulin gene sequencing. Interestingly, none were toxigenic based on PCR amplification of intergenic regions of the aflatoxin cluster genes norB-cypA and the absence of aflatoxin in the culture supernatants by thin-layer chromatography analysis. Saccharification capability of the isolates, assessed through ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase activities, revealed that two isolates, TNA24 and TNA15, showed the highest levels of activity. Although the degrees of variation in ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase activities among the isolates were higher, there were only slight differences in acid protease activity among the isolates with two, TNA28 and TNA36, showing the highest activities. Furthermore, statistical analyses showed that ${\alpha}-amylase$ activity was positively correlated with glucoamylase activity (p < 0.001), and therefore screening for either was sufficient to predict the saccharifying capacity of the Aspergillus strain.
Objectives : Mori Ramulus is a young branch of Morus alba Linne, which has been used as traditional medicines for antidiarrhea, antibacteria, and antihypertension in Korea. With the basis on these medicinal activities, it is registered at the Korean Herbal Pharmacopoeia. The standard for quality control in use, however, is not yet validated.Methods : We experiment on heavy metals test, TLC, loss on drying, ash, acid-insoluble ash, contents of ethanolsoluble extracts and contents of oxyresveratrol by using the 15 samples of Mori Ramulus which are collected domestically. We tested items according to the General Test, processes and apparatus, Crude Drugs Test of KP(2011).Results : Purity test(Heavy metals) showed contents for Pb, As, Hg, and Cd range of 0.1~1.1 ppm, 0.0~0.2 ppm, 0.00~0.01 ppm, and 0.00~0.02 ppm. Identification test(Thin layer chromatography) was on comparing with morucine standard solution in Rf value, all samples showed morucine spot (dark blue, Rf : 0.3) as same as Rf value of morucine-standard solution. Loss on drying was ranged from 5.1 to 8.9 %, ash and acid-insoluble ash were between the range 3.0~6.3% and 0.3~0.8%. Contents of ethanol-soluble extracts was ranged from 6.2 to 12.0%. Content of oxyresveratrol was ranged from 0.01 to 0.16 % based on the oxyresveratrol standard curve.Conclusions : We sincerely hope that this study will be contributed to the standardization and quality control of Korean herbal medicines.
The aim of the present study was to investigate effects of food preservative addition and changes in composition of herb extract product on the growth of spoilage yeast, Zygosaccharomyces sp. Herbs such as Panax ginseng, Cinnamomum cassia, Lycium chinense, Zyzyphus juiuba and Jingiber officinale were altogether put into water and essence was extracted at 80oC, and then the extract was concentrated at 75oC. The herb extract product was made by adding vitamins, amino acids and honey to the concentrated herb extract. The amount of gas produced from the herb extract product was increased as inoculated cell number increased but decreased as Brix concentration increased. Gases were produced in small amount when incubation was made at 4oC but large amounts of gases were produced at 25 or 40oC of incubation. The gas production and growth of Zygosaccharomyces sp. were measured after browning reaction was induced by heating at 85oC for 12 hours. It appeared that heating treatment did not induce any significant change in the gas production and growth of the cell. The effects of addition of various sugar to the herb extract produce were also invesigated. Amounts of gas production were in the order of glucose>sucrose>oligosaccharide>stevioside. The viable cell count was measured as 6.0$\times$107 CFU/g when glucose was added to the herb extract product. The viable cell counts were 5.0$\times$106, 3.0$\times$103, and 3.0$\times$102 CFU/g in sucrose, oligosaccharide and stevioside added herb extract product, respectively. The amount of gas production from the herb extract product was remarkably reduced by addition of such food preservatives as sodium benzoate and DF 100. TLC(thin layer chromatography) chromatogram of the herb extract showed stability of the herb extract in the above treatments.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제33권6호
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pp.583-590
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2007
Anticancer effect of methanol extract of Caesalpinia sappan L. on oral carcinoma(KB) and osteosarcoma(HOS) cells were investigated in this study. In order to elucidate the anticancer mechanism of Caesalpinia sappan L, we analyzed telomerase inhibitory effect of the methanol extract of Caesalpinia sappan L. In addition, we prepared 5 fraction samples according to its polarity differences and analyzed anticancer effects on oral carcinoma and osteosarcoma cells. Following results are obtained in this study. 1. 50% cell proliferation inhibitory value($IC_{50}$) of the methanol extract of Caesalpinia sappan L. against oral carcinoma(KB) cells and osteosarco ma(HOS) cells were $9.0{\mu}g/ml\;and\;10.9{\mu}g/ml$, respectively. 2. The methanol extract of Caesalpinia sappan L. showed inhibitory effect of telomerase which is required for cancer cell immortality. Therefore, it seems that the anticancer effect of methanol extract of Caesalpinia sappan is at least partially due to telomerase inhibitory effect. 3. Five fraction samples were prepared according to its polarity and 88.7% of ingredient of total methanol extract was transferred to ethylacetate fraction. Thin layer chromatography analysis showed that dichloromethane fraction contained ingredient with relatively high polarity and ethylacetate fraction contained similar ingredient found in total methanol extract. 4. Anticancer effect was observed in n-hexane, dichloromethane, and ethylacetate fractions. The highest anticancer effect was found in dichloromethane fraction which had $IC_{50}$ value of $4.4{\mu}g/ml$ and > $4.0{\mu}g/ml$ against oral carcinoma(KB) cells and osteosarcoma(HOS) cells, respectively.
가열우지중 콜레스테롤 산화안정성을 연구하기 위하여 130, 150 및 18$0^{\circ}C$ 가열온도에서 일정시간 가열하였을 때 생성되는 각종 콜레스테롤 산화생성물을 TLC에 의하여 분리.확인하고, 지방산 조성의 변화를 측정하였다. 지방산 조성은 가열시간이 경과함에 따라 linoleic과 linolenic acid등의 불포화 지방산은 약간씩 감소한 반면 포화지방산의 함량은 다소 증가하는 경향이었고, 이러한 변화는 가열온도가 높을수록 심하였다. 추출한 비비누화물의 반점과 Rf값은 콜레스테롤 산화물의 표준품들과 일치함을 확인 할 수 있었다. 또한 TLC상으로 확인된 콜레스테롤 산화물은 7-$\alpha$-hydroxycholesterol, 7-$\beta$-hydroxycholesterol, 7-ketocholesterol 및 cholesterol epoxide의 4가지였으며, 이들 4가지 콜레스테롤 산화물은 가열 온도와 가열시간에 따라 생성되는 종류와 그 생성량이 상이함을 알 수 있었다.
Constitutive cyclooxygenase (COX-I) is present in cells under physiological conditions, whereas inducible cyclooxygenase (COX-II) is induced by some cytokines, mitogens, and endotoxin presumably in pathological conditions such as inflammation. We have evaluated the inhibitory effects of solvent fractionated extracts of natural products on the activities of COX-I and COX-II. Oxygen uptake COX assay was performed, as a primary screening from the tissue extracts of bovine seminal vesicles (BSV), by monitoring the initial rate of oxygen uptake using an oxygen electrode. Additionally, we evaluated plant extracts for the inhibitory effects of COX-I (in HEL cells) and COX-II (in lipopolysaccharide activated J774A.1 macrophages) using thin layer chromatography of prostanoids produced from $^{14}C-labelled$ arachidonic acid (AA). The use of such models of COX-I and COX-II assay will lead to the identification of specific inhibitors of cyclooxygenases with presumably less side effects than present therapies. Inhibitory effects of 50 kinds of plant extracts on the COX-I and COX-II activities were determined and the active fractions were found in the ethyl acetate fractions of Dryopteris crassirhizoma (roots), Amomum cardamomum (roots), Triticum aestivum (seeds), Perilla sikokiana (leaves), Anemarrhena asphodeloides (roots). Especially, the ethyl acetate fraction of Dryopteris crassirhizoma (roots), which exhibited the strong inhibition against BSV COX $(IC_{50},\;65.4\;{\mu}g/ml)$, COX-I $(IC_{50},\;8.5\;{\mu}g/ml)$, and COX-II $(IC_{50},\;17.2\;{\mu}g/ml)$, is under investigation to isolate active principles using activity-guided fractionation method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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