The action of theobromine on the sodium plus potassium activated ATPase activity In the rabbit red cell membrane has teen investigated and the experiments were also designed to determine the mechanism of action of theobromine on the ATPase activity. The following results were observed. 1. The activity of the NaK ATPase from red fell membrane is stimulated by theobromine, and the concentration of theobromine for maximal activity is about 3mM. 2. The activating effect of theobromine on the ATPase, with a given concentration of potassium in the medium, is increased by raising the sodium concentration but activity ratio is decreased. 3. The activating effect of theobromine on the ATPase, with a given concentration of sodium in the medium. is increased by the raising the potassium concentration but activity ratio is decreased. 4. The NaK ATPase activity is increased by small amounts of calcium but decreased by larger amounts. The activity of the enzyme by theobromine is increased by small amounts of calcium but decreased by larger amounts. 5. The activating effect of theobromine on the ATPase was not related to the hydroxyl group of threonine and imidazole group of histicline. 6. The activating effect of theobromine on the ATPase is due to sulfhydryl group, amino group and carboxyl group of the enzyme of NaK ATPase.
Caffeine으로부터 theobromine을 생산하기 위하여 토양으로부터 theobromine 생산능력이 있는 5종의 균주를 선별하였다. 그들 중 CT-017 균주가 theobromine 생산능력이 가장 우수하였으며 Pseudomonas sp.로 부분동정되었다. Theobromine 생산에 있어서, 탄소원과 질소원으로는 5 g/l fructose와 5 g/l beef extracts가 가장 우수하였으며, 0.02 g/l $Fe^{2+}$, threonine 1.0 g/l을 사용하였을 때 가장 효과적이었다. 최적배양온도 및 초기 pH는 각각 $28^{\circ}C$ 및 6.5이었다. 상기의 최적조건하에서, 23시간 배양하였을 때, 15 g/l caffeine으로부터 7.98 g/l의 theobromine이 생산되었으며 이때의 전환율은 53.2% 이었다.
본 연구는 다류 중 천연으로 카페인을 함유하고 있는 식물성 원료를 중심으로 천연유래 카페인, 테오브로민, 테오필린 함유량을 조사하였다. 물을 이용하여 환류냉각 방식으로 추출하였으며, 추출액은 SPE (C18 카트리지)를 이용하여 정제하는 전처리 방법을 확립하였다. 분석방법의 유효성 검증을 위하여 직선성, 검출한계, 정량한계, 회수율 등을 측정하여 HPLC를 이용한 동시 분석법의 유효성을 확인하였다. 확립된 방법으로 다류 중 천연유래 카페인 함량을 측정하기 위하여 228건의 시료를 수거하여 분석한 결과 카페인은 5.4-58.2 mg/g의 범위로 검출되었으며, 테오브로민은 ND-11.2 mg/g의 범위로 검출되었고 테오필린은 ND-0.7 mg/g의 범위로 검출되었다. 본 연구결과를 통하여 다류 중 천연유래 카페인, 테오브로민과 테오필린 함유량을 확인 할 수 있었으며 그 결과를 바탕으로 식품 중 카페인의 천연유래 여부 판단 시 근거자료로 활용될 수 있는 것으로 사료된다.
본 연구는 국내에서 시판되고 있는 녹차, 현미녹차, 홍차 2종류, 오룡차 1종류 및 자스민 차 1종류의 티백 제품을 $80\%$ 에탄올과 물로 추출하여 7종의 catechins, 4종의 theaflavins 및 2종의 methylxanthins의 함량을 HPLC로 동시에 분석하였으며 그 결과는 다음과 같다. 1. 총 catechins의 함량은 에탄올과 물 추출 모두 자스민 차가 가장 높았으며 다음으로 에탄을 추출은 녹차, 홍차(II), 오룡 차, 현미 녹차, 홍차(I)의 순이었으며 물 추출은 홍차(II), 녹차, 현미 녹차, 오룡 차, 홍차(I)의 순이었다. 또한 두 추출법에서, 녹차, 현미녹차, 오룡차, 홍차(II)의 경우는 총catechi 중 EGCG가 차지하는 함량이 가장 높았으며 홍차(I)과 자스민 차는 ECG의 함량이 가장 높았다. 2. Theaflavin류는 TF, TF3G, TF3'G, TF33'G의 4종류가 홍차에만 분석되어 에탄을 추출은 홍차(I)과 홍차(II) 모두 TF33'G가 가장 높았으며 물 추출은 홍차(I)은 TF33'G가 홍차(II)는 TF가 가장 높았다. 3. Methylxanthin류로 caffeine과 theobromine은 에탄올과 물 추출에서 홍차(II)와 자스민차가 다른 차에 비하여 높았으며, 모든 시료에서 caffeine이 theobromine 보다 훨씬 더 많은 함량을 보였다. 이상의 결과, 13종의 차 성분 중 홍차(I)에서 caffeine이 가장 높은 함량을 나타낸 것을 제외하고는 대부분의 차에서 catechin 중 ECG와 EGCG의 함량이 많은 것으로 나타났으며, 이 성분이 차의 기능성 물질로 지배적인 물질이었다.
Pentoxifylline MIPs에서 시료와 기능성 단위체 사이에는 수소결합이 형성되었다. 수소결합의 능력은 분자구조상 질소원자의 위치에 의해 결정되어졌다. Pentoxifylline과 caffeine theophylline MIPs 모두는 구조상 유사한 시료들과 affinity가 증가하는 결과를 얻어냈다. 특히 caffiene-theophylline MIPs에서 높은 수치의 체류인자와 IF를 얻었다. 이러한 결과로 적합한 복합 주형분자를 사용할 때 우리가 원하는 목적시료만을 선택적으로 분리 할 수 있고 그러므로 solid phase extraction에 사용되기에 적합하다는 결과를 얻어냈다.
Lactobacillus plantarum CK10을 활용하여 초콜릿 발효를 수행하고 발효산물의 항산화 활성 및 성분 변화를 측정하였다. 초콜릿 발효 산물의 pH는 발효 시간이 지남에 따라 감소하고 적정산도는 증가했으며, 그 증감의 폭은 발효 4시간과 24시간에서 가장 급격히 나타났다. 폴리페놀 함량은 발효 산물의 생성이 활발히 일어나고 있을 것으로 예상되는 발효 8시간에서 약간 증가하였으나 대체로 발효 전후 간 유사한 함량이 확인되었으며, 플라보노이드 함량 또한 발효 전후가 유사하게 유지되었다. 항산화 활성의 지표로 DPPH 라디칼, ABTS 라디칼, Alkyl 라디칼에 대한 소거능을 측정하였을 때, 발효가 진행되어도 초콜릿의 우수한 라디칼 소거능이 유지됨을 확인하였다. GC-MS에 의한 성분 분석을 수행하였을 때, 발효 시간이 지남에 따라 lactic acid의 성분비가 증가하는 것을 확인하였다. 더불어 HMF, xanthosine, caffeine, theobromine 등의 물질이 주요 성분으로 검출되었다. High-performance liquid-chromatography을 이용하여 정량 분석을 수행했을 때, 발효에 따른 theobromine과 caffeine의 함량 변화는 크게 관찰되지 않았다.
Pankaj, Prabhat Kumar;Raina, V.S.;Roy, B.;Mohanty, T.K.;Mishra, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권5호
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pp.626-635
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2009
An experiment was conducted to investigate the effect of Butylated Hydroxy Anisole (BHA), Butylated Hydroxy Toluene (BHT), Pentoxifylline (PTX), Theophylline (TPY) and Theobromine (TBR) on cold protection ability of Murrah buffalo semen at room ($22-25^{\circ}C$) and refrigerated temperature ($4-7^{\circ}C$). Each semen sample was divided into six parts of equal volume and sperm concentration; the first was kept as a control and the remaining five were treated with BHA, BHT, PTX, TPY or TBR. Sperm motility, abnormal spermatozoa, live-dead count, hypo-osmotic swelling and acrosomal integrity were studied at room and refrigerated temperature for various incubation periods viz.; 0, 4, 8, 12 and 24 h at room and 0, 12, 24, 36, 48, 60 and 72 h at refrigerated temperature. Significant improvement in sperm motility, live-dead count, hypo-osmotic swelling and acrosomal integrity were observed in BHT, PTX and TPY fortified extender at room and refrigerated temperature for various incubation periods. From the present study it could be concluded that cold protection ability of buffalo semen can be improved through the addition of BHT followed by PTX and TPY.
To examine individual variation in drug metabolism catalyzed by flavin-containing monooxygenase (FMO), 179 Korean volunteers' urinary molar concentration ratio of theobromine (TB) and caffeine (CA) was determined. Their urine was collected for 1 hr (between 4 and 5 hrs) after they drank a cup of coffee containing 115 mg CA and analyzed by an HPLC system. The lowest TB/CA ratio obtained was 0.40, the highest ratio was 15.17 (38-fold difference), and the median ratio for all subjects was 1.87. The mean was 2.66 with 2.36 S.D.. In 134 nonsmokers, the mean ratio was $2.35{\pm}1.93,$ that of 51 males was $2.30{\pm}2.26$ and 83 females was $2.37{\pm}1.85,$ respectively. There was no significant gender difference in the obtained TB/CA ratio (Mann-Whitney test; p=0.518). There were no smokers among the 83 female volunteers. In the remaining 96 male subjects, the ratio obtained in 51 nonsmokers was $2.30{\pm}2.06$ and that of 45 smokers was $3.62{\pm}3.19.$ This indicated that the TB/CA ratio was increased significantly in smokers (p=0.007). However, when the TB/CA ratios (FMO activity) obtained in all 179 Korean volunteers are compared with the urinary concentration ratios of paraxanthine (PX) plus 1,7-dimethylurate (17U) to CA (CYP1A2 activity), there was a weak but significant correlation (Pearson's correlation coefficient test; $r^2=0.28,$ p<0.0001). This indicates that, although the urinary TB/CA ratio mostly represents FMO activity, minor contribution by CYP1A2 activity cannot be ignored. In conclusion, the FMO activity measured by taking the urinary TB/CA ratio from normal healthy Korean volunteers shows marked individual variations without significant gender differences and the increased TB/CA ratio observed in cigarette smokers may have been caused by the increased CYP1A2 activity.
국산차 기술개발을 위한 기초 자료를 얻고자 국내산 및 스리랑카제품의 특성에 대하여 분석한 결과는 다음과 같다. 1. 국산 홍차는 스리랑카 홍차에 비하여 섬유함량이 50% 높은 반면 탄닌 및 카페인함량은 크게 낮았다. 탄닌의 경우 3.5배, 카페인함량은 50%의 차이를 나타내었다. 또한 회분, 조지방, 조단백질의 함량은 두 제품간에는 큰 차이가 없었다. 2. 스리랑카 홍차에서는 P 3,000ppm, K 15,000ppm, Mg 1,400ppm, Ca 4,000ppm, Cu 22ppm, Cr 21ppm 및 Zn 45ppm으로 국산 홍차보다 높은 함량이었으며, 국산홍차에서는 F 225ppm, Mn 1,950ppm, Fe 265ppm, Sr 6ppm 및 Al 4,100ppm으로 스리랑카 홍차보다 높은 함량이었다. Pb와 Cd는 양 제품에서 검출되지 않았다. 3. 국산 홍차에서는 6종류의 유기산이 분리·동정되었는데 quinic acid와 gallic acid의 함량이 높았다. 스리랑카 홍차에서는 8종류의 유기산이 동정되었으며 shikimic acid, citric acid 및 quinic acid가 주요 유기산이었다. 4. Sucrose의 함량은 스리랑카 홍차보다 국산 홍차가 2.5배 높았다. 5. 홍차의 특수성분인 theaflavin, thearubigin, theobromine의 함량은 스리랑카 홍차에서 높은 경향을 나타내었다.
The degradation efficiency and catabolism pathways of the different methylxanthines (MXs) in isolated caffeine-tolerant strain Pseudomonas putida CT25 were comprehensively studied. The results showed that the degradation efficiency of various MXs varied with the number and position of the methyl groups on the molecule (i.e., xanthine > 7-methylxanthine ${\approx}$ theobromine > caffeine > theophylline > 1-methylxanthine). Multiple MX catabolism pathways coexisted in strain CT25, and a different pathway would be triggered by various MXs. Demethylation dominated in the degradation of N-7-methylated MXs (such as 7-methylxanthine, theobromine, and caffeine), where C-8 oxidation was the major pathway in the catabolism of 1-methylxanthine, whereas demethylation and C-8 oxidation are likely both involved in the degradation of theophylline. Enzymes responsible for MX degradation were located inside the cell. Both cell culture and cell-free enzyme assays revealed that N-1 demethylation might be a rate-limiting step for the catabolism of the MXs. Surprisingly, accumulation of uric acid was observed in a cell-free reaction system, which might be attributed to the lack of activity of uricase, a cytochrome c-coupled membrane integral enzyme.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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