Objectives: Recently, thread-embedding therapy (TET) has been widely applied in Korean medicine for cosmetic purposes such as reducing skin wrinkles. An inserted thread was reported to have induced continuous stimulation, followed by support for connective tissue regeneration. However, the potential role of TET in hair-growth has not yet been reported. Methods: We designed this study to evaluate whether TET has a hair-growth-promoting effect. C57 black 6 (C57BL/6) mice were divided into three groups: normal saline-treated, minoxidil-treated, and thread-embedded groups. Normal saline or 5% minoxidil was topically sprayed on the dorsal skin of the mice once a day for 16 days. Medical threads were embedded into the dorsal skin of the mice in a single application. Hair growth activity was evaluated by using dermoscopic and microscopic observations. Sections of the dorsal skin were stained with hematoxylin and eosin. Expressions of bromodeoxyuridine (BrdU), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), fibroblast growth factor-7 (FGF-7), and fibroblast growth factor-5 (FGF-5) were detected by using immunohistochemical staining. A reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis was adopted to measure the messenger RNA (mRNA) expressions of FGF-7 and FGF-5. Results: TET enhanced anagen development in the hair follicles of C57BL/6 mice. The expressions of BrdU and PCNA, both of which imply active cellular proliferation, were increased by using TET. Moreover, TET increased the expression of FGF-7, an anagen-inducing growth factor, while decreasing the expression of FGF-5, an anagen-cessation growth factor, both at the protein and the mRNA levels. Conclusion: TET enhanced hair re-growth in C57BL/6 mice. TET regulated the expressions of anagen-associated growth factors and activated the proliferation of hair follicular cells in depilated skin lesions. Considering its long-lasting effect, TET may be a good alternative therapeutic for the treatment of alopecia.
Objective: The objective of this study was to investigate the regulation relationship of Ten-eleven translocation 1 (Tet1) in DNA demethylation and the proliferation of primordial germ cells (PGCs) in chickens. Methods: siRNA targeting Tet1 was used to transiently knockdown the expression of Tet1 in chicken PGCs, and the genomic DNA methylation status was measured. The proliferation of chicken PGCs was detected by flow cytometry analysis and cell counting kit-8 assay when activation or inhibition of Wnt4/β-catenin signaling pathway. And the level of DNA methylation and hisotne methylation was also tested. Results: Results revealed that knockdown of Tet1 inhibited the proliferation of chicken PGCs and downregulated the mRNA expression of Cyclin D1 and cyclin-dependent kinase 6 (CDK6), as well as pluripotency-associated genes (Nanog, PouV, and Sox2). Flow cytometry analysis confirmed that the population of PGCs in Tet1 knockdown group displayed a significant decrease in the proportion of S and G2 phase cells, which meant that there were less PGCs entered the mitosis process than that of control. Furthermore, Tet1 knockdown delayed the entrance to G1/S phase and this inhibition was rescued by treated with BIO. Consistent with these findings, Wnt/β-catenin signaling was inactivated in Tet1 knockdown PGCs, leading to aberrant proliferation. Further analysis showed that the methylation of the whole genome increased significantly after Tet1 downregulation, while hydroxyl-methylation obviously declined. Meanwhile, the level of H3K27me3 was upregulated and H3K9me2 was downregulated in Tet1 knockdown PGCs, which was achieved by regulating Wnt/β-catenin signaling pathway. Conclusion: These results suggested that the self-renewal of chicken PGCs and the maintenance of their characteristics were regulated by Tet1 mediating DNA demethylation through the activation of Wnt4/β-catenin signaling pathway.
A tetracycline resistant Vibrio parahaemolyticus, capable of growing on TCBS medium containing tetracycline, was isolated from cultivated fishes. A gene responsible for the tetracycline resistance was cloned from chromosomal DNA of the V. parahaemolyticus strain using Escherichia coli KAM3, which lacks major multi-drug efflux pumps (${\Delta}acrB$) as host cells. The nucleotide sequence and homology analysis revealed an open reading frame (ORF) for tetracycline resistance protein (TetB). In order to characterize the antibiotic resistance of TetB originated from the V. parahaemolyticus strain, the gene was sub cloned into plasmid pSTV28. The resulting plasmid was designated as pSTVTetB and transformated into E. coli KAM3. E. coli KAM3 cells harboring the recombinant plasmid pSTVTetB are able to grow on plates containing tetracycline and oxytetracycline but not doxycycline, indicating that the tetB gene confers the tetracycline- and oxytetracycline-resistance to the host cell.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1998.11a
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pp.177-177
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1998
In the previous report, tetrandrine (TET) and fangchinoline (FAN) showed antithrombotic and antiplatelet aggregation activities. The present study was undertaken to investigate the effects of tetrandrine and fangchinoline on human platelet aggregation, formation of thromboxane B$_2$ and coagulation of platelet poor plasma. TET and FAN inhibited platelet activating factor (PAF) induced human platelet aggregation, but didn't inhibit the specific binding of PAF to its receptor. Meanwhile, TET and FAN also inhibited PAF, thrombin and arachidonic acid induced thromboxane B$_2$ formation in human washed platelets. In addition, neither TET nor FAN showed any anticoagulation activities in the measurement of the activated partial thromboplastin time (APTT), prothrombin time (PT) and thrombin time (TT) using human platelet poor plasma. These results suggest that antithrombotic effects of TET and FAN in mice may be mainly related to the antiplatelet aggregation activities, and the antiplatelet aggregation effects may be related to the intracellular messenger system such as TXA$_2$ formation etc., but not to the binding of PAF to PAF-receptor on the platelet membrane directly.
Jung, Seo-Yeon;Son, Chang-Kyu;Kwak Kyung-Tak;Kim, Byung-Chun;Park, Wan
Korean Journal of Microbiology
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v.38
no.4
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pp.299-305
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2002
Clinically isolated Salmonella Enteritidis strain has a multi drug resistance plasmid, which confers ampicillin, chloramphe-nicol, sulfonamide, streptomycin and tetracycline, named pCAST2. We cloned a 7 kb Sacl fragment of pCAST2 which has sulfonamide, streptomycin and tetracycline resistance genes. The 7 kb SacI fragment showed the organization of sulII-strA-strB-tetR-tetA gene cluster which is different from the other clusters reported previously. In this study, we presented the method to detect this cluster by PCR analysis and showed that this cluster was found in Salmonella strains occurred sporadically at Kyungpook province in 2002.
A Transcutaneous Energy Transmission System (TET) has been developed for the wireless energy transmission with two magnetically coupled coils. A resonance circuit is used to raise the induced voltage and current of the secondary coil. Its resonance frequency depends on the internal resistance of circuit and the transferred energy. Because the transferred energy usually changes in wide range, the output voltage is unstable and the energy transferring efficiency decrease. A push-pull class E amplifier is usedto generate high frequency AC voltage. To maintain proper resonance frequency, the voltage output of the amplifier was continuously monitored and adjusted to the optimized resonance frequency. Because of its high frequency (370 kHz), a phase lockedloop circuit and a comparator are used to monitor the output waveform. The results of experimentaldata show that the PLL circuit can increase the transmission efficiency and stabilize the output voltage of TET.
Normalized resistance interpretation (NRI) analysis for tetracycline was applied to generate information on the epidemiological cut-off value for Vibrio ichthyoenteri isolated from diseased olive flounder (Paralichthys olivaceus) larvae. Thus, 42 strains of V. ichthyoenteri were used to determine minimum inhibitory concentration (MIC) values of tetracycline using Etest. Also, 11 tetracycline resistance related genes were investigated by PCR method. Most tetracycline-resistant strains harbored both tetB and tetM with a few exceptions. NRI-derived mean and 2 SD above the mean of theoretical normal distributions of susceptible isolates were 0.33 mg/L and 1.66 mg/L, respectively. The epidemiological cut-off value for V. ichthyoenteri from the calculations could be set to S ${\leq}$ 2 mg/L. Of the 42 strains, 15 were classified as non-wild type (NWT), and MIC values of the NWT strains vary regardless of tetB and tetM detection, suggesting that there may be other mechanisms involved in tetracycline resistance in this Vibrio species.
Kim, Hyo Yeon;Jun, Jin Woo;Lim, Se Ra;Park, Seon Young;Han, Jee Eun;Park, Se Chang;Kim, Ji Hyung
Korean Journal of Veterinary Research
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v.59
no.4
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pp.207-211
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2019
Mass mortality in commercially cultured Amur catfish (Silurus asotus), showing symptoms of dermal ulcerations, occurred on a private farm in Mar 2019 in Korea. β-hemolytic bacteria were isolated from the ulcers and kidneys of the fish and identified as Aeromonas veronii. The isolate was resistant to tetracycline and possessed cytotoxic heat-labile enterotoxin (aerolysin/hemolysin). We investigated the genetic determinants associated with tetracycline resistance, and the isolate has been confirmed to simultaneously possess tetA and tetE genes. This is the first report on the occurrence of tetracycline-resistant A. veronii infection related to mass mortality in commercially cultured Amur catfish in Korea.
Objective: Investigated the effect and mechanism of ascorbic acid on the development of porcine embryos produced by somatic cell nuclear transfer (SCNT). Methods: Porcine embryos were produced by SCNT and cultured in the presence or absence of ascorbic acid. Ten-eleven translocation 3 (TET3) in oocytes was knocked down by siRNA injection. After ascorbic acid treatment, reprogramming genes were analyzed by realtime reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Furthermore, relative 5-methylcytosine and 5-hydroxymethylcytosine content in pronucleus were detected by realtime PCR. Results: Ascorbic acid significantly increased the development of porcine embryos produced by SCNT. After SCNT, transcript levels of reprogramming genes, Pou5f1, Sox2, and Klf were significantly increased in blastocysts. Furthermore, ascorbic acid reduced 5-methylcytosine content in pronuclear embryos compared with the control group. Knock down of TET3 in porcine oocytes significantly prevents the demethylation of somatic cell nucleus after SCNT, even if in the presence of ascorbic acid. Conclusion: Ascorbic acid enhanced the development of porcine SCNT embryos via the increased TET3 mediated demethylation of somatic nucleus.
In this study, using FIV-based lentivirus vector system, we tried to express hG-CSF in tetracycline-controllable manner. hG-CSF influences the proliferation, differentiation, and survival of cells in the neutrophil lineage. To enhance stability and translation of hG-CSF transcript, WPRE sequence was also introduced into FIV-Tet-On vector at downstream region of either the hG-CSF gene or the sequence encoding rtTA. Primary culture cells (CEF, chicken embryonic fibroblast; PFF, procine fetal fibroblast) infected with the recombinant FIV were cultured in the medium supplemented with or without doxycycline for 48 hours, and induction efficiency was measured by comparing the hG-CSF gene expression level using quantitative real-time PCR, Western blot and ELISA. Higher hG-CSF expression and tighter expression control were observed from the vector in which the WPRE sequence was placed at downstream of the hG-CSF (in CEF) or rtTA (in PEE) gene. This FIV-Tet-On vector system may be helpful in solving serious physiological disturbance problems which has continuously hampered successful production of transgenic animals and gene therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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