Oxygen radical은 생물체의 산소대사 과정의 부산물로 생성되어 세포내 여러 성분을 불환성화시키거나 미생물에 대한 방어기전으로 작용한다. 기생충에 존재하는 antioxidant enzyme은 숙주의 방어기전에서 유리하는 oxygen radical의 독성을 제거하므로 이 효소의 활성도는 기생충의 생존에 영향을 미친다고 생각하고 있다. 폐흡충은 피낭유충이 종숙주에 침입한 다음 숙주내 조직이행 시기를 거쳐서 폐에 도달하여 성충이 되므로 이 과정에서 각 시기별 산소독성과 이에 대항하는 효소의 환성이 다를 것으로 추정하였다. 폐흡충의 피낭유충과 감염후 4주, 8주, 12주에 얻은 충체의 추출물을 조효소(조효소)로 하여 SOD, catalase, peroxidase, glutathione peroxidase의 활성도를 측정하였다. 각 효소의 비환성도(specific activity) 중 catalase는 피낭유충에서 최고치였으며, SOD 와 peroxidase는 4주 충체에서 가장 높았고, glutathione peroxidase는 8주 충체에서 높았다. 이들 4가지 antioxidant효소의 비환성도는 감염 12주인 성충에서 모두 낮게 측정되어 조직 이행시기의 충체에서 더 높은 효 소 활성도를 지니고 있음을 알 수 있었다.
Cu,Zn-superoxide dismutase (SOD) was purified from horseradish by using Mono Q and Superose 12 FPLC column chromatography. The native molecular mass of the purified enzyme was approximately 33 kDa, as determined by gel filtration. The subunit molecular weight, as estimated by SDS-PAGE, was 16 kDa. These results indicated that the native enzyme is a homodimer. We investigated the free radical-generating function of horseradish Cu,Zn-SOD by using a chromogen, 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonate) (ABTS) which reacts with ${\cdot}OH$ radicals to form $ABTS^{+{\cdot}}$ The formation of $ABTS^{+{\cdot}}$ was required for both active Cu, Zn-SOD and $H_2O_2$. The optimal pH for the free radical-generating activity of this enzyme was 6.0-8.0, and it retained about $40^{\circ}C$ of its maximum activity when exposed at $40^{\circ}C$ for 15 min. A neutral scavenger, ethanol, inhibited the $ABTS^{+{\cdot}}$ formation by horseradish Cu, Zn-SOD more effectively than that by the mammalian enzyme. These results suggest that the active channel of horseradish enzyme is slightly larger than that of the mammalian enzyme.
Recently new soybean saponins with D DMP (2,5-dihydroxy-6-methyl-2,3,- dihydro-4H-pyran-4-one) moiety have been isolated from legumes. The purpose of this study is to characterize ROS scavenging activities of DDMP saponins ($\alpha$g, $\beta$g saponin) isolated from Glycine max (L.) Merrill. The scavenging activity on OH was examined in terms of lipid peroxidation in the rat liver homogenates and the same activity on $O_2$ was also determined in the xanthine-xanthine oxidase system, respectively. Up to 0.25 mg DDMP saponins ($\alpha$g and $\beta$g saponins) did not cause any significant effects on the prevention of lipid peroxidation as compared with the control group. In terms of superoxide scavenging activities, 0.25 and 0.5 mg $\alpha$g saponin inhibits only 2.6% and 5.5% (p<0.05) of the control group, respectively. However, $\alpha$g saponin dose-dependently (p<0.01, r=0.955) inhibits the formation of superoxide radical unto 21.3% of the control group with a maximal dose of 0.5 mg (p<0.01), equivalent to 0.17 units of superoxide dismutase activity.
A superoxide anion radical scavenger isolated from Capsella bursa-pastoris was characterized by infrared (IR) spectroscopy, sugar analysis, ultraviolet (UV) spectroscopy, $^{1}H$ and $^{13}C$ nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopies, and fast atom bombardment (FAB) mass analysis. The compound was assumed to be a flavonoid-O-glycoside from IR spectrum and UV absorption maxima. When the sugar composition of the compound was examined by thin layer chromatography (TLC) and gas chromatography (GC) of the acid hydrolysate, only glucose was detected. According to the results of UV spectrotroscopy by using shift reagents, the compound was supposed to be luteolin (5,7,3',4'-tetrahydroxy flavone) or chrysoeriol (5,7,4'-trihydroxy-3'-methoxy flavone) with glucose. Based on $^{1}H$- and $^{13}C-NMR$ spectroscopies, the compound was deduced as 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxy-${\alpha}$-6-c-glucosyl-${\beta}$-2"-o-glucosyl flavone. In FAB mass analysis the compound was finally characterized as 7,4'-dihydroxy-5,3'-dimethoxy-${\alpha}$-6-c-glucosyl-${\beta}$-2"-o-glucosyl flavone ($C_{29}H_{34}O_{16}$, M.W.=638).
To investigate the long term effect of buchu (Chinese chives) diet on ROS formation in the liver and stin tissue of ICR mice, one of control, 2% or 5% buchu-added diet was fed to ICR mice for 12 months. Superoxide anion (O2ㆍ), hydrogen peroxide($H_2O$$_2$) and hydroxyl radical (ㆍOH) contents were measured in cytosol, microsome, mitochondria of liver and skin of mice, respectively. Behu diet showed a significant decrease of superoxide anion, hydrogen peroxide and hydroxyl radical contents in liver and skin tissues compared to control diet, and this effect is especially higer at 5% than at 2% buchu diet level. ICR mice showed an age-dependent increase in ROS contents, while the group fed buchu diet decreased its ROS contents significantly and ROS contents of liver appeared to be 2 fold higher than skin. The results of the present study suggest that antioxidative components and sulfur-compounds in buchu diet appear to be responsible for the inhibition of ROS formation in ICR mice.
In an attempt to define the effects of biphenyldimethyl dicarboxylate (DDB) on the lipid peroxidation and oxygen free radical scavenging enzymes activities in mercuric chloride-induced hepatotoxic rats, we studied malondialdehyde (MDA) level and the activities of catalase and superoxide dismutase (SOD) in liver of the rats at 24 hr after the injection of mercuric chloride. Sprague-Dalwey albino rats were injected subcutaneously with mercuric chloride (5 mg/kg) only and mercuric chloride (5 mg/kg) plus. DDB (200 mg/kg/day, p.o) is administered for 4 days prior to 3 days from the injection of mercuric chloride. The group treated with mercuric chloride showed significantly higher MDA level and lower catalase and SOD activities as compared with that of control group. The group treated with mercuric chloride plus DDB showed significantly lower MDA level and catalase activity and higher SOD activity as compared with that of mercuric chloride-treated group. These results suggest that the excessive oxygen free radicals resulting from the depression of superoxide dismutase activity is an important determinant in the pathogenesis of mercuric chloride-induced hepatotoxicity and DDB has antioxidant effects.
In this study, the antioxidative activity of Jeolpyun containing S. glauca (Bunge) Bunge powder (2%, 4%, 6%, and 8%) and extract (2%, 4%, 6%, and 8%) was evaluated based on the total polyphenol contents, electron-donating ability, scavenging of superoxide anion radical, and decomposition of hydrogen peroxide. Total polyphenol contents of Jeolpyun containing 8% S. glauca (Bunge) Bunge powder were the highest with a value of 2,280±0.00 ㎍ GAE/mL. It was observed that total polyphenol content exhibited a significant relation with concentrations at p<0.05. The electron-donating ability of Jeolpyun containing 8% S. glauca (Bunge) Bunge extract was the highest with a value of 83.93±0.69%. The electron-donating abilities revealed significant differences between concentrations (p<0.05). The superoxide radical scavenging ability of the blank was 0.01523±0.00068 and Jeolpyun containing 6% S. glauca (Bunge) Bunge powder was the highest with a value of 0.00977±0.00842. The hydrogen peroxide decomposing ability of Jeolpyun containing 0% S. glauca (Bunge) Bunge powder was -0.00377±0.0049; 8% S. glauca (Bunge) Bunge powder revealed the highest decomposing ability of -0.0476±0.0234. Hydrogen peroxide decomposing abilities revealed significant differences between concentrations (p<0.05). Jeolpyun containing S. glauca (Bunge) Bunge powder and extract demonstrated improved antioxidative activities.
This study was designed to investigate the effects of silk fibroin powder on oxygen radicals and their scavenger enzymes in serum of rats. Sprague-Dawley(SD) male rats (160${\pm}$10 g) were fed experimental diets (SFP-2.5 and SFP-5.0 groups)added 2.5 and 5.0 g/kg BW/day for 6 weeks. Triglyceride levels were remarkably inhibited (15∼25%) in SFP-2.5 and SFP-5.0 groups compared with control group. Hydroxyl radical ($.$OH) formations resulted in a marked decrease (15%∼25%) compared with control group, while superoxide radical and hydrogen peroxide formations resulted in a significant decrease (6∼12% and 10%). Lipid peroxide and oxidized protein (>C=O group) productions resulted in a significant decrease (6∼12% and 6%) compared with control group. Superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities were remarkably increased (35∼55% and 40∼50%), but glutathione peroxidase (GSHPX) activities were significantly increased (13%) compared with control group. These results suggest that anti-aging effect of silk fibroin powder (SFP) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes.
The purpose of this study was to evaluate the antioxidative activities of jeolpyun containing Cnidium officinale M extract (2%, 4%, 6%, 8%) by total polyphenol contents, electron donating ability on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), scavenging ability of superoxide anion radical and decomposing ability of hydrogen peroxide. In chromaticity analysis, the brightness significantly decreased with increasing Cnidium officinale M extract content. Jeolpyun containing 8% Cnidium officinale M extract revealing the highest value for the redness and the yellowness, 1.07, 12.70, respectively. The total polyphenol contents of jeolpyun containing 8% Cnidium officinale M extract were the highest content of 4,213 ㎍ gallic acid equivalent (GAE)/mL. The total polyphenol contents revealed significant difference (p<0.05). Jeolpyun containing 8% Cnidium officinale M extract revealing the highest electron donating ability (83.55%). The electron donating abilities were significantly related at p<0.05. The scavenging abilities of superoxide anion radical for jeolpyun containing 4% Cnidium officinale M extract revealed the highest ability (0.01676). There was no significant difference. The hydrogen peroxide decomposing ability for jeolpyun containing 8% Cnidium officinale M extract revealed the most hydrogen peroxide decomposing ability (-0.193) and the hydrogen peroxide decomposing ability revealed a significant difference (p<0.05).
This study was designed to investigate the effects of mulberry (Morus alba L.) leaf extract (MLE) on oxygen radicals and their scavenger enzymes in liver membranes of rats. Sprague-Dawley (SD) male rats (160$\pm$10 g) were fed basic diet (control group), and experimental diets (MLE-100 and MLE-300 groups) added 100 and 300 mg/kg BW/day for 6 weeks. Hydroxyl radical (.OH) levels resulted in a significant decreases (15.2% and 18.1%, 5.6% and 8.0%, respectively) in liver mitochondria and microsomes could be not obtained. These are no significant differences in superoxide radical ($O_2$) levels of liver cytosol in MLE-100 and MLE-300 groups compared with control group. Lipid peroxide (LPO) levels were slightly decreased about 13.6% and 6.1% in liver mitochondria and microsomes of MLE-300 group compared with control group. Oxidized protein (OP) levels were remarkably decreased about 16.9% and 27.2% in liver microsomes only of MLE-100 and MLE-300 group compared with control group. Mn-SOD activities in liver mitochondria were remarkably increased (18.2% and 28.7%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups, and Cu,Zn-SOD activities in liver cytosol were also significantly increased (11.3% and 20.2%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups compared with control group. Mn-SOD activities in liver mitochondria were remarkably increased (18.2% and 28.7%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups, and Cu,Zn-SOD activities in liver cytosol were also significantly increased (11.3% and 20.2%, respectively) in MLE-100 and MLE-300 groups compared with control group, but significant difference between GSHPx activities in liver cytosol could be not obtained. These results suggest that anti-aging effect of mulberry leaf extract (MLE) may play a pivotal role in attenuating a various age-related changes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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