Oxomemazine이 muscarinic receptor subtypes에 대하여 선택성을 가지는지에 관한 지견을 얻고자, 대뇌, 심실 및 회장 muscarinic receptor에 대한 oxomemazine의 결합성질을 조사, 비교하였다. $[^3H]QNB$ 포화결합실험 결과 세 조직의 muscarinic receptor는 $[^3H]QNB$에 대해서는 affinity가 약 60pM인 단일 receptor인 것으로 추정되었다. 대뇌에서 pirenzepine과 oxomemazine의 $[^3H]QNB$ 결합억제에 대한 Hill coefficient는 각각 0.67 및 0.8로서 대뇌에는 이들 약물에 대하여 affinity가 서로 다른 두 종류의 muscarinic receptor subtypes가 존재하는 것으로 나타났으며, pirenzepine에 대한 high $affinity(M_1)$와 $low affinity(M_2)$ receptor 및 oxomemazine에 대한 high $affinity(O_H)$와 $low\;affinity (O_L)$ receptor의 분포비는 약 60:40 및 40:60이었고, $M_1$과 $M_2$ receptor에 대한 pirenzepine의 $K_i$치는 16nM 및 431 nM, $O_H$와 $O_L$, receptor에 대한 oxomemazine 의 $K_i$치는 80nM 및 1350nM이었다. 그러나 심실과 회장에서 이들 약물의 $[^3H]QNB$ 결합억제에 대한 Hill coefficient는 1에 가까웠다. 심실과 회장 muscarinic receptor에 대한 pirenzepine의 $K_i$치는 850nM 및 250nM, oxomemazine의 $K_i$치는 1460nM 및 670nM로서 대피에서 이들 약물의 low affinity receptor에 대한 $K_i$치에 가까웠다. 즉, muscarinic receptor에 대한 affinity면에서 oxomemazine은 pirenzepine과 같이 대뇌에서 가장 높았으며, 회장에 대해서는 중등도였고, 심실에서 가장 낮았다. 이로 보아 oxomemazine은 $M_1\;receptor$에 선택성이 있는 것으로 추정된다.
Objectives: Estimating influenza-associated mortality is important since seasonal influenza affects persons of all ages, causing severe illness or death. This study aimed to estimate influenza-associated mortality, considering both periodic changes and age-specific mortality by influenza subtypes. Methods: Using the Microdata Integrated Service from Statistics Korea, we collected weekly mortality data including cause of death. Laboratory surveillance data of respiratory viruses from 2009 to 2016 were obtained from the Korea Centers for Disease Control and Prevention. After adjusting for the annual age-specific population size, we used a negative binomial regression model by age group and influenza subtype. Results: Overall, 1 859 890 deaths were observed and the average rate of influenza virus positivity was 14.7% (standard deviation [SD], 5.8), with the following subtype distribution: A(H1N1), 5.0% (SD, 5.8); A(H3N2), 4.4% (SD, 3.4); and B, 5.3% (SD, 3.7). As a result, among individuals under 65 years old, 6774 (0.51%) all-cause deaths, 2521 (3.05%) respiratory or circulatory deaths, and 1048 (18.23%) influenza or pneumonia deaths were estimated. Among those 65 years of age or older, 30 414 (2.27%) all-cause deaths, 16 411 (3.42%) respiratory or circulatory deaths, and 4906 (6.87%) influenza or pneumonia deaths were estimated. Influenza A(H3N2) virus was the major contributor to influenza-associated all-cause and respiratory or circulatory deaths in both age groups. However, influenza A(H1N1) virus-associated influenza or pneumonia deaths were more common in those under 65 years old. Conclusions: Influenza-associated mortality was substantial during this period, especially in the elderly. By subtype, influenza A(H3N2) virus made the largest contribution to influenza-associated mortality.
This paper describes the development a of direct multiplex reverse transcription-nested polymerase chain reaction (PCR) method, devised for simultaneous detection and typing of influenza viruses. This method combines the direct reverse transcription reaction without RNA purification with the enhancement of sensitivity and specificity of nested PCR. The method successfully detected three major human influenza viruses: influenza virus A subtype 1 (H1N1) and subtype 3 (H3N2), and influenza B virus (B). The minimum number of virus particles (pfu/ml) necessary for detection in spiked saliva samples was 200 (H1N1), 140 (H3N2), and 4.5 (B). The method's sensitivity and simplicity will be convenient for use in clinical laboratories for the detection and subtyping of influenza and possibly other RNA viruses.
조류 인플루엔자바이러스(AIV) H5N1 아형을 Real-time PCR법을 이용하여 가장 빠르게 진단할 수 있는 방법을 개발하였다. 검색 대상의 염기서열은 AIV H5N1 아형의 hemagglutinin 유전자 중 가장 상동성이 높은 387 bp의 부위를 선택하였고, 실험의 안전을 위하여 인공합섬의 방법으로 제작하였다. Microchip을 기반으로 한Real-time PCR법을 사용하였으며, 총PCR 반응액의 양을 $1{\mu}l$로, PCR 과정 중 각 단계, 즉 해리, 접합, 신장의 시간을 각1초, 1초, 3초로 하여 총 실험시간을 단축하였다. 진단을 위한 실험과정에서 PCR 및 융점분식에 소요된 최단 시간은 12분28초였으며, 민감도측정에서 최소2.4개의 hemaggutinin 유전자를 기질로 하여 목적한 특이 189 bp의 PCR 산물을 증폭할 수 있었기에, 본 연구에서는 이런 초고속 PCR 실험방식을 Quick Real-time PCR이라 명명하였다. 이 결과들은 가금류 및 사람에게 전파된 AIV H5N1아형의 진단에 적용될 수 있을 뿐 아니라, PCR이 사용되는 다른 신속검색법에도 널리 적용 될 수 있을 것으로 기대한다.
Trong Duc Tran;Suwicha Kasemsuwan;Manakorn Sukmak;Waraphon Phimpraphai;Tippawon Prarakamawongsa;Long Thanh Pham;Tuyet Bach Hoang;Phuong Thi Nguyen;Thang Minh Nguyen;Minh Van Truong;Tuan Pham Dao;Pawin Padungtod
Journal of Veterinary Science
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제25권2호
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pp.20.1-20.15
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2024
Background: Avian influenza (AI) is a contagious disease that causes illness and death in poultry and humans. High pathogenicity AI (HPAI) H5N6 outbreaks commonly occur in Quang Ninh province bordering China. In June 2021, the first HPAI H5N8 outbreak occurred at a Quang Ninh chicken farm. Objectives: This study examined the risk factors associated with HPAI H5N6 and H5N8 outbreaks in Quang Ninh. Methods: A retrospective case-control study was conducted in Quang Ninh from Nov 2021 to Jan 2022. The cases were households with susceptible poultry with two or more clinical signs and tested positive by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. The controls were households in the same village as the cases but did not show clinical symptoms of the disease. Logistic regression models were constructed to assess the risk factors associated with HPAI outbreaks at the household level. Results: There were 38 cases with H5N6 clade 2.3.4.4h viruses (n = 35) and H5N8 clade 2.3.4.4b viruses (n = 3). Compared to the 112 controls, raising poultry in uncovered or partially covered ponds (odds ratio [OR], 7.52; 95% confidence interval [CI], 1.44-39.27), poultry traders visiting the farm (OR, 8.66; 95% CI, 2.7-27.69), farms with 50-2,000 birds (OR, 3.00; 95% CI, 1.06-8-51), and farms with ≥ 2,000 birds (OR, 11.35; 95% CI, 3.07-41.94) were significantly associated with HPAI outbreaks. Conclusions: Combining biosecurity measures, such as restricting visitor entry and vaccination in farms with more than 50 birds, can enhance the control and prevention of HPAI in Quang Ninh and its spread across borders.
The nature of the muscarinic receptors in bovine adrenal medulla was investigated in this study. [$^3$H]Quinuclidinyl benzilate(QNB) specifically bound to a single class of muscarinic receptor with a $K_{D}$ value of about 70 pM in bovine adrenal medullary, cardiac ventricular and ileal homogenates. Pirenzepine inhibition curves of [$^3$H]QNB binding to cardiac ventricular and ileal homogenates were steep, indicating the presence of a single class of binding site for pirenzepine with a Ki value of 990 nM and 508 nM, respectively. However, pirenzepine/[$^3$H]QNB competition binding curves in adrenal medulla suggested the presence of two binding sites (Hill coefficient=0.59) with a high( $M_1$) and a low( $M_2$) affinity. Respective Ki values for pirenfepine were 16 nM and 633 nM, with 44% of total sites having a high affinity( $M_1$). Gallamine, which is selective to cardiac $M_2$-receptor, inhibited [$^3$H]QNB binding to adrenal medullary, cardiac ventricular and ileal homogenates with Ki values of 12 $\mu$M, 6 $\mu$M and 13 $\mu$M, respectively. Thus, the binding affinities of pirenzepine and gallamine for $M_2$-receptor in adrenal medulla were similar to those in ileum, which contains the $M_3$-receptor. These results indicate that the $M_1$- and $M_3$- muscarinic receptor subtypes coexist in the bovine adrenal medulla.a.
Ninety pigs under the age of 120-day-old requested at the diagnostic laboratory of animal diseases in Cheju National University were evaluated for the prevalence of tissue antigen and serum antibody to swine influenza virus (SIV). For histopathologic examination there was sampled at the consolidated area in cranioventral or dorsocaudal lobes of lungs. Lung tissues from all pigs were tested for the antigen of SIV type A by immunohistochemistry (IHC). Sera from 56 pigs were used for the antibody detection to SIV type A (subtype H1N1 and H3N2) by haemagglutinin inhibition test. Pneumonic lesions were observed in 72 cases (80%) of 90 pigs. Broncho-interstitial or interstitial pneumonia were more prevalent than suppurative or fibrinous bronchopneumonia. According to HI test, 46.4% of the tested sera showed seropositive. Positive sera were consisted with 5.3% for SIV H1N1, 28.6% for SIV H3N2, and 12.5% for both subtype to be tested, respectively. SIV antigens were detected in 51 cases(56.6%) of 90 pigs. Most SIV antigens were presented in the epithelium of the bronchi and bronchiole. Necrotizing bronchitis or bronchiolitis were observed in 28(31.1%) cases of all inspected pigs. These results suggested that SIV might be an important role to induce swine pneumonia in Jeju. Also IHC was very useful for the detection of SIV in the lung.
A single uniform population of specific, saturable, high affinity binding site of $[^3H]QNB$ guinuclidinyl benzilate(QNB) was identified in the rat cerebral microsomes. The Kd value(37.2 pM) for $[^3H]QNB$ calculated from the kinetically derived rate constants was in agreement with the Kd value(48.9 pM) determined by analysis of saturation isotherms at various receptor concentrations. Dimenhydrinate(DMH), histamine $H_1-blocker$, increased Kd value for $[^3H]QNB$ QNB without affecting the binding site concentrations and this effect resulted from the ability of DMH to slow $[^3H]QNB-receptor$ association. Pirenzepine inhibition curve of $[^3H]QNB$ binding was shallow(nH = 0.52) indicating the presence of two receptor subtypes with high ($M_1-site$) and low($M_2-site$) affinity for pirenzepine. Analysis of these inhibition curves yielded that 68% of the total receptor populations were of the $M_1-subtype$ and the remaining 32% of the $M_2-subtype$. Ki values for the $M_1-$ and $M_2-subtypes$ were 2.42 nM and 629.3 nM, respectively. Ki values for $H_1-blockers$ that inhibited $[^3H]QNB$ binding varied with a wide range ($0.02-2.5\;{\mu}M$). The Pseudo-Hill coefficients for inhibition of $[^3H]QNB$ binding by most of $H_1-blockers$ examined except for oxomemazine inhibition of $[^3H]QNB$ binding were close to one. The inhibition curve for oxomemazine in competition with $[^3H]QNB$ was shallow(nH = 0.74) indicating the presence of two receptor populations with different affinities for this drug. The proportion of high and low affinity was 33:67. The Ki values for oxomemazine were $0.045{\pm}0.016\;{\mu}M$ for high affinity and $1.145{\pm}0.232\;{\mu}M$ for low affinity sites. These data indicate that muscarinic receptor blocking potency of $H_1-blockers$ varies widely between different drugs and that most of $H_1-blockers$ examined are nonselective antagonist for the muscarinic receptor subtypes, whereas oxomemazine might be capable of distinguishing between subclasses of muscarinic receptor.
Kim, Young-Sook;Jin, Sung-Ha;Lee, You-Hiu;Park, Jong-Dae;Kim, Shin-Il
Archives of Pharmacal Research
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제23권5호
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pp.518-524
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2000
We examined the modulation of protein kinase C (PKC) subtypes during apoptosis induced by ginsenoside Rh2 (G-Rh2) in human neuroblastoma SK-N-Bl(2) and rat glioma C6Bu-1 cells. Apoptosis induced by C-Rh2 in both cell lines was confirmed, as indicated by DNA fragmentation and in situ strand breaks, and characteristic morphological changes. During apoptosis induced by G-Rh2 in SK-N-BE(2) cells, PKC subtypes $\alpha$, $\beta$ and $\gamma$ were progressively increased with prolonged treatment, whereas PKC $\delta$ increased transiently at 3 and 6 h and PKC $\varepsilon$ was gradually down-regulated after 6 h following the treatment. On the other hand, PKC subtype $\beta$ markedly increased at 24 h when maximal apoptosis was achieved. In C6Bu-l cells, no significant changes in PKC subtypes $\alpha$, $\gamma$, $\delta$, $\varepsilon$ and $\beta$ were observed during apoptosis induced by G-Rh2. These results suggest the evidence for a possible role of PKC subtype in apoptosis induced by G-Rh2 in SK-N-BE(2) cells but not in C6Bu-1 cells, and raise the possibility that G-Rh2 may induce apoptosis via different pathways interacting with or without PKC in different cell types.
Le, Thanh Hoa;Le, Tran Binh;Doan, Thanh Huong Thi;Quyen, Dong Van;Le, Kim XuyenThi;Pham, Viet Cuong;Nagataki, Mitsuru;Nomura, Haruka;Ikeue, Yasunori;Watanabe, Yoshiya;Agatsuma, Takeshi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권4호
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pp.405-411
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2011
Avian influenza virus vaccines produced in oil-emulsified inactivated form with antigen content of at least 160 hemagglutinin units (HAU) induced immunity in birds. However, in addition to enhancing the effect of the adjuvant(s), other additional supplemented biological compounds included in inactivated vaccines could produce higher levels of antibody. We examined in chickens, Vietnamese ducks, and muscovy ducks the adjuvant effect of Sophy ${\beta}$-glucan (SBG), a ${\beta}$-1,3-1,6 glucan produced by the black yeast Aureobasidium pollulans strain AF0-202, when administered with an avian influenza H5 subtype vaccine. In Experiment 1, 40 chickens (ISA Brown hybrid), allocated to four groups of ten each, were immunized with Oil-H5N1(VN), Oil-H5N1(CN), Oil-H5N2(CN), and saline (control group), respectively. In Experiment 2, chickens (ISA Brown hybrid), muscovy ducks (French hybrid), and Vietnamese ducks (indigenous Vietnamese) were used to further assess the effect of SBG on immunogenicity of the Oil-H5N1(VN) Vietnamese vaccine. ELISA and hemagglutination inhibition (HI) assays were used to assess the antibody response. The H5 subtype vaccines initiated significantly higher immune responses in the animals dosed with SBG, with 1.0-1.5 $log_2$ higher HI titers and 10-20% ELISA seroconversion, compared with those not dosed with ${\beta}$-glucan. Notably, some of the animals dosed with SBG induced HI titers higher than 9.0 $log_2$ following boosting immunization. Taken together, our serial studies indicated that SBG is a potential effector, such as enhancing the immune response to the H5 vaccines tested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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