Apple mosaic virus (ApMV), a member of the genus Ilarvirus, was detected and isolated from diseased 'Fuji' apple (Malus domestica) in Korea. The coat protein (CP) genes of two ApMV strains, denoted as ApMV-Kl and ApMV-K2, were amplified by using the reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) and were analyzed thereafter. The objectives were to define the molecular variability of genomic information of ApMV found in Korea and to develop virus-derived resistant gene source for making virus-resistant trans-genic apple. RT-PCR amplicons for the APMVS were cloned and their nucleotide sequences were determined. The CPs of ApMV-Kl and ApMV-K2 consisted of 222 and 232 amino acid residues, respectively. The identities of the CPs of the two Korean APMVS were 93.1% and 85.6% at the nucleotide and amino acid sequences, respectively. The CP of ApMV-Kl showed 46.1-100% and 43.2-100% identities to eight different ApMV strains at the nucleotide and amino acid levels, respectively. When ApMV-PV32 strain was not included in the analysis, ApMV strains shared over 83.0% and 78.6% homologies at the nucleotide and amino acid levels, respectively. ApMV strains showed heterogeneity in CP size and sequence variability. Most of the amino acid residue differences were located at the N-termini of the strains of ApMV, whereas, the middle regions and C-termini were remarkably conserved. The APMVS were 17.(1-54.5% identical with three other species of the genus Ilarviyus. ApMV strains can be classified into three subgroups (subgroups I, II, and III) based on the phylogenetic analysis of CP gene in both nucleotide and amino acid levels. Interestingly, all the strains of subgroup I were isolated from apple plants, while the strains of subgroups II and III were originated from peach, hop, or pear, The results suggest that ApMV strains co-evolved with their host plants, which may have resulted in the CP heterogeneity.
Bloomless cucumber fruits are commercially produced by grafting onto the pumpkin stocks (Cucurbita moschata) to restricted silicon ($SiO_2$) absorption. Inhibition of silicon absorption in bloomless stocks is conferred by a mutant allele of the CmLsi1 homologous to Lsi1 in rice. In this study, we characterized the Lsi1 homologs in pumpkin (C. moschata) and its cold-tolerant wild relative C. ficifolia ('Heukjong') in order to develop a DNA marker for selecting a bloomless trait and to establish the molecular basis for breeding bloomless stock cultivars of C. ficifolia. A Cleaved amplified polymorphic sequence (CAPS) marker (CM1-CAPS) was designed based on a non-sysnonymous single nucleotide polymorphism (SNP, C>T) of the CmLsi1 mutant-type allele, and its applicability for Marker-assisted selection (MAS) was confirmed by evaluating three bloom and five bloomless pumpkin stock cultivars. Quantitative RT-PCR of the CmLsi1 for these stock cultivers implied that expression level of the CmLsi1 gene does not appear to be associated with the bloom/bloomless trait and may differ depending on plant species and tissues. A full length cDNA of the Lsi1 homolog [named CfLsi1($B^+$)] of 'Heukjong' (C. ficifolia), was cloned and sequence comparison between CmLsi1($B^+$) and CfLsi1($B^+$) revealed that there exists total 24 SNPs, of which three were non-synonymous. Phylogenetic analysis of CfLsi1($B^+$) and Lsi1 homologs further revealed that CfLsi1($B^+$) is closesly related to Nodulin 26-like intrinsic proteins (NIPs) and most similar to CpNIP1 of C. pepo than C. moschata.
The mannanase-producing bacteria, designated CS47, was isolated from the fresh feces of three horses (from a farm in Jinju National University). The isolate CS47 was facultatively anaerobic and grew at temperatures ranging from $20^{\circ}C$ to $50^{\circ}C$ with an optimal temperature of $38^{\circ}C$. The DNA G+C content of the isolate CS47 was 44 mlo%. The major fatty acids were anteiso-15:0 (39.6%), 17:0 (7.6%), and iso-15:0 (37.8%). The 16S rRNA gene sequence similarity between the isolate CS47 and other Bacillus strains varied from 93% to 98%. In the phylogenetic analysis based on these sequences, the isolate CS47 and Bacillus amyloliquefaciens clustered within a group and separated from other species of Bacillus. Based on the physiological and molecular properties, the isolate CS47 was classified within the genus Bacillus as Bacillus amyloliquefaciens CS47. The optimal pH and temperature for mannanase activity of B. amyloliquefaciens CS47 were pH 6.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The thermal stability of mannanase from B. amyloliquefaciens CS47 is valuable when using this enzyme in industrial application.
From 1996 to 1999, potato-growing areas in Korea were surveyed for identification and distribution of potato scab pathogens. Potato scab was widely distributed in the mass cultivation areas, especially in Jriu island, southern areas of Chonnam and Gyounggi provinces, and the alpine area of Gangwon province. Jeju island was the most affected area by this disease. A total of 55 Streptomyces strains were isolated from potato scab lesions, among which 40 strains were pathogenic on progeny tubers. Among the pathogenic strain, 21 strains were identified as previously described S. scabies, 7 Strains as S. turgidiscabies, and 5 Strains as S. acidiscabies, while 7 strains were observed as having distinct phenotypic properties. These strains were classified into six distinct clusters based on phenotypic characteristics and selected representative strains for each cluster. S. scabies (S33) had grey spores in a spiral chain. Mean-while, S. turgidiscabies (S27) had grey spores, S. acidiscabies (S71) had white spores, S. luridiscabiei (S63) had yellow-white spores, S. puniciscabiei (S77) had purple-red spores, and S. niveiscabiei (S78) had thin and compact white spores, all in a rectiflexuous chain. Pathogenicity was determined by the production of thaxtomin A and homologs of necl and ORFtnp genes. In TLC, representative strains S27, S71, S63, S77, and S78 produced a yellow band that co-migrated with the authentic thaxtomin A. However, thaxtomin A was not detected in chloroform extracts from oatmeal broth culture and Slice tuber tissue of S. luridiscabiei (S63) and S. puniciscabiei (S77) by HPLC analysis. In addition, no homologs of necl and ORFtnp genes in S. acidiscabies (S71), S. luridiscabiei (S63), S. puniciscabiei (S77), and S. niveiscabiei (S78) were detected by PCR and Southern hybridization analysis.
Kim, Suk-Weon;Kwon, Yong-Kook;Kim, Jong-Hyun;Liu, Jang-R.
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.1
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pp.12-24
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2010
Plant metabolomics is a research field for identifying all of the metabolites found in a certain plant cell, tissue, organ, or whole plant in a given time and conditions and for studying changes in metabolic profiling as time goes or conditions change. Metabolomics is one of the most recently developed omics for holistic approach to biology and is a kind of systems biology. Metabolomics or metabolite fingerprinting techniques usually involves collecting spectra of crude solvent extracts without purification and separation of pure compounds or not in standardized conditions. Therefore, that requires a high degree of reproducibility, which can be achieved by using a standardized method for sample preparation and data acquisition and analysis. In plant biology, metabolomics is applied for various research fields including rapid discrimination between plant species, cultivar and GM plants, metabolic evaluation of commercial food stocks and medicinal herbs, understanding various physiological, stress responses, and determination of gene functions. Recently, plant metabolomics is applied for characterization of gene function often in combination with transcriptomics by analyzing tagged mutants of the model plants of Arabidopsis and rice. The use of plant metabolomics combined by transcriptomics in functional genomics will be the challenge for the coming year. This review paper attempted to introduce current status and prospects of plant metabolomics research.
1) Optimum temperature was $15^{\circ}C$ for C. bursa-pastoris, $20^{\circ}C$ for C. album, $30^{\circ}C$ for P. oleracea, A. lividus, E. crus-galli, D. sanguinalis, and 4 showed wide range of germination temperature. 2) Emergence of C. bursa-pastoris, and C. album was best at $14.8^{\circ}C$ of soil temperature, E. crus-galli at $23^{\circ}C$, E. indica, A. lividis and P. oleracea at $27.1^{\circ}C$ and A. retroflexus and D. sanguinalis at $31.1^{\circ}C$. 3) A. retroflexus and P. oleracea started to germinate at 30% water absorption stage and A. lividus, C. album, S. viridis, and D. sanguinalis at 40% and E. indica at 70%. 4) Germination of weed species was decreased as PEG 6000 induced osmotic potential lowered. C. album, P. oleracea, D. sanguinalis, A. lividus, and Solanum nigrum were germinated at -5.0 bar osmotic potential and C. album and P. oleracea were germinated at -7.0 bar.
Kang, Jung-A;Ka, Kang-Hyeon;Kim, Jun Young;Yoon, Seong-Tak;Kim, Seong Hwan
Journal of Mushroom
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v.17
no.4
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pp.191-196
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2019
The edible ectomycorrhizal mushroom Amanita javanica is a valuable species protected by forest law in Korea. However, basic characterization data on its use as an important forest resource has been limited. This study was performed to determine mycelia growth characteristics of the domestically isolated Amanita javanica strain NIFoS 1267 on potato dextrose agar media under diverse culture conditions. Physical factors temperature, pH, and light, as well as chemical factors salts, heavy metals, and pesticides were examined for their effects on the growth of the mushroom strain. The mycelia of A. javanica strain exhibited optimal growth when cultured in dark at 30℃ in media with a pH of 5-6. Normal levels of growth were observed in media containing up to 2% saline. At a heavy metal ion content of 50 ppm, mycelial growth was not affected by arsenic ion but was affected by cadmium and lead ions. In the tests performed with two pesticides used in Korean forests, the growth of the mushroom strain was not affected by the presence of abamectin, but was inhibited in media containing acetamiprid, emamectin benzoate, or thiacloprid. These results are expected to facilitate artificial cultivation of A. javanica as a new commercial product.
The emergence of extended spectrum beta-lactamase(ESBL) producing bacteria is causing very serious problems in Korea. Although there have been many reports about these bacteria isolated from patients and clinical specimens, there is no report of ESBL-producing organisms isolated from natural evironment in Korea. This is the first study on the ESBL producing bacteria out of the medical system in Korea. Twenty-six ESBL producing bacteria were isolated only from sewerage plant drain water at Kwang-an beach among the sampling collected sites including snakehead fish plants in Myungi, Aquaculture Engineering Lab. in Pukyong National University and two public-bathrooms in Pusan, Korea. ESBL producing bacteria were identified by double-disk synergy test, conjugation, isoelectric focusing values and PCR. The species of ESBL producing bacteria were Enterobacter cloacae(4 strains), E. sakazakii(8 strains), Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae(8 strains) and K. pneumoniae subsp. ozaenae(6 strains). TEM and SHV specific PCR products were detected from all the ESBL strains produced TEM+SHV products on the PCR plates. The pI values of ESBL produced by Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, K. pneumoniae subsp. ozaenae, Enterobacter cloacae, and E. sakazakii were 5.9, 5.9+5.4; 5.9, $5.9+5.4;{\ge}8.5$, 8.0+5.4, and 8.0+5.4, respectively on the IEF. Seven strains of the isolates were transfered their genes to E. coli RG488 $Rif^r$ by conjugation.
Kim, Na-Yeong;Kim, Young-Ran;Kim, Min-Kyu;Cho, Du-Wan;Kim, Jong-Seol
Korean Journal of Microbiology
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v.43
no.3
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pp.193-200
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2007
Indoor airborne bacterial and fungal concentrations were examined at classrooms and corridors of 3 elementary schools in Ulsan. Airborne microorganisms were collected with an impaction-type air sampler using plate count agar and dichloran rose bengal chloramphenicol agar. During the semester, concentrations of bacteria ranged $168{\sim}3,887 MPN/m^3$ at classrooms and $168{\sim}6,339 MPN/m^3$ at corridors, while those of fungi ranged $34{\sim}389 MPN/m^3$ at classrooms and $91{\sim}507 MPN/m^3$ at corridors. The bacterial concentrations showed larger variations between situations and schools compared to those of fungi. When airborne bacteria were isolated and identified, 84% were observed as Gram-positive, and Micrococcus spp. was the most abundant group with 61% of tested isolates, followed by genus Staphylococcus with 10%. The Micrococcus spp. isolates, of which 75% were identified as M. luteus, appeared to be from human origins. The protective pigments and substantial cell wall of Micrococcus may provide selective advantage for their survival in the air. We also isolated and identified 15 genera of filamentous fungi. The most common culturable fungi were Cladosporium, Aspergillus and Penicillium, and these 3 genera were 69% of fungal isolates. Genus Stachybotrys, of which S. chartarum is a well known producer of many potent mycotoxins, was also detected from one of the schools. further systematic studies are necessary with an emphasis on species identification and mycotoxin production of isolated fungal genera, including Aspergillus, Penicillium, and Stachybotrys.
To isolate a gene for cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) from alkalophilic Bacillus sp. E1, polymerase chain reaction (PCR) amplification was carried out. Direct molecular cloning of 1.2 kbp fragment and partial nucleotide sequence analysis of the PCR amplified clone, pH12, showed close homology with CGTases from Bacillus species. To investigate the genomic structure of the gene, Southern blot analysis of genomic DNA was carried out with the clone pH12 as a molecular probe. It showed that 5.3 kbp XbaI fragment was hybridized with the probe pH12. To isolate a genomic clone, genomic DNA library was constructed and a genomic clone for CGTase, pCGTE1, was isolated. Nucleotide sequence analysis of the clone pCGTE1 revealed that BCGTE1 contained 2,109 bp open reading frame encoding a polypeptide of 703 amino acids and showed over 94.3% amino acid sequence homology with CGTase of ${\beta}-cyclodextrin$ producer, Bacillus sp. KC201.(Received October 7, 1997; accepted October 20, 1997)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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