본 연구는 머루 종실의 용매별 추출물을 이용하여 항산화 효과를 살펴봄으로서 머루 종실의 천연 항산화제로서의 가치를 확인하고 이용 가능성에 대한 기초자료를 제시하고자 하였다. 머루 종실의 ethanol 조추출물을 얻은 후 hexane, chloroform, ethyl acetate, butnol을 순차적으로 분획하였다. 머루 종실의 용매별 추출물의 총 페놀 화합물함량은 64.9 mg/100 g으로 ethyl acetate 추출물에서 가장 높은 함량을 보였으며, 전자공여능도 $100\;{\mu}L$/mL에서 90.0%로 대조구인 BHT 및 Ascorbic acid보다 활성이 높았으며, 농도가 증가함에 따라 전자공여능 역시 증가하는 경향을 보였다. 환원력 역시 농도가 $1,000\;{\mu}L$/mL일 때 ethyl acetate 추출물에서 2.83로 가장 뛰어난 활성을 보였다. $H_2O_2$, $FeCl_2$ 및 $CuSO_4$에 대한 항산화 활성도 머루 종실 용매별 추출물의 농도가 높 짐에 따라 유의적으로 활성이 증가하는 경향을 보였으며, ethyl acetate 추출물에서 가장 활성이 높았다. 아질산염 소거능은 pH 1.2의 반응조건에서 $1,000\;{\mu}L$/mL의 농도 첨가 시 ethyl acetate 추출물이 76.9%의 소거능을 나타내었다.
The present study investigated the antiproliferative effects of Crnum asiaticum var. japonicum against HL-60 human leukemia cells. The 80% MeOH extract or several solvent fractions from the C. asiaticum inhibited the growth of HL-60 cells, whereas the growth of HEL-299 cells, human embryonic lung fibroblast, was scarcely inhibited. When the HL-60 cells were treated with the $CHCl_3$ fraction, the BuOH fraction, the EtOAc fraction and the $H_2O$ fraction, DNA ladder, chromatin condensation and increase of sub-G1 hypodiploid cells were observed. Furthermore, the $CHCl_3$ fraction and the BuOH fraction reduced Bc1-2 mRNA level, whereas Bax mRNA level was increased. These results suggest that the inhibitory effect of C. asiaticum on the growth of the HL-60 cell might be mediated through the induction of apoptosis via the down-regulation of Bc1-2. Taken together, components of C. asiaticum might have a therapeutic potential for the treatment of human leukemia.
양식어류 질병 세균에 대한 31종의 천연물을 $70\%$ ethanol로 추출하여 항균효과를 조사하였다. 그 중에서 망태버섯 ethanol 추출물이 비교적 높은 활성을 나타내었으며, 망태버섯을 극성이 낮은 dichlorornethane, ethyl acetate, n-buthanol, water의 순서로 분획하여 항균효과를 본 결과 ethyl acetate 추출물에서 모든 균주에대한 clear zone을 형성하여 항균효과가 보였다. 또한, 망태버섯로부터의 ethyl acetate 추출물을 Si-chromatography를 이용하여 fraction별 7개로 분획하여 항균효과를 조사한 결과 Fraction 2 (Hx :EtAOc, 3: 1)에서는 L. anguillarum에 대해 가장 항균효과가 뛰어났으며, Fraction 5 (DCM:MeOH, 5: 1)에서 5. iniae가 가장 높았다. 그 중에서 세 균주에 대해서 공통적으로 항균활성이 높은 것은 Fraction 5로 나타났다.
Siegesbeckia Herba is known to have anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-allergic and anti-tumor. The objective of this study is to explore the neuroprotective effect of Siegesbeckia Herba against glutamate-induced oxidative stress in mouse hippocampal HT22 cells. Siegesbeckia Herba 70% ethanol extract and solvent fractions have the potent neroprotective effects on glutamate-induced nerotoxicity by induced the expression of heme oxygenase (HO)-1 in the mouse hippocampal HT22 cells. Especially, ethyl acetate fraction showed higher protective effect. In HT22 cell, Siegesbeckia Herba ethyl acetate fraction makes the nuclear accumulation of Nrf2. Further, we found that treatment with c-JUN N-terminal kinase (JNK) inhibitor (SP600125) reduced Siegesbeckia Herba ethyl acetate fraction induced HO-1 expression and Siegesbeckia Herba ethyl acetate fraction also increased JNK phosphorylation. In conclusion, the ethyl acetate fraction of 70% ethanol extract of Siegesbeckia Herba significantly protect glutamate-induced oxidative damage by induction of HO-1 via Nrf2 and JNK pathway in mouse hippocampal HT22. Taken together these finding suggest that Siegesbeckia Herba ethyl acetate fraction good source for taking active compounds and may be a potential therapeutic for brain disorder by targeting the oxidative stress of neuronal cell.
관중의 추출분획물별과 Bacillus subtilis에 강한 항균활성을 보였던 가자, 정향, 단삼, 관중의 추출 용매별 (ethanol과 물)로 식품 부패성 미생물인 Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Pseudomonase fluorescence에 대한 항균활성을 조사하였던 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 가자는 물추출물이, 정향, 단삼 및 관중은 ethanol 추출물이 각각 강한 항균활성을 나타내었으며, 그 중 관중의 ethanol 추출물이 가장 강한 활성을 보였고 그 활성정 도는 인공합성보존류인 안식향산나트륨 (sodium benzoate)보다 실험한 모든 미생물에 대하여 강했다. 2. 관중의 ethanol 추출물의 각분획물에 대한 항균활성은 CHCI$_3$분획물>EtOAc 분획물>BuOH 분획물>물 분획물 순이었다. 3. 관중의 각분획물은 농도 의존적으로 미생물의 성장 억제효과가 있었으며, 그 억제효과에 대한 기작은 살균작용에 의한 것이라기보다는 정균작용에 의한 것으로 사료된다.
The green microalga of the genus Nannochloropsis (class Eustigmatophyceae) is a leading candidate for biofuel production due to its ability to accumulate high oil content (28.7% of cellular ash-free dry weight). We investigated the anti-inflammatory and anticancer activities of sterol-rich fraction from nannochloropsis oculata n-hexane (NOH) extract after saponification of the microalga. Among the fractions with n-hexane, chloroform and ethyl acetate, the n-hexane fraction showed the highest anti-inflammatory activity in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophage as well as anticancer activity against human leukemia HL-60 cells without the cytotoxity. And the sterol-rich fraction was obtained from the n-hexane fraction by open silica column under the gradient solvent condition with 100% hexane (1L), hexane : ethyl acetate (20 : 1, 10 : 1, 5 : 1, 1 : 1, v/v). Among the four fractions (NOH-1~4), especially NOH-1 contained the highest content of sterols. NOH1 showed the highest HL-60 (about 85%) and NO inhibitory activities at the concentration of $100{\mu}g/mL$. These results demonstrated that the sterol-rich fraction from N. oculata might be a useful candidate as anti-inflammatory and anticancer agents for anti-inflammatory and anticancer activity.
Objectives : RVC has long been used for a useful natural agent ameliorating inflammation related symptoms in the folk medicine recipe. This study was performed to investigate effects of RVC on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Methods : The RVC was extracted with 80% ethanol and sequentially partitioned with solvents in order to increase polarity. With the various fractions, we determined the activities on the inflammation and oxidation in RAW 264.7 cells. Results : 1. Among the various solvent extracts of RVC, the butanol fraction showed the most powerful inhibitory ability against nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells without affecting cell viability. 2. Butanol fraction showed a oxidation inhibition effect by decreasing the DPPH and OH radicals. 3. Butanol fraction exhibited the inhibitory avilities against iNOS and COX-2. 4. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Westem blotting analysis revealed that the BuOH fraction provided a primary inhibitor of the iNOS protein and mRNA expression in LPS-induced RAW 264.7 cells. Among the up-regulater molecules of iNOS and COX-2, the BuOh fraction of RVC was shown the inhibitory activity of phoshporylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) 1/2 and threonine protein kinase (AKT), the one of the MAPKs pathway. Conclusion : Thus, the present study suggests that the response of a component of the BuOH fraction to NO generation via iNOS expression provide a important clue to elucidate anti-inflammatory and anti-oxidation mechanism of RVC.
췌장에서 분비되는 cholesterol esterase(CEase)와 소장의 acyl coenzyme A: cholesterol acyltransferase(ACAT)는 흡수된 콜레스테롤을 다시 ester화하는데 관여한다. 한방재료 중 건위, 진토 및 수렴지사작용 등을 가지는 초두구(Alpiniae Katusumadaii Semen)의 에탄올 추출물이 in vitro에서 cholesterol esterase활성에 대하여 강한 저해작용을 보였으며 에탄올추출물의 용매분획 중 클로로포름분획이 다른 분획들, 즉 에틸 아세테이트분획, 부탄올분획 및 물 분획보다 강하였다. 초두구의 클로로포름분획이 고 콜레스테롤식이를 섭취시킨 rat에서 혈중 콜레스테롤치를 저하시키는 효과가 있는지 측정한 실험에서 chloroform분획을 100 mg/kg 및 150 mg/kg 섭취시켰을 경우 각각 총cholesterol 함량이 11.8% 및 20.8% 감소하였으며 HDL-cholesterol 함량 및 동맥경화지수는 정상군에 가깝게 회복된 것으로 나타났다. 또한 초두구 chloroform분획의 독성검사 결과 mouse에서 $LD_{50}$은 1,625mg/kg으로 산출되었다.
본 연구에서는 in vitro에서 검색된 산초나무 잎의 용매분획의 항혈전 및 항염증작용을 in vivo에서 확인하고자 고지방식이를 섭취한 흰쥐에게 n-butanol 분획과 methylene chloride분획을 1일 50, 100, 150 mg을 4주간 경구투여 하였다. 혈장 APTT 및 TT는 정상식이군에 비해 고지방식이군에서 유의적으로 감소되었으며, 고지방식이군에 methylene chloride분획 50 mg 이상 공급군은 유의적으로 증가되어 100 mg 이상 공급군은 정상식이군 수준이었다. 다형핵 백혈구 5#-lipoxygenase 활성과 leukotriene $B_4$ 함량이 정상식이군에 비해 고지방식이군에서 증가되었으며, 5#-lipoxygenase 활성은 두 용매 분획을 100 mg 이상 공급한 군들이 모두 감소하였다. 백혈구의 leukotriene $B_4$ 함량은 n-butanol 분획에 의하여 역시 100 mg 이상 공급으로 감소하였으나 methylene chloride 분획에 의하여는 150 mg 공급군에서만 감소하였다. 간 조직 마이크로솜의 cytochrome $P_{450}$ 함량은 정상식이군에 비해 고지방식이군에서 유의적으로 증가되었으며, 두 용매분획의 투여로 감소하는 경향이었으나 butanol 분획 150mg 투여군에서만 유의적으로 감소하였다. 간 조직 $O_2^-$M의 함량과 $H_2O_2$ 함량도 정상식이군에 비해 고지방식이군에서 증가되었으며, butanol 분획 100 mg 이상투여로 $O_2^-$의 함량이 감소하고 methylene chloride분획 100 mg이상에서 $H_2O_2$ 함량이 감소하였고 두 용매 분획을 150 gm 이상 투여하였을 때는 $O_2^-$와 $H_2O_2$함량이 모두 감소하였다. 간 조직 GST 활성과 GSH 함량 및 GSG/GSSG 비율은 정상식이군에 비해 고지방식이군에서 감소되었으며, 두 용매 분획 150 mg 투여로 유의적으로 증가되었으나 GSG/GSSG 비율은 100 mg이상 투여로 증가하였다. 결론적으로, 산초나무 잎의 methylene chloride분획은 고지방식이 흰쥐에서 혈행 장애와 염증 반응을 완화시키고, 간 조직에서의 자유라디칼 생성계를 약화시킬 뿐만 아니라, glutathione계의 환원상태를 유지시킴으로서 신체를 보호하는 효과가 있으며 butanol 분획은 항혈전 효과를 제외한 항염증 및 항산화작용에 의한 신체 보호 작용은 기대된다. 이러한 활성을 이용하면 날로 증가되는 지방섭취량에 의한 만성퇴행성질환을 억제하는데 우수한 기능성식품 소재로써 활용할 수 있다고 생각된다.
This study was carried out to investigate inhibitory effect of extracts from root cortex of Paeonia suffruticosa on ${\alpha}-glucosidase$ (EC 3. 2. 1. 20) and postprandial hyperglycemia. Methanol extract and organic solvent (n-hexane, ethyl acetate, butanol, aqueous) fractions from the crude drug were determined for the inhibitory activities against maltase, sucrase and ${\alpha}-amylase$. The methanol extract from the crude drug strongly inhibited maltase (72%) and sucrase (76%) at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. Among the fractions examined, the ethyl acetate fraction from the natural plant drug showed potent inhibitory effects on maltase (85%) and sucrase (81%) at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. The ethyl acetate fraction from root cortex of Paeonia suffruticosa also exhibited significant reductions (21%) of blood glucose elevation in mice loaded with maltose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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