Ranjani, Pandurangan;Gowthami, Yaram;Gnanamanickam, Samuel S;Palani, Perumal
한국미생물·생명공학회지
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제46권4호
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pp.346-359
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2018
Xanthomonas oryzae, a bacterial pathogen causing leaf blight disease (BLB) in rice, can cause widespread disease and has caused epidemics globally, resulting in severe crop losses of 50% in Asia. The pathogen is seed-borne and is transmitted through seeds. Thus, control of BLB requires the elimination of the pathogen from seeds. Concern about environment-friendly organic production has spurred improvements in a variety of biological disease control methods, including the use of bacteriophages, against bacterial plant pathogens. The present study explored the potential of bacteriophages isolated from diseased plant leaves and soil samples in killing the bacterial pathogen in rice seeds. Eight different phages were isolated and evaluated for their bacteriolytic activity against different pathogenic X. oryzae strains. Of these, a phage designated ${\varphi}XOF4$ killed all the pathogenic X. oryzae strains and showed the broadest host range. Transmission electron microscopy of ${\varphi}XOF4$ revealed it to be a tailed phage with an icosahedral head. The virus was assigned to the family Siphoviridae, order Caudovirales. Seedlings raised from the seeds treated with $1{\times}10^8pfu/ml$ of ${\varphi}XOF4$ phage displayed reduced incidence of BLB disease and complete bacterial growth inhibition. The findings indicate the potential of the ${\varphi}XOF4$ phage as a potential biological control agent against BLB disease in rice.
Crops lack genetic resistance to most necrotrophic soil-borne pathogens and parasitic nematodes that are ubiquitous in agroecosystems worldwide. To overcome this disadvantage, plants recruit and nurture specific group of antagonistic microorganisms from the soil microbiome to defend their roots against pathogens and other pests. The best example of this microbe-based defense of roots is observed in disease-suppressive soils in which the suppressiveness is induced by continuously growing crops that are susceptible to a pathogen. Suppressive soils occur globally yet the microbial basis of most is still poorly described. Fusarium wilt, caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae is a major disease of strawberry and is naturally suppressed in Korean fields that have undergone continuous strawberry monoculture. Here we show that members of the genus Streptomyces are the specific bacterial components of the microbiome responsible for the suppressiveness that controls Fusarium wilt of strawberry. Furthermore, genome sequencing revealed that Streptomyces griseus, which produces a novel thiopetide antibiotic, is the principal species involved in the suppressiveness. Finally, chemical-genetic studies demonstrated that S. griseus antagonizes F. oxysporum by interfering with fungal cell wall synthesis. An attack by F. oxysporum initiates a defensive "cry for help" by strawberry root and the mustering of microbial defenses led by Streptomyces. These results provide a model for future studies to elucidate the basis of microbially-based defense systems and soil suppressiveness from the field to the molecular level.
Growth rates of the low temperature growing isolates, Pseudomonas fluorescens M45 and MC07, reached maximum stationary phase within 50 hrs at the low temperature, 4$^{\circ}C$. But an ordinary biocontrol agent P. putida Pf3 did not reach logarithmic growth phase until 80 hrs. The culture filtrates of M45 and MC07 significantly inhibited the mycelial growths of Pythium ultimum, Rhizoctonia solani and Phytophthora capsici. Detached cotyledons of cucumber grown on Murashige and Skoog agar medium were much enhanced in their growth, compared to those without the filtrates. Population densities of M45 and MC07 in the rhizosphere at 14$^{\circ}C$ were more stable than at 27$^{\circ}C$. When M45 and MC07 were treated into soil, the population density of MC07 continuously increased up to 9 days after treatment, and sustained the initial inoculum density up to 60 days. Cucumber damping-offs caused by P. ultimum and R. solani were significantly reduced by applying M45 as seed-inoculant and by soil treatment with MC07. The combined treatment of M45 and MC07 provided greater effect in reducing the disease incidence than that obtained by single treatments.
Kwack, Yong-Bum;Kim, Hong Lim;Kwak, Youn-Sig;Lee, Yong Bok
한국토양비료학회지
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제51권1호
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pp.28-34
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2018
Yuzu (Citrus junos) gummosis disease, caused by Phytophthora nicotianae, was first reported in 1997. As known in citrus, Phytophthora is the most fastidious soil-borne pathogen to control. In order to minimize its damage to Citrus spp., integrated pest management (IPM) approach, including fungicide chemicals and resistant cultivars, is necessary. Therefore, in this study we tried to evaluate tolerance of yuzu cultivars and its related species against yuzu Phytophthora. Trifoliate orange was evaluated as a susceptible host to yuzu Phytophthora by both mycelial growth onto extract media and immature fruit inoculation. However, in zoospores spray-inoculation on 2-year-old cuttings tree, trifoliate orange appeared to have a resistant property as showing less than 6% diseased leaf rate. Among yuzu cultivars only 'Namhae No. 1' appeared resistant property against both P. nicotianae and P. citrophthora. The 'Namhae No. 1' showed 5.7% and 10.6% diseased leaf ratio by P. nicotianae and P. citrophthora, respectively. Clearly, in order to reduce damages caused by two yuzu Phytophthora, we suggest that growers may utilize a trifoliate orange as a rootstock and 'Namhae No. 1' as a scion for fruit production.
Southern blight, caused by the soil-borne fungus Sclerotium rolfsii, is a serious disease that affects many economically important crops. In this study, we selected Bacillus subtilis GJ6-14, from a total of 260 strains, to control Southern blight in pepper plants. In both seedling and plant tests, GJ6-14 significantly suppressed disease incidence and severity compared to control, furthermore, GJ6-14 demonstrated efficient colonization in the rhizosphere by maintaining the population from log 5.41 to log 3.92 in the pathogen-inoculated plants, indicating its potential as a biocontrol agent. Molecular analysis revealed up-regulation of defense-related genes, such as a 7.6-fold increase in LOX1 and 15.5-fold increase in PR1, at 72 hr after inoculation of S. rolfsii in GJ6-14-treated plants, suggesting activation of plant defense mechanisms. Overall, our findings highlight the promising role of B. subtilis GJ6-14 as a potential biocontrol agent in sustainable management of Southern blight in pepper plants.
Fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. niveum (Fon) is the most serious soil-borne disease in the world and has become the main limiting factor of watermelon production. Reliable and quick detection and quantification of Fon are essential in the early stages of infection for control of watermelon Fusarium wilt. Traditional detection and identification tests are laborious and cannot efficiently quantify Fon isolates. In this work, a real-time polymerase chain reaction (PCR) assay has been described to accurately identify and quantify Fon in watermelon plants and soil. The FONRT-18 specific primer set which was designed based on identified specific sequence amplified a specific 172 bp band from Fon and no amplification from the other formae speciales of Fusarium oxysporum tested. The detection limits with primers were 1.26 pg/µl genomic DNA of Fon, 0.2 pg/ng total plant DNA in inoculated plant, and 50 conidia/g soil. The PCR assay could also evaluate the relationships between the disease index and Fon DNA quantity in watermelon plants and soil. The assay was further used to estimate the Fon content in soil after disinfection with CaCN2. The real-time PCR method is rapid, accurate and reliable for monitoring and quantification analysis of Fon in watermelon plants and soil. It can be applied to the study of disease diagnosis, plant-pathogen interactions, and effective management.
Ralstonia solanacearum species complex (RSSC) causes bacterial wilt, and it is one of the most important soil-borne plant pathogenic bacteria. RSSC has a large host range of more than 50 botanical families, which represent more than 200 plant species, including tomato. It is difficult to control bacterial wilt due to following reasons: the bacterial wilt pathogen can grow inside the plant tissue, and it can also survive in soil for a long period; moreover, it has a wide host range and biological diversity. In most previous studies, scientists have focused on developing biological control agents, such as antagonistic microorganisms and botanical materials. However, biocontrol attempts are not successful. Plant-derived metabolites and extracts have been promising candidates to environmentally friendly control bacterial wilt diseases. Therefore, we review the plant extracts, essential oils, and secondary metabolites that show potent in vivo antibacterial activities (in potted plants or in field) against tomato bacterial wilt, which is caused by RSSC.
Cylindrocarpon destructans is an ascomycete soil-borne pathogen that causes ginseng root rot. To identify effective biocontrol agents, we isolated several bacteria from ginseng cultivation soil and evaluated their antifungal activity. Among the isolated bacteria, one isolate (named JH7) was selected for its high antibiotic activity and was further examined for antagonism against fungal pathogens. Strain JH7 was identified as a Chromobacterium sp. using phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences. This strain was shown to produce antimicrobial molecules, including chitinases and proteases, but not cellulases. Additionally, the ability of JH7 to produce siderophore and solubilize insoluble phosphate supports its antagonistic and beneficial traits for plant growth. The JH7 strain suppressed the conidiation, conidial germination, and chlamydospore formation of C. destructans. Furthermore, the JH7 strain inhibited other plant pathogenic fungi. Thus, it provides a basis for developing a biocontrol agent for ginseng cultivation.
Background: Plant health is directly related to the change in native microbial diversity and changes in soil health have been implicated as one of the main cause of root rot. However, scarce information is present regarding allelopathic relationship of Panax notoginseng root exudates and pathogenic fungi Fusarium oxysporum in a continuous cropping system. Methods: We analyzed P. notoginseng root exudate in the planting soil for three successive years to determine phenolic acid concentration using GC-MS and HPLC followed by effect on the microbial community assembly. Antioxidant enzymes were checked in the roots to confirm possible resistance in P. notoginseng. Results: Total 29 allelochemicals in the planting soil extract was found with highest concentration (10.54 %) of p-hydroxybenzoic acid. The HPLC showing a year-by-year decrease in p-hydroxybenzoic acid content in soil of different planting years, and an increase in population of F. oxysporum. Moreover, community analysis displayed negative correlation with 2.22 mmol. L-1 of p-hydroxybenzoic acid correspond to an 18.1 % population of F. oxysporum. Furthermore, in vitro plate assay indicates that medium dose of p-hydroxybenzoic acid (2.5-5 mmol. L-1) can stimulate the growth of F. oxysporum colonies and the production of macroconidia, as well as cell wall-degrading enzymes. We found that 2-3 mmol. L-1 of p-hydroxybenzoic acid significantly increased the population of F. oxysporum. Conclusion: In conclusion, our study suggested that p-hydroxybenzoic acid have negative effect on the root system and modified the rhizosphere microbiome so that the host plant became more susceptible to root rot disease.
Cucumber fruit mottle mosaic tobamovirus (CFMMV) causes severe mosaic symptoms with yellow mottling on leaves and fruits, and occasionally severe wilting of cucumber plants. No genetic source of resistance against this virus has been identified. The genes coding for the coat protein or the putative 54-kDa replicase were cloned into binary vectors under control of the SVBV promoter. Agrobacterium-mediated transformation was peformed on cotyledon explants of a parthenocarpic cucumber cultivar with superior competence for transformation. R1 seedlings were evaluated for resistance to CFMMV infection by lack of symptom expression, back inoculation on an alternative host and ELISA. From a total of 14 replicase-containing R1 lines, 8 exhibited immunity, while only 3 resistant lines were found among a total of 9 CP-containing lines. Line 144 homozygous for the 54-kDa replicase was selected for further resistance analysis. Line 144 was immune to CFMMV infection by mechanical and graft inoculation, or by root infection following planting in CFMMV-contaminated soil. Additionally, line 144 showed delay of symptom appearance following infection by other cucurbit-infecting tobamoviruses. Infection of line 144 plants with various potyviruses and cucumber mosaic cucumovirus did not break the resistance to CFMMV. The mechanism of resistance of line 144 appears to be RNA-mediated, however the means is apparently different from the gene silencing phenomenon. Homozygote line 144 cucumber as rootstock demonstrated for the first time protection of a non-transformed scion from soil inoculation with a soil borne pathogen, CFMMV.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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