Purpose: The aim of this study was to observe a direct effect of irradiation on the periodontopathic Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis). Materials and Methods: P. gingivalis 2561 was exposed to irradiation with a single absorbed dose of 10, 20, 30, and 40Gy. Changes in viability and antibiotic sensitivity, morphology, transcription, and protein profile of the bacterium after irradiation were examined by pour plating method, disc diffusion method, transmission electron microscopy, RT-PCR, and immunoblot, respectively. Results: Viability of irradiated P. gingivalis drastically reduced as irradiation dose was increased. Irradiated P. gingivalis was found to have become more sensitive to antibiotics as radiation dose was increased. With observation under the transmission electron microscope, the number of morphologically abnormal cells was increased with increasing of irradiation dose. In RT-PCR, decrease in the expression of fimA and sod was observed in irradiated P. gingivalis. In immunoblot, change of profile in irradiated P. gingivalis was found in a number of proteins including 43-kDa fimbrillin. Conclusion: These results suggest that irradiation may affect the cell integrity of P. gingivalis, which is manifested by the change in cell morphology and antibiotic sensitivity, affecting viability of the bacterium.
Connexin (Cx) involves in the regulation of various physiological functions of tissue by forming a channel, a gap junction which allows direct cell-cell communication, between adjacent cells. The effect of a single subcutaneous treatment of estradiol benzoate (EB) or flutamide (Flu) at the weaning age on the expression of Cx isoforms in the adult caput epididymis was evaluated in this research. Using quantitative real-time PCR analysis, a low-dose of EB [$0.015{\mu}g/kg$ body weight (BW)] caused significant decreases of Cx30.3, Cx32, Cx40, Cx43, and Cx45 mRNA levels and no change of Cx26, Cx31, Cx31.1, Cx37 transcript levels. The treatment of a high-dose EB ($1.5{\mu}g/kg\;BW$) resulted in reduced expression of Cx30.3, Cx31, Cx43, and Cx45 but increased expression of Cx37 and Cx40. Expression of all Cx isoforms examined, except Cx31, was significantly increased by the treatment of a low-dose Flu ($500{\mu}g/kg\;BW$). However, the treatment of a high-dose Flu (5 mg/kg BW) led significant expressional suppression of Cx30.3, Cx31, Cx31.1, Cx32, Cx40, Cx43, and Cx45 but an increase of Cx37 transcript level. With the comparison of previous findings, the expression of Cx isoforms in the adult epididymis after the exposure to EB or Flu is likely differentially regulated in regional-specific and/or exposed postnatal age-specific manner.
In plant, Receptor-like kinases (RLKs) are protein family, though its function is not yet understood, consisted of a predicted signal sequence, single transmembrane region, and cytoplasmic kinase domain. RLKs are involved in hormonal response pathways, cell differentiation, plant growth and development, self-incompatibility, and symbiont and pathogen recognition. In this study, expression levels of RLG1, RLG5, RLG6, RLG#6, RLG8, RLG10, RLG17, RLG18 and RLG20 were analyzed by Real-time PCR, when rice (Oryzae sativa) was treated abiotic stress. The expression levels of all RLGs were compared each other by analyzed value of threshold cycles ($C_T$). Consequently, RLGs were suppressed by NaCl as salinity stress, and expression of each RLK genes were showed difference treated salicylic acid and wound, respectively. However, All RLGs were induced under low temperature condition. Therefore, our results indicate protection-function of RLK genes to be an early response of rice against cold weather.
Kim Se-Heon;Choi Eun-Chang;Kim Han-Su;Chang Jung-Hyun;Kim Ji-Hoon;Kim Kwang-Moon
Korean Journal of Head & Neck Oncology
/
v.19
no.1
/
pp.25-33
/
2003
Background and Objectives: The Herpes Simplex type 2 Defective Infectious Single Cycle virus (DISC virus) is attenuated virus originally produced as viral vaccines but are also efficient gene transfer vehicle. The main goals of this study were to examine the efficiencies of the gene transfer using DISC vectors for various head and neck squamous cell carcinoma cell lines and to evaluate the efficacy of vaccination with DISC virus carrying a immunomodulatory genes (GM-CSF) as cancer therapy in a organotopic oral cavity squamous cell cancer model. Materials and Methods : We determinated the gene transfer efficiency of DISC virus by x-gal stain method and proved gene and protein expression of DISC-GMCSF transfected SCCVII cells by RT-PCR and ELISA method. Also we evaluated the ex vivo vaccination effects of SCCVII/GMCSF (DISC-GMCSF transfected SCCVII vaccine) vaccine on preventing the recurrence of micro-residual tumor. After the vaccination of SCCVII/GMCSF, specific cytotoxic T-cell responses was evaluated by CTL assay. Results: At an MOI of 10 DISC virus showed 64-88% of transfection rates in various head and neck squamous cancer cell lines. SCCVII cells transduced by DISC virus vector (MOI=10) carrying the GM-CSF gene, produced 4.5 nanogram quantities of GM-CSF per $10^6$ cells. In vivo vaccination using tumor cells transduced ex vivo with DISC-GMCSF resulted in better protection rate against subsequent tumor recurrence in organotopic oral cavity cancer model. Although tumor free survival rate was not statistically significantly increased in vaccination group (p=0.078), tumor specific cytotocic T-cell responses were significantly increased in SCCVII/GMCSF vaccination group. Conclusion: These data demonstrate that; 1) The DISC virus vector is capable of efficient gene transfer to various head and neck squamous cancer cell lines, 2) GM-CSF secreting genetically modified tumor vaccine (SCCVII/GMCSF) efficiently protected against tumor recurrence in organotopic micro-residual oral cavity cancer model and produced tumor specific cytotoxic T-cell response. DISC virus-mediated, cytokine gene transfer may prove to be useful as a clinical therapy for head and neck cancers.
Background: Recent epidemiological data have implicated human papilloma virus (HPV) infection in the pathogenesis of head and neck cancers, especially oropharyngeal cancers. Although, HPV has been detected in varied amounts in persons with oral dysplasia, leukoplakias and malignancies, its involvement in oral tongue carcinogenesis remains ambiguous. Materials and Methods: HPV DNA prevalence was assessed by PCR with formalin fixed paraffin embedded sections (n=167) of oral tongue squamous cell carcinoma patients and the physical status of the HPV16 DNA was assessed by qPCR. Immunohistochemistry was conducted for p16 evaluation. Results: We found the HPV prevalence in tongue cancers to be 51.2%, HPV 16 being present in 85.2% of the positive cases. A notable finding was a very poor concordance between HPV 16 DNA and p16 IHC findings (kappa<0.2). Further molecular classification of patients based on HPV16 DNA prevalence and p16 overexpression showed that patients with tumours showing p16 overexpression had increased hazard of death (HR=2.395; p=0.005) and disease recurrence (HR=2.581; p=0.002) irrespective of their HPV 16 DNA status. Conclusions: Our study has brought out several key facets which can potentially redefine our understanding of tongue cancer tumorigenesis. It has emphatically shown p16 overexpression to be a single important prognostic variable in defining a high risk group and depicting a poorer prognosis, thus highlighting the need for its routine assessment in tongue cancers. Another significant finding was a very poor concordance between p16 expression and HPV infection suggesting that p16 expression should possibly not be used as a surrogate marker for HPV infection in tongue cancers. Interestingly, the prognostic significance of p16 overexpression is different from that reported in oropharyngeal cancers. The mechanism of HPV independent p16 over expression in oral tongue cancers is possibly a distinct entity and needs to be further studied.
R-type($Ca_v2.3$) calcium channel contributes to pain sensation in peripheral sensory neurons. Six isoforms of $Ca_v2.3$ that result from combinations of presence or deletion of three inserts(insert I and insert in the II-III loop, and insert III in N-terminal regions) have been demonstrated to be present in different mammalian tissues. However, the molecular basis of $Ca_v2.3$ in trigeminal ganglion(TG) neurons is not known. In the present study, we determined which isoforms of $Ca_v2.3$ are expressed in rat TG neurons using the RT-PCR analysis. Whole tissue RT-PCR analyses revealed that only two isoforms, $Ca_v2.3a$ and $Ca_v2.3e$, were present in TG neurons. From single-cell RT-PCR, we found that $Ca_v2.3e$ rather than $Ca_v2.3a$ was the major isoform expressed in TG neurons, and $Ca_v2.3e$ was preferentially detected in small-sized neurons that express nociceptive marker, transient receptor potential vanilloid 1(TRPV1). Our results suggest that $Ca_v2.3e$ in trigeminal neurons may be a potential target for the pain treatment.
KIM EUN;POO HAR-YOUNG;SUNG MOON-HEE;KIM CHUL-JOONG
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.15
no.6
/
pp.1229-1239
/
2005
Human immunodeficiency virus-like particles (HIVVLPs) with native conformations similar to that of the wild-type virion could be valid candidates for vaccine development. To this end, we used a Semliki Forest Virus (SFV) expression system to produce HIV- VLPs containing high quantities of native envelope proteins. Here, we described a single SFV replicon containing the HIV gagpol and env genes under the control of separate subgenomic promoters. Mature VLPs incorporating the Gag and Env proteins were detected in the supernatant of replicon-expressing cells by Western blot analysis. The HIV-VLPs showed the expected molecular density (1.14-1.18 g/ml) on a $20-60\%$ sucrose gradient; the particles were 100-120 nm in diameter and Env proteins were observed on their surfaces by immunogold electron microscopy. RT-PCR analysis of VLP-associated RNAs in mature HIV-VLPs revealed two SF V-derived RNA species (full-length and subgenomic). Immunization studies in Balb/c mice showed that these HIV-VLPs were capable of inducing both HIV-specific antibodies and cell-mediated immune responses. Taken together, our results indicate that the SFV replicon system is useful for the production of HIV-VLPs, which may be valuable candidates for an HIV vaccine.
The single-stranded large circular (LC)-sense DNA were utilized as probes for DNA chip experiments. The microarray experiment using LC-sense DNA probes found differentially expressed genes in A549 cells as compared to WI38VA13 cells, and microarray data were well-correlated with data acquired from quantitative real-time RT-PCR. A 5K LC-sense DNA microarray was prepared, and the repeated experiments and dye swap test showed consistent expression patterns. Subsequent functional analysis using LC-antisense library of overexpressed genes identified several genes involved in A549 cell growth. These experiments demonstrated proper feature of LC-sense molecules as probe DNA for microarray and the potential utility of the combination of LC-sense microarray and antisense libraries for an effective functional validation of genes.
Exogeneous DNA can reproducibly be delivered by co-injected spermatozoa and this transgenesis method is very efficient protocol. But, mosaic patterns of transgenic embryos and offspring were shown frequently. Whole blastomere integration is important in transgenic animal economics. (omitted)
The RAD3 gene of Saccharomyces cerevisiae is required for excision repair and is essential for cell viability. RAD3 encoded protein possesses a single stranded DNA-dependent ATPase and DNA-RNA helicase activies. To examine the extent of conservation of structure and function of RAD3 during eukaryotic evolution, we have cloned the RAD3 homolog, HRD3, from the distantly related yeast Schizosaccharomyces pombe. Here, we report the partial cloning and characterization of HRD3 gene (Homologous of RAD3 gene) which was isolated by PCR amplification using conserved domain of Saccharomyces cerevisiae RAD3 gene. Chromosomal DNA isolated from S. pombe had similar restriction patterns to those from S. cerevisiae, as determined by Southern blot analysis. The 2. 8 kb transcript of mRNA was identified by Northern hybridization. The level of transcript did not increase upon UV-irradiation, suggesting that the HRD3 gene in S. pombe is not UV-inducible.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.