To distinguish reactive mesothelial cells from malignant cells in body fluid, we applied silver staining of nucleolar organizer regions(AgNORs) to ethanol fixed cytologic preparations. Fifty aspirated samples of benign(22 cases) and malignant(26 cases) body fluids were studied using the one step silver staining method. Two cytologically atypical samples were also included in the study. In malignant cases the mean AgNOR count was $3.56{\pm}0.81$, while in benign cases the mean AgNOR count was $2.02{\pm}0.33$. The difference of AgNOR counts between these two groups were statistically significant(p<0.001). The mean of atypical cases was 2.91. Both were diagnosed as malignant in follow-up cytology. In malignant effusions, there is statistically significant difference in AgNOR counts between cells forming complex papillae or clusters and singly scattered cells(p<0.05), $3.29{\pm}0.95\;and\;3.83{\pm}0.55$, respectively. We concluded that AgNOR count appears to be useful as a diagnostic tool especially when the cytologic differentiation is difficult.
Objective : Kainic acid[KA] enhances the expression of nitric oxide synthase, increases nitric oxide[NO], and thus evokes epileptic convulsion, which results in neuronal damage in the rat brain. NO may stimulate cyclooxygenase type-2 [COX-2] activity, thus producing seizure and neuronal injury, but it has also been reported that KA-induced seizure and neurodegeneration are aggravated on decreasing the COX-2 level. This study was undertaken to investigate whether the suppression of NO using the NOS inhibitor, N-nitro-L-arginine methyl ester[L-NAME], suppresses or enhances the activity of COX-2. Methods : Silver impregnation and COX-2 immunohistochemical staining were used to localize related pathophysiological processes in the rat forebrain following KA-induced epileptic convulsion and L-NAME pretreatment. Post-injection survival of the rat was 1, 2, 3days and 2months, respectively. Results : After the systemic administration of KA in rats, neurodegeneration increased with time in the cornu ammonis [CA] 3, CA 1 and amygdala, as confirmed by silver impregnation. On pretreating L-NAME, KA-induced neuronal degeneration decreased. COX-2 enzyme activities increased after KA injection in the dentate gyrus, CA 3, CA 1, amygdala and pyriform cortex, as determined by COX-2 staining. L-NAME pretreatment prior to KA-injection, caused COX-2 activities to increase compared with KA- injection only group by 1day and 2days survival time point. Conclusion : These results suggest that L-NAME has a neuroprotective effect on KA-induced neuronal damage, especially during the early stage of neurodegeneration.
Fowl red mite, Dermanyssus gallinae, is the most important ectoparasite affecting egg layers worldwide. More than 35 compounds have been used for fowl red mite control. Although some of them are efficient, several compounds are unsuitable in terms of food safety and environmental problems. Some compounds are efficient in theory but inadequate in practice. It is also expensive in material and labor to control effectively. Effective doses are very close to toxic doses and repeated treatment is required. Repeated, long term treatment of compounds on fowl red mite populations, may cause heritable resistance against the mites. In this study, antigenicity of fowl red mite and house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus, were identified by SDS-PAGE, silver staining, Western blotting and ELISA to investigate immune effects against fowl red mite using somatic antigens of fowl red mite and house dust mite. By SDS-PAGE, silver staining and Western blotting, several common antigens (110, 60, 56, 49, 46 kDa) of both fowl red mite and house dust mite were recognized. To identify immune effect of somatic antigens of fowl red mite and house dust mite, sixty white leghorn broilers(1 week old) were used. Among sixty white leghorn broilers, twenty were immunized with fowl red mite somatic antigens(Group I), twenty immunized with house dust mite antigens(Group II), and twenty were control group without antigen(Group III), respectively. After immunization, it was identified that antibody titers were increased both in group and II. Then all groups were challenged with fowl red mites. After 2 months, measurements of body weights, packed cell volume(PCV), ELISA OD values and numbers of mites were significant(p<0.05). These results suggest that fowl red mite and house dust mite, which are easy to collect and maintain, can be good vaccine candidates against fowl red mite in chicken.
본 연구는 식중독 원인 세균인 Salmonella enteritidis JK-15를 장미추출물에 노출시켜 나타나는 살균효과를 조사하기 위하여 실시하였다. 분리세균인 S. enteritidis JK-15는 장시간 노출된 음식으로부터 농화, 분리되었다. 16S rRNA PCR을 수행하여 S. enteritidis JK-15의 유전학적 계통수를 작성하였다. BIOLOG 분석 시스템과 16S rRNA 염기서열 분석을 통하여 S. enteritidis 종(species)과 98% 유사성을 가졌으며, 이 균주를 S. enteritidis JK-15로 명명 하였다. 5~100 mg/ml 범위의 장미추출물에 노출된 S. enteritidis JK-15의 살균효과를 조사하였고, 100 mg/ml의 장미추출물에서 6시간, 그리고 50 mg/ml에서 12시간 이내에 완전히 살균되었다. 지수생장기의 S. enteritidis JK-15 균주는 노출된 장미추출물의 농도와 시간에 따라 lipopolysaccharide의 양이 변화하는 것을 SDS-PAGE와 silver staining을 통하여 관찰하였다. 또한, 주사전자현미경을 이용하여 장미추출물에 노출시킨 세균의 외부 형태를 분석한 결과, 움푹 패이고 불규칙적인 간균 형태로 관찰되었다.
The purpose of this study was to evaluate the effect of orthodontic force on periodontal cellular activity by immunoperoxidase stain of epidermal growth factor, one of the tissue hormone. And supplementarily, to investigate of the changes of periodontal structures, periodontium was stained by H-E, Masson's Trichrome, P. A. S. stain after orthodontic force application. The experimental animals were four young adult dogs of average 8 month old. The fixed orthodontic appliance was cemented on mandibular right 4th premolar and 1st molar of each animal as experimental site. Mandibular left 4th premolar area of the same animal was used as control. The appliance consist of two silver crown soldered with 0.030' tube, $0.018\times0.022'$ S.S. sectional arch wire, and 0.009' open coil spring for manifestating of orthodontic force for bodily tooth movement of mandibular 4th premolar toward mesial direction. Experimental group was sacrificed at 1, 2, 3, 5 weeks from beginning of the experiment, and was investigated immunohistochemically and bistochemically by several staining methods. Findings were as follows: 1. The degree of EGF staining in control group was highest in epithelium of periodontium, and osteoclasts, osteoblasts and fibroblasts around the capillary were stained at higher level in periodontium. Generally, control group shows positive distribution of EGF all around the periodontal area. 2. The degree of EGF staining in control and 5 week group were similar, and did not show the significant different level between tension and pressure side. 3. All of 1, 2, 3 week group showed the same staining degree and distribution of EGF, and the tension side was more positive reaction of EGF stain than the pressure side. 4. The features of collagen fiber and periodontal fiber arrangement observed by H-E, Masson's Trichrome and P. A. S. stain revealed that oblique periodontal fibers were strectched in tension side, compressed in pressure side of all experimental group. Some fiber group in pressure side of 5 week group recovered the regular arrangement along the capillaries.
A novel approach to synthesize silver nanoparticles (AgNPs) using leaf extract of Canna edulis Ker-Gawl. (CELE) under ambient conditions is reported here. The as-prepared AgNPs were analyzed by UV-visible spectroscopy, transmission emission microscopy, X-ray diffraction, Fourier transform-infrared spectroscopy, energy-dispersive analysis of X-ray spectroscopy, zeta potential, and dynamic light scattering. The AgNPs showed excellent antimicrobial activity against various pathogens, including bacteria and various fungi. The biocompatibility of the AgNPs was analyzed in the L929 cell line using NRU and MTT assays. Acridine orange/ethidium bromide staining was used to determine whether the AgNPs had necrotic or apoptotic effects on L929 cells. The concentration of AgNPs required for 50% inhibition of growth of mammalian cells is far more than that required for inhibition of pathogenic microorganisms. Thus, CELE is a candidate for the eco-friendly, clean, cost-effective, and nontoxic synthesis of AgNPs.
The author studied on the effects of X-ray irradiation to the development of periodontal ligament in gestation rats. They were irradiated in their abdomen with 100, 200 and 300 rads respectively in one shot irradiation with deep radiation therapy equipment (MAXIMAR 250-Ⅲ), In 7th, 14th, 21th and 28th day after delivery, those new born rats were respectively sacrificed with ether anesthesia and removed of their mandibles. After removal, those mandibles were fixed in 10% neutral buffer formalin, decalcified with 5% trichloroacetic acid for 5 days and embedded with paraffine. Staining was performed with H-E, Van Gieson, Mallory azan, Bielshowsky-Gomori silver stain and Halmi's oxytalan fiber stain. The results were as follows: 1. Before tooth eruption, all the fiber: components in dental sac were almost always oriented near the outer enamel epithelial \layer. But in irradiated new born rats, those collagen fiber orientation was more irregular than those of control groups, and this phenomenon was more severe in proportion to the amount of irradiation in the gestation period. 2. Before tooth eruption, the connective tissue fibers in periodontal ligament were stained with lighter in the irradiated groups than those of control groups. Oxytalan fibers of irradiated groups were thin and splitting pattern of their fiber morphology to compare with those of control groups. 3. After tooth eruption, the periodontal ligament fibers of irradiated groups were oriented functionally and their morphology was thick, fine and heavy staining. Oxytalan fibers were revealed with oblique parallel arrangement in the periodontal ligament of irradiated groups.
Inhibitory effect of caffeine on NIH3T3 cell proliferation was studied by using [$^3H$]thymidine incorporation and a modified one-step silver staining technique. The latter technique shows argyrophilic nucleolar organizer region-associated proteins (Ag-NORs), which are seen in nuclei as black dots. The result was compared with the counts of [$^3H$] thymidine incorporation. The results were summarized as follows; 1. The Ag-NORs numbers of NIH3T3 cells were $6.81{\pm}1.38$ at 24 hrs, $7.13{\pm}1.26$ at 48 hrs, $8.50{\pm}2.04$ at 72 hrs after incubation. 2. The numbers of Ag-NORs were significantly decrease in caffeine treated groups (p<0.01). 3. The counts of [$^3H$] thymidine incorporation were similar to the result of using Ag-NORs staining technique. It is concluded that Ag-NOR is a rapid, simple and compatible method to quantitate cell proliferation as compared with [$^3H$]thymidine incorporation.
Helicobacter suis is a gram negative bacterium and colonizes in porcine stomach. It causes gastric diseases in the stomach and plays a significant role in daily weight gains in pigs. Recent studies about one of potential sources of human gastric diseases. Therefore, this study was conducted to compare histopathological lesions and molecular detection of Helicobacter suis in the pyloric mucosa of porcine stomachs transferred from slaughterhouses, based on gross and histological examinations and a PCR assay. A total 90 stomach samples were investigated to record gastric lesion scores by characteristic gastric lesions, followed by routine H & E and Warthin-Starry silver staining to detect Helicobacter-like organisms. For PCR assay, H. suis specific primers and conditions are used. Sixty-one samples (67.8%) showed gross gastric lesions, of which 38 samples (40.2%) presented grade 1, 12 samples (13.3%) presented grade 2, and 11 samples (12.2%) presented grade 3, respectively. In Warthin-Starry silver stain, Helicobacter-like organisms were detected from 11 samples (12.2%) with 4 samples (4.4%) for grade 0, 5 samples (5.6%) for grade 1, 1 sample (1.1%) for grade 2 and 1 sample (1.1%) for grade 3, respectively. The PCR resulted positive in 37 samples (41.1%) with 14 samples (15.6%) for grade 0, 14 samples (15.6%) for grade 1, 3 samples (3.3%) for grade 2 and 6 samples (6.7%) for grade 3, respectively. Positive samples for both examinations were 5 samples (5.6%). The result suggested that it should be considered as one of factors causing a gastric disease in pigs. Also, it could be acknowledged to research fundamental aspects of Helicobacter-induced gastritis in human as an animal model.
주폐포자충 폐렴은 면역 기능이 억제된 환자군에서 발병률이 높은 감염성 질환으로 특히, 후천성 면역 결핍증이나 백혈병 등의 혈액 종양 환자군, 심한 영양 결핍 환자군, 장기 이식 환자군, 고용량의 부신 피질 호르몬 사용 환자군 등이 고위험군으로 알려져 있으며, 일차성 면역 결핍증에 이환된 환아에서 주폐포자충 폐렴의 증례가 보고되어 있다. 저자들은 상기 위험군에는 속하지 않으나, 10여일 정도의 수유부진 후 빈호흡을 보인 영아에서 흉부 방사선 소견상, 폐양측에 간질성 침윤이 관찰되었고 기관지내 삽관으로 흡인한 객담의 Gomori-methenamine silver 염색 검사상 주폐포자충이 검출되어 주폐포자충 폐렴으로 확진 후 TMP-SMX 14일 투여로 호전을 보인 예를 경험하여 보고하는 바이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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