Kavitha, M.;Kalaimagal, I.;Mercy, S.;Sangeetha, N.;Ganesh, D.
Journal of Forest and Environmental Science
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제25권2호
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pp.111-118
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2009
Multiple shoot induction and plant regeneration using apical bud and nodal explants of 100 year old tree of Anthocephalus cadamba, an important sacred and medicinal tree in India was achieved for the first time. Aseptic explants cultured in Murashige and Skoog (MS) medium augmented with different concentrations of BAP (0.1, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0 and 10 mg/l), when maintained for 60 days, healthy shoots were induced in presence of BAP (1 mg/l). Lower concentrations of BAP (0.1 - 0.5 mg/l) induced only one shoot per explant. Increase in number of shoots per explant was observed in presence of higher concentrations of BAP (2.5, 5.0 and 10 mg/l). However, elongation of shoots was completely inhibited. Bud break and shoot regeneration was largely associated with seasonal factors. Apical buds cultured during June to August exhibited early bud break within two weeks of initial culture. In rest of the months, bud break and shoot regeneration was very slow irrespective of the various concentrations of BAP used in the medium. Explants sourced from three different maturity levels of shoots indicated that actively growing shoots from the mother plant with 1 - 2 nodal segments was more suitable for culture initiation than the explants collected from mature shoots at dormant stage. Regenerated shoots with 2 - 3 pairs of leaves when transferred to half strength MS medium fortified with IBA (1 mg/l), 60% of the shoots induced healthy roots, indicating the possibility of large scale micropropagation.
An efficient regeneration system was developed using leaf, petiole, and internode explants. Highly embryogenic callus was obtained following cultivation on MS basal nutrient supplemented with 2 $mg/{\ell}$ 2,4-D. Globular, heart, torpedo and cotyledon shaped somatic embryo were produced from the surface of embryogenic callus. Direct shoot regeneration without intermediate callus formation has been achieved on MS medium supplemented NAA and BAP. The percentage of response varies with different concentration of auxin and cytokinin treated individually or in combination. The best shoot regeneration response (54.28%) and number of shoot per explant (12.67) were achieved on the medium supplemented with 0.1 $mg/{\ell}$ NAA and 1 $mg/{\ell}$ BAP. The regenerated shoot transformed into young plant when cultured into elongation and root induction medium. More than 90% of in vitro propagated plants could survive when transferred to the greenhouse for acclimation. This optimized regeneration system can be used for rapid shoot proliferation and genetic transformation.
본 연구는 감귤 품종인 '삼보감'과 '병귤'에서 3종류의 싸이토키닌(BA, 2iP, kinetin)과 그들의 농도(0, 0.1, 0.5, 1.0, 2.0mg/L)가 마디배양에 의한 대량 증식에 미치는 영향을 구명하고자 수행되었다. 마디의 절편체는 기내 발아된 두 품종의 유묘에서 얻어졌다. 두 품종을 비교하면 신초의 수는 '병귤'에서보다 '삼보감'에서 더 많이 형성되었다. 본 실험에서 사용된 3종류의 싸이토키닌 중에 고체 MS 기본배지에 첨가된 BA가 신초의 대량 생산에 가장 효과적인 촉진제였으며 그 적정농도는 1.0 mg/L인 것으로 나타났다. 줄기의 신장 뿌리의 형성은 싸이토키닌의 종른에 관계없이 싸이토 키닌의 농도가 증가함에 따라 억제되었다. 삼보감'에서는BA 1.0 mg/L에서 가장 탄은 신초 및 엽수를 형성한 반면 '병귤에서는 어떠한 싸이토키닌의 종류나 농도도 본 실험에서 신초 및 뿌리 등의 형성에 커다란 영향이 없었다.
본 연구는 티크의 기내 생장 및 발근에 미치는 light-emitting diode (LED) 효과를 구명하기 위해 수행되었다. 티크의 정아 절편체의 줄기 신장은 LED 혼합광(BR, 50% 청색광 + 50% 적색광) 하에서 DKW 배지 배양 시 3.2 cm로 가장 좋았고, 줄기유도는 광원 및 배지(MS 및 DKW) 효과가 그리 크지 않은 것으로 나타났다. BA 농도 처리 시 최대 줄기 유도는 BR 광원 및 1.0 mg/L 처리구에서 2.4개, 최대 줄기 신장은 BR 및 0.5 mg/L 처리구에서 4.94 cm로 가장 효과적이었다. 발근에 영향하는 IBA 농도 효과는 정아 절편체를 BR 및 0.5 mg/L 처리구에서 배양 시 최대 발근율(93.8%)과 최대 뿌리 길이 신장(1.3 cm)을 보였고, 뿌리 수는 0.2 mg/L (3.1개/절편) 처리구에서 가장 좋은 것으로 나타났다. 발근 식물체는 상토로 이식 후 순화 과정을 거쳐 정상적은 생장을 보였다.
Rosa rugosa is a medicinal, ornamental, and edible plant native to Eastern Asian countries, including Korea, Japan, and China. The aim of this study was to establish a system for biomass production and secondary metabolite accumulation during in vitro culture and acclimatization of Rosa rugosa. The highest rate of multiple shoot proliferation was achieved with $8.8{\mu}M$ benzyladenine (BA) (83.3%). However, the number of shoots (14.4 per explant) at $4.4{\mu}M$ BA was higher than that at $8.8{\mu}M$ BA. Compared to BA, a combination of thidiazuron (TDZ) and indole butyric acid (IBA) exhibited significantly lower shoot induction, with only 50.0~79.2% and 4.2~16.7% relative shoot formation, respectively. During acclimatization, shoots were sampled every week and their total phenolic contents were analyzed. Among various growth factors, fresh weight showed the most dramatic increase from the 3rd week (88.0 mg/plant) to 4th week (132.7 mg/plant). Total phenolics and flavonoids contents were the highest at $1^{st}$ week of acclimatization. Depending on developmental stages, total phenolics and flavonoids contents were higher in 1-yr-old shoots grown ex vitro than in those of older field-grown or in vitro-grown plants. Amongst different ages of field grown plants, 6-year-old plants, the oldest in this study, showed the lowest content in total phenolics.
미니토마토, Micro-Tom (Lycopersicon esculentum cv. Micro-Tom)의 줄기 절편 배양으로부터 신초 기관발생을 통한 식물체 재분화 시스템을 확립하였다. 다른 농도의 BAP가 처리된 MS 고체 배지에서 신초 발생을 유도하였다. 신초 발생을 유도하기 위하여 cytokinin 종류와 농도별 처리에서는 4mg/L BAP 처리가 Micro-Tom 신초 기관분화를 위한 최적농도로 나타났으며, 줄기절편 당 평균 5.3개의 신초를 형성했고 0.7 cm 길이 신장을 보였다. 4 mg/L BAP이 처리된 MS 고체배지에 질산은 (7 mg/L)과 putrescine (50 mg/L) 처리로 신초기관발생을 향상시킬 수 있었다. 신초가 약 1 cm 길이로 생장하였을 때 기부를 절단하여 0.1 mg/L IBA이 처리된 MS 고형배치에 배양하여 뿌리를 유도하였으며, 발근된 식물체를 vermiculite에 옮겨 순화시킨 결과 92%의 생존율을 보였다.
Kim, Tae-Dong;Kim, Nam-Ho;Park, Eung-Jun;Lee, Na-Nyum
Journal of Plant Biotechnology
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제48권1호
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pp.54-61
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2021
This work describe an efficient method for the shoot induction and plant regeneration of seedling-derived apical bud explants of Tilia mandshurica Rupr. & Maxim. The highest rate of shoot induction (82.2%) was obtained when apical bud explants from juvenile seedlings (5 months old) were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP). However, apical bud explants obtained from mature trees (12 years old) did not produce any shoots, even with BAP supplementation. Among the three cytokinins tested for shoot multiplication (BAP, zeatin, and kinetin), BAP was the most effective; the highest number of shoots per explant (2.1) was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP. In contrast, the longest average shoot length (3.0 cm) was observed after growth on MS medium with 2.0 mg/L zeatin. No multiplication occurred when apical bud explants were cultured with kinetin-supplemented media. During rooting of in vitro-elongated shoots, the highest rooting rate (100%) was observed in half-strength MS medium supplemented with 0.5 ~ 1.0 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) or 3.0 mg/L 1-naphthaleneacetic acid (NAA). During the acclimatization process, plantlets that were rooted on the IBA (0.5 mg/L)-supplemented medium had the highest survival rate (100%) and maximum root length (18.5 cm). These findings suggest that a low concentration (0.5 mg/L) of IBA is appropriate for the rooting and acclimatization of T. mandshurica. Plants were successfully transferred to the greenhouse with a 100% survival rate. This protocol will be useful for the large-scale propagation of Tilia species.
본 연구는 국내에서 소비되는 약용작물 중 경제적 가치는 높으나 국내 생산량이 적고 수입 의존도가 높은 Atractylodes의 식물 조직 배양 시스템을 구축하기 위해 수행되었다. 삽주는 A. ovata를 사용하였고, 4가지 cytokinins류, 6-benzylaminopurine (BA), zeatin, kinetin, thidiazuron (TDZ)을 2가지 농도(0.5, 1.0 mg/L)로 처리하였다. 4가지 유형의 cytokinin 중 BA처리는 A. ovata의 신초유도와 뿌리 생육에 효과적이었다. 0.5 mg/L 및 1.0 mg/L BA 모두 BA 처리에서 유사한 결과를 나타내었지만 1.0 mg/L BA가 신초와 뿌리 생육을 촉진하는데 더 효과적이었다. 처리 중 신초의 개수와 뿌리의 생중량(FW)을 제외하고는 TDZ 처리가 신초와 뿌리생육에 효과적이지 않아 본 수종에서는 적합하지 않았다. 본 연구에서는 A. ovata의 아배양을 이용한 기내증식 시스템을 구축하였다. 위 결과는 기내 재분화를 이용한 산림약용자원 A. ovata의 안정적인 생산 및 증식을 위한 기반 기술로 사용될 것으로 사료된다.
Cryopreservation has been broadly used as an efficient method for a long-term conservation for many types of plants especially vegetatively propagated plants. Among several cryopreservation methods, a droplet-vitrification was the most widely applicable and efficient method. Studies have developed protocols for strawberry using droplet-vitrification method and suggested the practical use of the protocol for large number of germplasm with a little modification. In this study, the droplet vitrification method of shoot tip has been tested on 31 accessions provided around the world. Shoot tips were precultured on Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with 0.3~0.5M sucrose. Precultured explants were osmoprotected with loading solution, 35% of PVS3 (C4, 17.5% glycerol and 17.5% sucrose) for 40 min and exposed to dehydration solution, PVS3 (B1, 50% glycerol and 50% sucrose) for 60 min. Then, the explants were transferred onto droplets containing 2.5 uL PVS3 on sterilized aluminum foils prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1hr. The cryopreserved shoot tips were rapidly warmed in a water bath at 40C and then unloaded in MS with 0.8M sucrose for 40 min. The shoot tips were cultured in NH4NO3-free MS post culture medium for 2 weeks. Subsequently, the explants were moved to the MS medium for 6 weeks and evaluated the regrowth rate. By this droplet-vitrification protocol, twenty-four accessions showed at least 40% regrowth rate. Out of 24 accessions, 'Nonsan1ho' had the highest regeneration rate of 85.8% and 'Jumbo pureberry' had the lowest with 42.1%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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