본 실험은 무궁화 '홍화랑' 품종의 기내 대량 생산을 위한 액체 현탁배양에서의 배양조건과 방법을 구체적으로 규명하고자 수행되었다. Mesh 종류별로 비교해 보았을 때 가장 굵은 10 mesh를 사용한 것이 callus형성에 효과적이었으며, 회전속도에 따른 callus의 형성은 80 rpm에서 가장 효과적이었다. TDZ 0.01 mg/L 첨가된 MS 고체배지에서 유기된 callus를 TDZ 0.001 mg/L가 첨가된 액체배지에 현탁배양했을 경우 callus 형성과 신초원기 형성이 가장 왕성하였다. 형성된 신초원기를 MS와 1/2 MS 배지에 생장조절제가 첨가되지 않은 조건에서 현탁배양시 신초 재분화율이 가장 높았다. 따라서, 이러한 액체 현탁배양 조건과 방법의 구체적인 규명은 무궁화 급속 대량 번식체계 확립을 위한 가능성을 보여 주었다.
민들레 (Taraxacum platycarpum)는 오래전부터 민간에서 약용으로 이용되어 왔다. 본 실험에서는 민들레로부터 효율적인 식물체 재분화 조건을 조사하기 위해 수행되었다. 부정아 유도에 있어서 적절한 생장조절제와 그 농도를 조사하기 위하여 auxin (2.4-D, NAA) 또는 cytokinin (BAP, kinetin, 2-ip)을 단독, 조합처리 하였다. Cytokinin 단독 혹은 auxin과 조합처리시 부정아가 유도되었는데 이 중 2mg/L BAP에서 가장 높게 나타났다. Cytokinin 단독처리시 종류에 따라 부위별 부정아 형성률이 다르게 나타나며, 민들레의 경우에는 특이하게 뿌리 절편에서 자엽과 배축 절편보다에서 부정아 형성률이 가장 높게 나타났다. 한편 auxin을 cytokinin과 조합처리한 경우에는 cytokinin 단독처리시보다 뿌리 절편에서 부정아 형성률이 급격히 떨어졌다. 반면 자엽 부위로부터 부정아 형성률은 크게 증가되었다. 부정아로부터 부정근의 유도는 0.2mg/L NAA에서 가장 양호하게 나타났으며 인공배양토의 순화과정에서 93%의 높은 생존율을 보였다. 비무균상태의 마사토에서 100%생존함으로써 기외의 포장이식에 어려움이 없을 것으로 생각된다.
Lee, Soo-Young;Park, Pil-Son;Chung, Hwa-Jee;In, Dong-Soo;Park, Dong-Woog;Jang R. Liu
Journal of Plant Biotechnology
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제5권1호
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pp.59-61
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2003
Petiole explants from 20 cultivars of Catharanthus roseus were cultured on various shoot-inducing media to assess their competence for adventitious shoot formation. After eight weeks of culture on Murashige and Skoog' s medium supplemented with 4.4 $\mu\textrm{m}$6-benzyladenine and 0.5 $\mu\textrm{m}$$\alpha$-naphthaleneacetic acid, petiole explants from 'Cooler Icy Pink' exhibited the greatest frequency of adventitious shoot formation at 40%, which was followed by 'Little Bright Eye'. By comparing with a previous study on assessment of competence for adventitious shoot formation in hypocotyl explant cultures of various cultures, it is indicated that the relative degree of their competence among cultivars varies to the organ used for the source of explant. Excised adventitious shoots were readily rooted on half-strength MS basal medium. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to maturity in a greenhouse.
시클라멘의 급속증식체계를 확립하기 위하여 발아 후 자엽이 전개된 어린 식물체의 괴경, 자엽, 엽병 등의 절편을 분리하여 절편부위별로 캘러스 및 기관분화에 미치는 생장조절제의 종류와 농도에 따른 식물체의 생장반응을 조사하였다. 절편부위별 캘러스 형성 및 shoot분화에 있어서 auxin류 단용처리의 경우 괴경절편의 NAA처리구에서 절편으로부터 캘러스 없이 shoot가 직접 발생하여 가장 양호하였으며, 1개의 절편체에서 10개 이상의 다아체가 분화되었다. 자엽이나 엽병절편은 캘러스만 유도되었고 대부분 치상당시의 상태로 shoot 발생에 auxin류의 처리는 부적합하였다. Cytokinin류 단용처리는 1.0 mg/L TDZ처리구에서 괴경의 경우 100% shoot 분화율을 보였고, 자엽절편 역시 배양 40일경부터 다수의 shoot가 발생되어 양호하였다. NAA와 BA혼용처리는 0.5 mg/L NAA와 0.5 mg/L BA 혼용첨가된 배지에서 괴경. 자엽, 엽병절편 모두 shoot 분화가 양호하였으며, auxin류와 cytokinin 류 단용처리보다 NAA와 BA 혼용처리가 모들 절편에서 양호한 결과를 보였다. 뿌리발생을 유도하기 위해 NAA와 IBA 단용처리에 shoot를 배양한 결과 배양 15일경부터 0.5 mg/L IBA처리구에서 뿌리가 발생되기 시작하여 배양 30일 후에는 Pot이식이 가능할 정도로 뿌리가 발생되어 가장 양호한 결과를 보였다.
딸기의 meristem culture에 있어서의 기관의 분화(分化)는 배지 조성상의 생장조절물질의 종류와 농도에 따라 각 기관의 형성을 달리하였다. Cytokinin인 BA를 첨가하였을 경우 농도가 높아감에 따라 분화된 shoot의 신장(伸長)보다 새로운 plantlet의 연속적인 분화(分化)가 나타났으며, IAA 1.0ppm은 root의 분화(分化)를 촉진하였으나, BA 1.0ppm과 혼합 첨가 할 경우 rooting이 저조하였다. 2.4-D의 첨가는 기관의 callus화(化)를 유도하였고 특히 BA와의 농도 비율에 따라 각기 다른 양상을 나타내어 BA/2.4-D의 비율이 높을 경우 shoot의 분화(分化)가 나타났고, 이 비율이 낮아질 경우 callus의 분화(分化)가 나타났다. 결국 BA, IAA, 2.4-D의 세가지 물질은 기관분화에 대하여 특색을 갖고 있어 BA는 shoot의 분화(分化), IAA는 root의 분화(分化), 그리고 2.4-D는 callus의 분화(分化)를 유도하고 있음을 알 수 있다.
Petiole explant of Glehnia littoralis Fr. Schmidt was in vitro cultured MS plant medium(DUCHEFA co.) supplemented with various plant growth regulators and examined to find out their optimum combination and concentration for plantlet regeneration. We investigated optimal condition for efficient plant regeneration through adventitious shoot formation on MS plant medium with various kinds of plant growth regulators. Embryogenic calli and adventitious shoot formation were greatly influenced by plant growth regulators. Embryogenic calli induction showed a good response on MS medium supplemented with NAA and BA than others. Especially, combination of 1.0 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA on MS medium led to the greatest frequency in adventitious shoot. The results suggest that plant regulator selection be important factor to achieve an efficient regeneration.
Leaf and petiole explants of Pulsatilla koreana NAKAI were cultured on MS medium supplemented with various concentrations of zeatin, kinetin or BAP combined with 0.05 mg/L IAA. After 6 weeks of culture, effects of cytokinin on adventitious shoot formation from explants were investigated. The highest frequency of shoot formation was obtained when petiole explants were cultured on medium with 0.5 mg/L zeatin and 0.05 mg/L IAA. Regenerated shoot were transferred on to root induction medium. The best root formation was observed at 1/2 MS medium with 1.5 mg/L NAA. Rooted plantlets were transplanted to a mixture of perlit and soil (1:3), where they were successfully acclimatized.
사과 자엽조직으로부터 기내에서 식물체를 재분화시키는 데에 있어서 배양 광조건 및 절편체 극성과의 관계를 살펴보고자 사과‘Fuji’품종의 자엽을 재료로하여 광조건 및 광질을 달리하여 배양하였고, 또한 여러 가지 형태의 절편체를 사용하여 시험을 수행하였다. 배양환경조건 중 광조성에 따른 신초 재분화율을 본 결과 배양 초기 10일간 암배양한 후 명 배양한 처리구에서 가장 높은 재분화율을 나타내었으며, 배양중기의 암처리는 효과가 없었다. 광질별로 비교할 때 전처리로 4일간 암배양한 후 청색광을 조사한 처리구에서 높은 신초 재분화율을 나타내었다. 신초 재분화 유기와 절편체 극성과의 관계를 보면 모든 신초의 형성은 절제된 자엽의 기부 끝쪽에서만 이루어졌다. 즉, 기부쪽 절편체의 말단부 절단면에서보다는 기부쪽 절편체와 말단 절편체의 기부쪽 절단면에서 식물체의 재분화가 이루어짐을 알 수 있었다. 신초 유기는 배축의 기부쪽 자엽 절편체 에서 매우 높게 나타난 반면 자엽의 말단부위에 가까운 곳에서는 현저히 감소하였다.
딸기의 엽병(葉柄)을 하단부(下端部)와 상단부(上端部)로 구분(區分)하여 MS배지(培地)에 사용(使用)하였고, 여기에 $BA \;2mg/{\ell}$, 2, 4-D $0.02mg/{\ell}$를 단착(單獨) 복합처리(複合處理)하였다. Shoot의 분화(分化)는 이식체(移植體)의 위치(位置)에 따라 차이(差異)를 나타냈다. shoot의 분화(分化)는 상단부(上端部)에서는 거의 보이지 않았고, $BA\;2mg/{\ell}$구(區) 및 $BA\;2mg/{\ell}+2,4-D$$0.02mg/{\ell}$구(區)에서 하단부이식체(下端部移植體)의 55%이상의 이식체(移植體)에서 분화(分化)가 일어났다. 그러나 두 처리 간에는 별차이가 보이기 않았으나, BA는 뿌리의 분화(分化)에는 억제적인 효과를 보였다. 2,4-D $0.02mg/{\ell}$처리는 shoot의 분화(分化)에는 효과가 없었지만 뿌리의 분화(分化)에는 촉진적 효과가 있었고 아울러 상단부(上端部)의 이식체(移植體)에서 보다 하단부(下端部) 이식체(移植體)에서 뿌리의 분화(分化)가 좋았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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