Molecular analysis has been done for characterization of the interactions between three beet curly top virus (BCTV) strains and two Arabidopsis ecotypes in terms of virus inducible disease symptoms and infectivities. The total DNA was isolated from three tissues (shoot tips, infection origins and roots) of virus infected plants and this DNA was analyzed by quantitatively and qualitatively to elucidate virus movement and symptom development. CTV-Worland infected Col-O and Sei-O showed only symptom shown in hypersusceptible ecotype Sei-O by BCTV-worland was shoot tip stunting. Kinetics of virus DNA accumulation of three different viruses indicated that roots contained more virus DNA than shoot tips or infection origins, and that disease symptom severity was strongly correlated with virus DNA accumulation. These results suggest that the mild and Worland-specific symptoms shown in Sei-O by BCTV-worland are caused by the interactions of host factors provided by hypersusceptible ecotype and viral factors of mild strain.
Ko Jeong-Ae;Choi Jeong-Ran;Xudong He;Kim Hyun-Soon
Korean Journal of Plant Resources
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v.19
no.3
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pp.432-435
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2006
A rapid and mass propagation method for multiple shoots and plant regeneration using bulb scales of Muscari comosum var. plumosum were developed. In vitro different parts of bulb scale as explants were cultured on 11 kinds of MS (1962) media supplemented with various plant growth regulators to induce shoot and callus. A combination of 2.0 mg/L 6-BA and 2.0 mg/L IBA on MS medium was the most favorable and induced the highest production (80%) of shoot formation after 30 days. We also found that the middle part of bulb scale was the best for mass propagation of Muscari comosum var. plumosum of which production could reach 64.4%.
Black shoot blight disease caused by Erwinia pyrifoliae has serious impacts on quality and yield in pear production in Korea; therefore, rapid and accurate methods for its detection are needed. However, traditional detection methods require a great deal of time and fail to achieve absolute quantification. In the present study, we developed a droplet digital polymerase chain reaction (ddPCR) method for the detection and absolute quantification of E. pyrifoliae using a pair of species-specific primers. The detection range was 103-107 copies/ml (DNA templates) and cfu/ml (cell culture templates). This new method exhibited good linearity and repeatability and was validated by absolute quantification of E. pyrifoliae DNA copies from samples of artificially inoculated immature pear fruits. Here, we present the first study of ddPCR assay for the detection and quantification of E. pyrifoliae. This method has potential applications in epidemiology and for the early prediction of black shoot blight outbreaks.
Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Park, Ho Ki;Chon, Sang Uk;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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v.6
no.1
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pp.39-43
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2004
A successful, efficient system for multiple shoot induction and plant regeneration of soybean (Glycine max) was established. Four soybean genotypes were compared for organogenic responses on various media cultured under light conditions. The adventitious shoots (98%, 2.6 shoots/cotyledon) directly from one-day-old cotyledon after germination induced by the hormone treatment and its efficiency was higher than any other conditions. The optimal medium for the induction of multiple shoots from cotyledon in Pungsannamulkong(shoot formation rate, 98%), Lx 16 (83%) and IIpumgeomjeongkong(63%) was MS medium supplemented with 2 mg/L BAP, but for Alchankong(75%), MS medium supplemented with 1mg/L zeatin and 1mg/L IAA, 3% sucrose, 4% Phytagel. Higher root induction (88%) was observed from the shoots placed on rooting medium (hormone-free MS basal). Plantlets were transferred onto the same medium supplemented with 1% activated charcoal for further development. With this treatment, regenerated plantlets were obtained within 7-8 weeks (shoot induction for 4 weeks, rooting and shoot elongation for 3-4 weeks).
Albino Margareth M.C.;Vianna Giovanni R.;Falcao Rosana;Aragao Francisco J.L.
Journal of Plant Biotechnology
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v.7
no.4
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pp.267-272
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2005
Common bean (Phaseolus vulgaris L.) plants were regenerated via organogenesis from mature embryonic axes, cultured on MS medium supplemented with ildole-3-ecetic acid (IAA) and thidiazuron (TDZ) for one week in the dark. Embryonic axillary regions were excised, longitudinally cut to split the both sides, and cultured for two weeks on MS medium supplemented with IAA and TDZ. The combination 0.5 mg $l^{-1}$ TDZ/0.5 mg $l^{-1}$ IAA presented the higher efficiency in shoot regeneration and the combination 0.5 mg $l^{-1}$ TDZ/0.25 mg $l^{-1}$ IAA presented the higher efficiency in conversion of shoots to plants. Regenerating explants were transferred to MS medium containing 1 mg $l^{-1}$ BAP for shoot development. All elongated shoots were rooted in vitro, presented normal phenotype and produced viable seeds. Histological analysis confirmed the mode of regeneration as de novo shoot organogenesis.
The goal of this research was to develop an efficient cryopreservation protocol for germplasms of yam (Diosorea batatas), that were cultivated in Korea. Comparative studies with four other cryogenic techniques and subsequent experiments for shoot regrowth were conducted. in vitro-grown shoot-apices of the D. batatas were successfully cryopreserved by encapsulation-dehydration. The maximum survival of shoot-apices could be achieved when the precultured (with 0.3 M of sucrose for one day) and encapsulated (with a 3%(w/v) Na-alginate solution) apices were dehydrated for $3.5{\sim}4\;h$ prior to direct immersion in LN (liquid nitrogen). The frequency of regrowth rate of cryopreserved apices was not decreased during 3-month storage period. The thawing method markedly affected survival of the cryopreserved apices, and thawing at $40^{\circ}C$ for 3 min produced the best results. When cryopreserved apices were post-cultured on the post-culture medium (MS), supplemented with $0.2mgl^{-1}$ of BA ($N_6$-benzyladenine) and $0.2mgl^{-1}$ of kinetin, they showed direct shooting without callusing.
Kim, Min-Young;Yoo, Yeong-Min;Nam, Jung-Hwan;Choi, Jong-Won;Park, Hee-Juhn
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.38
no.3
s.150
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pp.270-276
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2007
To evaluate the leaf shoots and stem barks of Kalopanax pictus (Araliaceae) as an edible vegetable and a traditional medicinal drug, respectively, the compounds of syringin, liriodendrin, astragalin, quercetin, and kalopanaxsaponins were quantitatively measured by HPLC analysis. The leaf shoot exhibited low contents of syringin, liriodendrin and kalopanaxsaponins but a high chlorogenic acid content, whereas the grown leaves contained very high amounts of kalopananxsaponins. In contrast, the stem bark had very high amounts of syringin and liriodendrin and relatively low kalopanaxsaponins. In particular, the kalopanaxsaponin contents were rapidly increased with monthly variation until October but decreased from September. It was also observed that the leaf shoot contained chlorogenic acid by 30.73 mg/g and the barks showed the concentration of liriodendrin by 20.75 mg/g. These results indicate that high contents of syringin and liriodendrin in the stem bark and high contents of chlorogenic acid in the leaf shoot support scientific bases on the traditional uses of K. pictus as a medicinal drug and a functional food, respectively.
Morphological characteristic during formation of tobacco crown gall tumor and genetic tumor, and their differential response to growth regulator were investigated in in vitro culture. Crown gall tumor was induced from tumor tissue transformed by infecting Agrobacterium tumefaciens C58. Genetic tumor was induced from tumor tissue which was induced spontaneously from reciprocal interspecific hybrids between Nicotiana glauca (2n=24) and Nicotiana langsdorffii (2n=18). Morphological characteristic of crown gall tumor, genetic tumor, and teratoma shoot was very similar, and they were actively proliferated on hormone-free medium. Typical tumor callus and teratoma shoot formed from crown gall tumor on the hormone-free medium. On the contrary, tumor callus derived from genetic tumor formed as a crown gall tumor callus on the medium supplemented with 0.5 mg/L of 2,4-D, and lots of teratoma shoots without any root formed on the hormone-free medium. Root development from the teratoma shoots was hardly obtained on the medium with IAA, GA and active carbon. However, teratoma shoots with roots, as normal shoots, were initiated occasionally on the hormone-free medium. These shoots also formed new genetic tumor on the stem, which leaves formed lots of teratoma shoot on the hormone-free medium in in vitro culture.
In vitro culture of shoot tip of garlic (Allium sativium L. cv. Seosan) was carried out to find medium condition of the induction of multiple shoots and bulbing for muliproduction of virus-free seed bulbs. For this work, tank culture was introduced. In shoot tip culture on MS solid medium the induction of multiple shoots and bulbing were better by adding 3% sucrose than 8%. Supplementation with 2mg/L 2ip and 0.2 mg/L IAA in this medium was effective. Three point three shoots including 2.7 bulbs were formed from a shoot tip after cultivation for 30 days on this medium. Bulbing of garlic in liquid culture with plastic water tank of 20L supplied air at the side of the lower part was better by adding 3% sucrose than 8% by subculture for 45 days with shoots obtained from shoot tip culture for 30 days on soid MS medium. Shoot growth was vigorous at 3% sucrose however bulb growth was more effective on the medium of 8% sucrose. Because of the effectiveness on solid medium added 3% sucrose, 2 mg/L 2ip and 0.2 mg/L IAA for initial production of multi-shoot in stem tip culture and the effectiveness in liquid culture with water tank for growth of bulbs, the method of two-step culture could be introduced for the multiple production of seed bulb of high quality. It was more desirable by supply of 0.2 mg/L BA and 0.02 mg/L NAA at tank culture time. But growth of the bulbs became poor by increasing concentration of NAA of the medium.
Fast and accurate diagnosis is needed to eradicate and manage economically important and invasive diseases like fire blight. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) is known as the best on-site diagnostic, because it is fast, highly specific to a target, and less sensitive to inhibitors in samples. In this study, LAMP assay that gives more consistent results for on-site diagnosis of fire blight than the previous developed LAMP assays was developed. Primers for new LAMP assay (named as DS-LAMP) were designed from a histidine-tRNA ligase gene (EAMY_RS32025) of E. amylovora CFBP1430 genome. The DS-LAMP amplified DNA (positive detection) only from genomic DNA of E. amylovora strains, not from either E. pyrifoliae (causing black shoot blight) or from Pseudomonas syringae pv. syringae (causing shoot blight on apple trees). The detection limit of DS-LAMP was 10 cells per LAMP reaction, equivalent to $10^4$ cells per ml of the sample extract. DS-LAMP successfully diagnosed the pathogens on four fire-blight infected apple and pear orchards. In addition, it could distinguish black shoot blight from fire blight. The $B{\ddot{u}}hlmann$-LAMP, developed previously for on-site diagnosis of fire blight, did not give consistent results for specificity to E. amylovora and on-site diagnosis; it gave positive reactions to three strains of E. pyrifoliae and two strains of P. syringae pv. syringae. It also, gave positive reactions to some healthy sample extracts. DS-LAMP, developed in this study, would give more accurate on-site diagnosis of fire blight, especially in the Republic of Korea, where fire blight and black shoot blight coexist.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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