The influences of ethylene inhibitors ($AgNO_3$ and silver thiosulfate) and cytokinins (BAP and TDZ) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of B. napus cv. Youngsan were investigated. The presence of $50{\mu}M$ Silver thiosulfate (STS) in shoot regeneration medium formed shoots at 60-68% after 3-4 weeks of culture, which was enhanced by 2-fold compared to that of Silver nitrate ($AgNO_3$). Moreover, cotyledon explants were more regenerative than hypocotyls; shoots from cotyledon explants began to occur 4-5 days earlier than that of hypocotyl explants. TDZ at a concentration of $8-10{\mu}M$ was effective for shoot regeneration, compared with BAP. Consequently, the optimal shoot regeneration response was observed in medium supplemented with $50{\mu}M\;STS+8{\mu}M\;TDZ$. In transmission electron microscopy (TEM) analysis, higher density of silver nanoparticles was shown to be accumulated widely inside the cell wall and plasmodesmata of regenerating leaf cultured in medium supplemented with $AgNO_3$. By contrast, in the cell cultured in medium with STS, fine-grained deposits were partly observed in the surroundings of the cell wall.
In order to develop an efficient micropropagation system for a rare tree species, Empetrum nigrum var. japonicum K. Koch, the effect of medium salt, cytokinins and auxin at different concentration were evaluated. Shoot induction from axillary bud was better on WPM medium than on MS medium. Although there was no significant differences observed in shoot induction among the salt strengths of WPM medium, whereas healthy shoots were developed on basal WPM medium. In comparison of the cytokinins affecting shoot proliferation, zeatin was better than BA, whereas BA exhibited more effectiveness on shoot elongation. In vitro root formation was better on WPM medium than on 1/2MS medium and achieved the highest rooting rate when 5.0 mg/L IBA treatment. 93% of rooted plantlets were survived on artificial soil mixture after 4 weeks of acclimatization. Above results suggest that a rare tree species, E. nigrum var. japonicum can be micropropagated via axillary bud cultures.
The stem segments of Ailanthus altissima were cultured on the Murashige & Skoog's medium(1962) supplemented with 0.1 mg/l BAP and 1.0 mg/l 2, 4-D for callus induction and proliferation, Shoot primordia were observed as greenish regions on the surface of yellow-brown calli about 8 weeks after culture. Shoot primordia were selected and transferred to the MS media containing various combination of BAP and 2, 4-D. Among these combinations the shoot primordia cell clusters on the medium added to 0.5mg/l BAP and 0.01mg/l 2, 4-D exhibited the highest number of shoot formation. These shoots were successfully transferred on the solid MS medium with no growth regulators for the rootings.
Lee, Ji Yeon;Kang, Eun Jeong;Kim, Sang Hoon;Kim, Dong Sub;Kim, Jin-Baek;Ha, Bo-Keun;Kang, Si-Yong
Journal of Radiation Industry
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v.5
no.3
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pp.231-236
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2011
'Ggoma' is a new Hibiscus dwarf type variety developed by gamma irradiation at the Korea Atomic Energy Research Institute (KAERI). This study was conducted to determine the best optimum cultural callus formation and shoot regeneration condition. Sterilized leaf tissues were cultured on MS (Marashige and skoog's) medium containing 3% sucrose, 0.8% agar with different concentration and combination of TDZ, 2, 4-D, KT, BA, and 2iP for 4 weeks in vitro culture. MS medium containing 2,4-D $0.1mg\;l^{-1}$ and BA $0.5mg\;l^{-1}$ were most effective on callus formation and growth. After 4 weeks, callus was transferred on BA (0.5, 1, $1.5mg\;l^{-1}$) and TDZ (0.1, 0.2, $0.3mg\;l^{-1}$) for shoot formation. The best condition for inducing the shoot from callus was BA $1.5mg\;l^{-1}$ and TDZ $0.3mg\;l^{-1}$. This result will be useful for the rapid multiplication of Hibiscus syriacus L.var. Ggoma.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2003.10a
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pp.9-18
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2003
A method for rapid propagation of mature Jack fruit was developed. Four types of explants (mature embryos, apical meristems of young seedlings, apices from mature plants and nodal segments) were used. It has been found 88% of young apical meristems produced shoots in Campbell and Durzan (CD) medium compared to 60% in Murashige and Skoog (MS) medium. Only 1/3 of them produced multiple shoots. Shoot idtiation from nodal segments was very rare. Mature apices produced callus. Although removed of the sheathing cover around mature buds enhanced the shoot initiation but success rate was low in growth regulator free medium. Embryos respond to the CD medium but not to the MS medium. Embryos from seeds soaked in water for 24 hours produced shoots after 8 weeks of incubation and the success rate was 70% while embryos from dry seeds only produced roots. There was no significant effect of cold storage (refrigeration) for 7 days on shoot initiation from mature embryos (65%) but the ability for shoot induction declines with storage time (55% after 21 days of cold storage). Mature axillary buds were established in Modified Campbell and Durzan (CD) medium supplemented with 0.5mg/1 and IBA. There was a significant difference in the growth performance of shoots according to the period of the year in which explants were collected. Highest (60%) was observed in November-January period. It was only 30% when the explants were collected in February-April or May-July and decreased to 20% in August-October. The shoots produced in November-January showed a higher vigor than those produced in other months. Since Jak fruit show seasonal changes in fruit bearing and shedding of leaves, it can be suggested that the difference in growth performances of tissues cultured in artificial culture media would have been affected by endogenous rhythms.
Kim, Tae-Dong;Kim, Nam-Ho;Park, Eung-Jun;Lee, Na-Nyum
Journal of Plant Biotechnology
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v.48
no.1
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pp.54-61
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2021
This work describe an efficient method for the shoot induction and plant regeneration of seedling-derived apical bud explants of Tilia mandshurica Rupr. & Maxim. The highest rate of shoot induction (82.2%) was obtained when apical bud explants from juvenile seedlings (5 months old) were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg/L 6-benzylaminopurine (BAP). However, apical bud explants obtained from mature trees (12 years old) did not produce any shoots, even with BAP supplementation. Among the three cytokinins tested for shoot multiplication (BAP, zeatin, and kinetin), BAP was the most effective; the highest number of shoots per explant (2.1) was observed on MS medium supplemented with 1.0 mg/L BAP. In contrast, the longest average shoot length (3.0 cm) was observed after growth on MS medium with 2.0 mg/L zeatin. No multiplication occurred when apical bud explants were cultured with kinetin-supplemented media. During rooting of in vitro-elongated shoots, the highest rooting rate (100%) was observed in half-strength MS medium supplemented with 0.5 ~ 1.0 mg/L indole-3-butyric acid (IBA) or 3.0 mg/L 1-naphthaleneacetic acid (NAA). During the acclimatization process, plantlets that were rooted on the IBA (0.5 mg/L)-supplemented medium had the highest survival rate (100%) and maximum root length (18.5 cm). These findings suggest that a low concentration (0.5 mg/L) of IBA is appropriate for the rooting and acclimatization of T. mandshurica. Plants were successfully transferred to the greenhouse with a 100% survival rate. This protocol will be useful for the large-scale propagation of Tilia species.
In this study, a plant tissue culture system was established for Atractylodes spp., an economically valuable medicinal crop in Korea that has low domestic production and is increasingly imported. In particular, Atractylodes ovata was treated with four types of cytokinins, 6-benzylaminopurine (BA), zeatin, kinetin, and thidiazuron (TDZ), in two different concentrations (0.5 and 1.0 mg/L). Among the four types of cytokinins, the BA treatment was effective for the shoot and root growth of A. ovata. Both the 0.5 mg/L and 1.0 mg/L concentrations of BA showed similar results; however, the 1.0 mg/L concentration of BA was more effective in promoting shoot and root growth. The treatments showed that the TDZ treatment was not effective for the shoot and root growth, except for the number of shoots and the fresh weight (FW) of the root; therefore, it was unsuitable for this species. In this study, we established a mass production system of A. ovata. Our results showed that direct in vitro regeneration may make a significant contribution to improving the cultivation of the medicinal plant A. ovata.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.36-36
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2021
Cryopreservation has been broadly used as an efficient method for a long-term conservation for many types of plants especially vegetatively propagated plants. Among several cryopreservation methods, a droplet-vitrification was the most widely applicable and efficient method. Studies have developed protocols for strawberry using droplet-vitrification method and suggested the practical use of the protocol for large number of germplasm with a little modification. In this study, the droplet vitrification method of shoot tip has been tested on 31 accessions provided around the world. Shoot tips were precultured on Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with 0.3~0.5M sucrose. Precultured explants were osmoprotected with loading solution, 35% of PVS3 (C4, 17.5% glycerol and 17.5% sucrose) for 40 min and exposed to dehydration solution, PVS3 (B1, 50% glycerol and 50% sucrose) for 60 min. Then, the explants were transferred onto droplets containing 2.5 uL PVS3 on sterilized aluminum foils prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1hr. The cryopreserved shoot tips were rapidly warmed in a water bath at 40C and then unloaded in MS with 0.8M sucrose for 40 min. The shoot tips were cultured in NH4NO3-free MS post culture medium for 2 weeks. Subsequently, the explants were moved to the MS medium for 6 weeks and evaluated the regrowth rate. By this droplet-vitrification protocol, twenty-four accessions showed at least 40% regrowth rate. Out of 24 accessions, 'Nonsan1ho' had the highest regeneration rate of 85.8% and 'Jumbo pureberry' had the lowest with 42.1%.
In order to clarify the mecahnism of histological barriers to pathogens of witches' broom diseased in sweet potatoes, this experiment has been conducted to observe the relationship between pathological characters and the transfer of mycoplasmae in the shoot apex. The material used the experiment is the sweet potato (Ipomoea batatas (L.) Lamm. Suwon 147). In the experiment regarding of mycoplasmae, the upper limit zone of transfer of mycoplasmae is examined by way of the process of free stock and the shoot apex of a infected part in nature, observed in the culture of each part of the diseased plant which is cut to a certain length. The pathological change pattern of tissues infected with mycoplasmae has been observed under the light and electron microscopes. As a result of this experiment, the following conclusion was arrived at. 1. It has been ascertained that the mycoplasmae are not existent in a promeristem and primary meristem zone from the meristem dome, and is existent in the lower part of the vascular differentiation zone, after which differential tissues the mycoplasmae become progressively enlarged, and before which undifferential tissues it become progressively immatured and diminished in size. 2. It can be suggested that mycoplasmae may not be existed in the shoot meristem, be cause the passing structures such as sieve area and plasmodesma which can be pass ed immatured mycoplasmae is undifferentiated. 3. In the tissue culture, free stock can be obtained in the zone between 1.0-1.5mm of the shoot apex, while it cannot in the 2.0-3.0mm zone, because of infection by mycoplasmae. It is suggested that immature mycoplasmae may be diffused according to temperature ($28{\pm}1^{\circ}C$) in tissue culture process.
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