The callus formation and shoot growth of germinating rice seedlings in the aseptic culture media treated with 2.4-D and N.A.A. were studied with 3 rice cultivars. Callus formation and shoot growth were the best in the media including $10^-4$M N.A.A.. Varietal differences also were significant in the formation of callus and shoot growth from the callus.
Two potato (Solanum tuberosum L.) cultivars were transformed by Agrobacterium tumefaciens harboring cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter and $\beta$-glucuronidase (GUS) gene. Expression patterns of the CaMV 35S promoter according to tissue types and developmental stages, and genetic stability of GUS gene were investigated in the clonal progenies of transgenic potatoes. Kanamycin-resistant shoot emerged from tuber disc after 4 weeks of culture, and root was induced 6 weeks after culture on the selection medium. Shooting frequency of cvs. Superior and Dejima were 43% and 27%, respectively. Mature transformants and their clonal progenies showed no phenotypical abnormality. GUS activity was expressed primarily at parenchymatous cells of phloem tissue around the vascular cambium in the stem and root, and higher activity was found at the apical meristem of shoot, root and adventious shoot bud. GUS activity was higher at tubers of young explants than at stored tubers. These facts indicate that expression level of the CaMV 35S promoter differed according to tissue types and developmental stages of the organs. The GUS gene was stably inherited to each clonal progeny and normally expressed.
This study was carried out to establish The regeneration of healthy seedlings from the nodal segment culture of Chinese yam (Dioscorea opposita cv. Danma), cultivated in Korea. Different explants such as leaves, petioles, roots and nodal pieces, excised from the in vitro grown seedlings of Chinese yam, were cultured on MS medium supplemented with various combinations of growth regulators. All the growth regulators used induced plantlet regeneration from the nodal segments at a high frequency, while there was no induction of shoot or callus from leaf, petiole or root tissues. The medium supplemented with 0.01mg/L NAA, 0.5mg/L BA, 0.5-1.0mg/L kinetin and without plant growth regulator was effective for shoot development of buds from the nodal segment culture. The concentration of BA and NAA was an important factor in the bud induction of buds from the nodal segments of Chinese yam. Nodal segments cultured on the medium containing 1.0mg/L NAA and 0.5-1.0mg/L BA gave the best response to bud formation. The addition of GA$_3$ to the culture medium suppressed shoot induction and growth, while it increased microtuber formation. The shoot growth and microtuber formation were also affected by medium strength and solidity. The MS basal medium containing 1 g/L gelrite was suitable for microtuber formation from the nodal segment of Chinese yam.
An efficient regeneration protocol for stem disc culture of Populus euramericana, which is important species for bioenergy resource in agroforestry, was established. The number of explants that were obtained and the number of explants that regenerated varied with the genotypes. However, in all the genotypes, stem disc culture produced more regenerated shoots than did in axillary bud culture. A comparison of the effects of cytokinin type and concentration on shoot regeneration in different explants (i.e., petiole, leaf, and root segments of P. euramericana) revealed that a concentration of $0.002mg\;l^{-1}$ thidiazuron (TDZ) used on petiole segments resulted in the greatest shoot regeneration (95.83%). The hormonal requirements for the greatest shoot regeneration in the three explant types varied. Different concentrations of $AgNO_3$ and $CoCl_2$ were added separately to the medium to stop the yellowing and subsequent necrosis of the regenerated shoots. Lower concentrations (3 and $5mg\;l^{-1}$) of these compounds improved shoot regeneration and elongation, compared with the control. The in vitro-regenerated shoots were transferred to rooting medium and subsequently acclimatized. The highly efficient regeneration system of P. euramericana reported here can be used for mass propagation of this recalcitrant for regeneration, economically important tree species.
In order to develop an efficient micropropagation technique effect of plant growth regulators (PGRs) affecting on shoot proliferation from shoot apex in Pyrus ussuriensis was tested. Generally, there was no conspicuous effect on shoot induction by the treatment of PGRs and one or two shoots/explant were induced when cultured on MS medium supplemented with BA and/or BA plus NAA. Both apical shoot necrosis and hyperhydric shoots were observed frequently in multiplied shoots, and callus was formed at the basal part of shoots. About 20% spontaneous rooting was achieved in growing shoots, however the proliferated shoots exhibited poor rooting rate in gelrite supported media. When we tried to ex vitro rooting of the shoot cutting, the shoot cuttings rooted up to 50% with 100 mg/L IBA application. The rooted plantlets grew normally after acclimatization in the greenhouse.
1) The purpose of the present study is to investigate the effects of culture filtrates of Fusarium oxysporum f. vasinfectum which is known to produce fusaric acid (wilt toxin) on the germination of sesame seeds and the growth of sesame seedlings. 2) Culture filtrates of Fusarium oxysporum 1. vasinfectum used in this study strongly or weakly inhibited the germination and bring about necrosis accompanying black discoloration of sesame seeds. 3) Varietal difference of sesame in the germination response on the culture filtrates of Fnsarium oxysporum f. vasinfectum is not shown in this study. 4) This study reveals that differential five strains of Fnsarium oxysoprum f. vasinfectum used in this study differ greatly in the toxicity of culture filtrates inhibiting the germination of sesame seeds. 5) In the seedling bed added with culture filtrates of Fnsarium oxysporum f. vasinfectum, the growth of shoot as well as root system of sesame seedlings are notably inhibited and necrotic black discoloration appear on both shoot and root system. But in the seedling beds added with weaker concentration of culture filtrates $/(10\%)$ the growth of shoot is slightly promoted. 6) In culture of sesame seedlings with Knop's solution containing 1 to 3 per cent culture filtrates, the growth of shoot as well as root system are slightly retarded" and till the time of development of the third leaves the whole stem and leaf petiole tissue are weakened so that they become thread like accompanying brown discoloration, interveinal light brown area appear in the second leaves, and the third leaves curl from both sides towards the middle with necrotic brown discoloration, especially symptoms of injury on the third leaves are nearly similar that of the leaves of wilted sesame in the field. 7) A pararell relationship is not found between toxicity of culture filtrates and pathogenicity of five differential strains of Fnsarium oxysporum f. vasinfectum used in this study.
A protocol for the in vitro propagation of Chamaecyparis obtusa was established in the present study. Multi-shoots were initiated from apical shoot explants from germinants after 10 weeks of culture on Litvay medium (LM) supplemented with different concentrations of cytokinin. The effects of pre-treatment with high concentrations of cytokinin and varying concentrations (0.2 to 5.0 mg/L) of zeatin on in vitro shoot elongation and shoot multiplication were investigated. Optimal shoot growth was achieved on LM medium, with over 10-mm shoots after 10 weeks of culture. In the anti-browning tests, ethanesulfonic acid triggered the least browning in the shoot tips. The highest multi-shoot induction was observed in the 0.5-mg/L zeatin treatments, which yielded 80% induction of shoots after 10 weeks of culture, and maximum shoot elongation was observed in the LM basal medium without the hormone. The highest rooting rates were 65% under 0.2 mg/L indole-3-butyric acid.
This experiment was conducted to establish the micropropagation of Calanthe discolor through multiple shoot formation from the culture of leaf, corm and root explants. Frequency of adventitious shoot formation from leaf explants was higher than those of corms and root explants. Frequency of adventitious shoot formation on medium with various concentrations of BA (0. 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L) and NAA (0, 0.1, 0.5, and 1.0 mg/L) was tested. The maximun induction of adventitious shoot was obtained on half strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NAA after 6 weeks of culture. Multiple shoots were transferred onto half strength MS medium with various concentrations of GA3 (0, 0.1, 0.5, 1.0, 3.0, and 5.0 mg/L). The number and length of multiple shoots on medium were highest on medium with 3.0 mg/L GA3. All the adventitious shoot grew well and rooted on half strength MS medium with 3.0 mg/L NAA. The plantlets were acclimatized up to 100% on sand with TKS-II or pearlite with TKS-II.
Proceedings of the Korean Society of Plant Biotechnology Conference
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2005.04a
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pp.6-9
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2005
Plant biotechnology involving genetic modification has been rather controversial. However, the major issues related to safety are being addressed by continued improvements in technology. Some of the related facts will be highlighted to set the tone for a scientific discussion on the possibilities of using the technology for crop improvement. Our main research interest is to understand the molecular regulation of shoot bud regeneration in plant tissue culture, which is essential for crop improvement by biotechnology. We have isolated and characterized some genes that are associated with adventitious shoot regeneration. These include a MADS-box cDNA (PkMADS1) from paulownia kawakamii, which regulates vegetative shoot development and in vitro shoot regeneration from leaf explants. Another gene we have characterized from petunia codesfor a cytokinin binding protein (PETCBP). Preliminary functional analysis of this gene indicated that this also affects adventitious shoot bud initiation. Also, the antisense suppression of this gene in petunia causedexcessive branching. Results from our work and selected other publications will be used to highlight the possibilities of manipulation of such genes to improve crop species.
An efficient plant regeneration protocol is developed for a standard-type chrysanthemum. When petal segments derived from flower buds (4 or 8cm in diameter) were used as the culture material, the highest shoot regeneration frequency (96%) was obtained on a Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg/L IAA, 2 mg/L BA, 3% sucrose, and a 0.8% agar. Pre-culturing the explants under dark conditions for 14 days produced better results for the shoot regeneration frequency than the explants cultured under a continuous 16 h photoperiod ($40{\mu}molm^{-2}s^{-1}$). The shoot regeneration frequency ranged from 19.0% for the Shinmato cultivar to 89.1% for the Baeksun cultivar. Activated charcoal (0.2%) enhanced the root formation of the regenerated shoots in a hormone-free MS medium. The rooted plantlets were acclimatized and successfully established in a greenhouse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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