For the improvement of productivity of Pleurotus ostreatus, the production of liquid spawn was studied. The highest liquid spawn production was obtained after shaking culture for 4 days in the culture medium containing 5%(W/V) wheat flour, 0.2%(W/V) yeast extract, 0.1%(W/V)$KNO_3$ 0.05% (W/V) $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.05%(W/V) $KH_2PO_4$. The optimum pH and temperature was 7.0 ana $30^{\circ}C$. The period required to complete the mycelial growth after spawning were 28, 22, 10 and 9 days, respectively, when the 2%(V/V) of solid spawn and 2%(V/V), 5% (V/V) and 10%(V/V) of liquid spawn were inoculated. The days required from spawning to fruiting bodies were 38, 34, 28 and 27 days.
본 연구는 청나래고사리의 기내 포자체 유묘를 이용한 효율적인 대량생산 방법을 개발하기 위하여 시행되었다. 유묘의 엽신, 엽병, 근경을 곱게 다져 활성탄 0.1%를 첨가한 1/2MS배지에 배양한 결과, 근경의 절편에서만 포자체 유묘가 생산되었다. 곱게 다진 근경 절편은 1/2MS 배지에서 포자체 재생이 가장 왕성하였으며, sucrose 농도를 2%로 조절하고 $NaH_2PO_4$$50mgL^{-1}$을 첨가할 경우 포자체 재생이 더욱 촉진되었다. Kinetin과 BA를 단용 또는 NAA, IBA와 각각 혼용하여 배양한 결과, kinetin $1{\mu}M$ 단용 처리구에서 포자체 재생이 가장 왕성하였다. BA 첨가구에서는 분열조직의 증식이 왕성하였으나. 분열조직이 포자체로 분화되지 못하는 특징을 보였다. 변형 1/2MS 배지(sucrose 2%, $NaH_2PO_4$$50mgL^{-1}$, kinetin $1{\mu}M$, pH 5.8, agar 0.8%)에 활성탄 0 또는 0.1%를 첨가하여 고체, 액체 정체, 액체 진탕배양한 결과, 포자체 재생은 액체 진탕배양시 가장 왕성하였으며, 활성탄의 첨가는 포자체 재생을 촉진하였다.
We investigated the feasibility of bioethanol production from hydrolysate of brown seaweed Sargassum sagamianum. Prior to bioethanol production using yeasts, six yeast strains were compared and the best ones in terms of the ethanol production levels were selected. Pichia stipitis ATCC 7126, Pichia stipitis ATCC 58784, and Pichia stipitis ATCC 58376 were superior to others in terms of ethanol production. These yeast strains were used for producing bioethanol by the shaking bottle culture and the fermentor culture. Out of approximately 30 g/L reducing sugar, about 3~6 g/L and 4~7 g/L bioethanol were produced in the bottle culture and the fermentor one, respectively. Furthermore, it was observed that around 12~28 g-bioethanol was produced from 1 kilogram of Sargassum sagamianum. Compared with those previously published, these data were almost three to eight times higher in value.
Ascorbate oxidase activity in various cucumber tissue extracts was highest in young fruit peeling. Cucumber callus was induced from young fruit peeling and callus cell lines were selected for more than 7 months, which porduced high levels of ascorbate oxidase and had a high growth rate. Induction of callus was optimized with Linsmaier-Skoog(LS) medium at 25$^{\circ}C$ in dark phase. Ascorbate oxidase activity reached a maximum at 5 days after transfer to LS basal liquid-medium ant then declined. The enzyme activity in callus cells was stimulated by addition of 10${\mu}$M $CuSO_4$ in the early logarithmic phase of growth. And also, adding 10${\mu}$M $CuSO_4$ at 3rd day 7th day of culture period, ascorbate oxidase activity in callus cells was maintained to high level. Maximum yield of ascorbate oxidase was found at the 25th day by flask shaking culture, but three-fold of ascorbate oxidase activity was obtained at the 16th day by jar fermentation.
A bacterial strain inhibiting the growth of Vibrio anguillarum, the causative agent of vibriosis, was isolated from fish intestines. The isolated strain HS36 was identified as Aerococcus urinaeequi based on the characteristics of the genus according to Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and by 16S rRNA sequencing. The growth rate and antibacterial activity of strain HS36 in shaking culture were higher than those in static culture, while the optimal pH and temperature for antibacterial activity were 7.0 and 30℃, respectively. The active antibacterial substance was purified from a culture broth of A. urinaeequi HS36 by Sephadex G-75 gel chromatography, Sephadex G-25 gel chromatography, and reverse-phase high-performance liquid chromatography. Its molecular weight, as estimated by Tricine SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, was approximately 1,000 Da. The antibacterial substance produced by strain HS36 was stable after incubation for 1 h at 100℃. Although its antibacterial activity was optimal at pH 6-8, activity was retained at a pH range from 2 to 11. The purified antibacterial substance was inactivated by proteinase K, papain, and β-amylase treatment. The newly purified antibacterial substance, classified as a class II bacteriocin, inhibited the growth of Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica, and Vibrio alginolyticus.
The conversion of a cellulose-producing cell ($Cel^+$) from Gluconacetobacter hansenii PJK (KCTC 10505 BP) to a non-cellulose-producing cell ($Cel^-$) was investigated by measuring the colony forming unit (CFU). This was achieved in a shaking flask with three slanted baffles, which exerted a strong shear stress. The addition of organic acid, such as glutamic acid and acetic acid, induced the conversion of microbial cells from a wild type to $Cel^-$ mutants in a flask culture. The supplementation of $1\%$ ethanol to the medium containing an organic acid depressed the con-version of the microbial cells to $Cel^-$ mutants in a conventional flask without slanted baffles. The addition of ethanol to the medium containing an organic acid; however, accelerated the conversion of microbial cells in the flask with slanted baffles. The $Cel^+$ cells from the agitated culture were not easily converted into $Cel^-$ mutants on the additions of organic acid and ethanol to a flask without Slanted baffles, but some portion of the $Cel^+$ cells were converted to $Cel^-$ mutants in a flask with slanted baffles. The conversion ratio of $Cel^+$ cells to $Cel^-$ mutants was strongly re-lated to the production of bacterial cellulose independently from the cell growth.
남은 음식물을 갈아 액상으로 만든 기질을 이용하여 생효모를 함유한 생균제제사료(probiotics)를 생산하기 위해 효모의 호기적 액상발효를 시도하였다. 기질의 영양조성의 최적화를 위해 미리 진탕배양한 결과를 토대로 액상의 남은 음식물 기질에 우레아($0.5g/{\ell}$), 당밀($4g/{\ell}$), O-phosphate($0.4g/{\ell}$), yeast extract($1g/{\ell}$)를 첨가하여 2리터 용량의 발효기를 이용하여 Kluyveromyces marxianus와 Aspersillus. oryzae를 접종하여 통기발효 시킨 결과 12시간 내에 $1.4{\times}10^{10}/liter$의 생균효모농도를 얻을 수 있었다.
춘천시 근교의 토양으로부터 glutathione 생산균주를 분리, 동정하고 glutathione 생산 최적조건을 검토하였다. 분리된 균주는 동정을 행한 결과 Candida sp.로 판단되었다. Glutathione 생산을 위한 Candida sp의 배지조성은 fructose 1.0, yeast extract 4.0, NaCl 0.04, thiamine-HCl5{\mu}g/ml$ 및 L-cysteine 0.04 이었으며 온도는 $25^{\circ}C$, pH 6.0에서 36시간 배양하였을 때 glutathione 생산이 가장 좋았다. Glutathion 생산을 위한 최적배지에서 Candida sp. 균주에의한 glutathione 생산량은 $92{\mu}g/ml$로 YM 배지보다 약 2.5배 정도 증가하였다.
A biosurfactant-producing microorganism was isolated from activated sludge by enrichment culture when grown on a minimal salt medium containing n-hexadecane as a sole carbon source. This microorganism was identified as Pseudomonas sp. and it was named Pseudomonas sp. EL-G527. It's optimal culture condition is 2% n-hexadecane, 0.2% NH$_4$NO$_3$, 0.3% KH$_2$PO$_4$, 0.3% $K_2$HPO$_4$, 0.02% MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$, 0.0025% CaCk$_2$ㆍ6$H_2O$, 0.0015% FeSO$_4$ㆍ7$H_2O$ in 1$\ell$ distilled water and initial pH 7.0. Cultivation was initiated with a 2% inoculum obtained from starter cultures grown in 30 $m\ell$ of the same medium in 250 $m\ell$ flask. They were cultivated at 3$0^{\circ}C$ in reciprocal shaking incubator and the highest biosurfactant production was observed after 4 days.
In this study, the effect of elicitors such as yeast extract (YE), methyl jasmonate (MeJA) and salicylic acid (SA) on the accumulation of eurycomanone in Eurycoma longifolia cell cultures were investigated. Suspension cells of E. longifolia was cultured in Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 30 g/L sucrose, 1.25 mg/L naphthaleneacetic acid (NAA) and 1 mg/L kinetin at a shaking speed of 120 rpm. Elicitors were added in the culture at different concentrations and times to stimulate eurycomanone accumulation in the Eurycoma longifolia cells. Eurycomanone content was determined by HPLC with a C18 column, flow rate of 0.8 mL/min, run time of 17.5 min, and a detector wavelength of 254 nm. The stationary phase was silica gel and the mobile phase was acetonitrile: $H_2O$. Non-elicited cells were used as the control. The study showed the effect of different elicitor concentrations, YE at 200 mg/L, MeJA at $20{\mu}M$ and SA at $20{\mu}M$ stimulated high production of eurycomanone. In which, treatment of $20{\mu}M$ MeJA after 4 days of culture resulted in the highest accumulation of this compound (17.36 mg/g dry weight), approximately 10-fold higher than that of untreated cells (1.70 mg/g dry weight).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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