To compare of serum antibody titers using ELISA and HI, serum samples were collected from 100 breeders and their progeny 550 broilers. The breeders and broilers were vaccinated with infectious bronchitis(IB)- and Newcastle disease(ND)-viruses according to general vaccination program. The antibodies in serum samples against IB and ND viruses were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) using commercial ELISA kit and hemagglutination inhibition(HI) test. Geometric mean titer(GMT) of ELISA and In titers were monitored from 1-day-old to 35-day-old broilers and compared to those of breeder chickens. The antibody titers of breeders vaccinated with ]B virus showed 47,800, ELISA and 7.2, HI, respectively. Progeny chicks, 1-day-old, vaccinated with IBV showed high antibody titers than those of breed chickens. Those chicks were maintained protective antibody levels until 11-day-old. From 14-day-old, the antibody level decreased below protective levels. In ND, breeders serum antibody titers ELISA and Eiu were 30,200 GMT and 8.7 HI titer, respectively. On 1-day-old chicks, antibody levels was decreased to half in ELISA(16,270) compared with those of breeders, but In titers was 7.4. Progeny broilers, protective antibody level was maintained until 14- day-old by ELISA, but at 11-day-old by HI titers. After then, ND antibody titer was continuously decreased underdefense level. These result indicated that the ELISA method be more sensitive than HI titration to detect serum antibody level for IBV and NDV.
A porcine parvovirus inactivated vaccine was prepared and inoculated to 7 piglets and also 8 guinea-pigs, and their serum antibodies were titrated. Twenty-two field serum samples of unvaccinated sows were also tested by SN and HI methods. It was observed that SN test was superior over HI test. Therefore, it is suggested that the SN test could well be used in the detection of serum antibody for PPV in vaccinated pigs.
용혈 지수(hemolysis index)는 생화학 장비에서의 용혈을 위한 반정량 지표이다. 용혈 지수의 특성이 상업 플랫폼마다 다르기 때문에 용혈 지수의 표준화 또는 일치화는 현재 되어 있지 않다. 진단검사의학에서 일치화(harmonization)는 측정 절차와 상관없이 동일한 결과와 동일한 해석을 할 수 있는 능력을 말한다. 임상 환자의 혈액 중에서 무작위로 추출한 40개의 검체를 인위적으로 체외 용혈(in vitro hemolysis)시킨다. 혈액 자동화 장비인 XE-2100 (Sysmex, Japan)에서 측정된 혈청 헤모글로빈을 기준으로 검체의 혈청을 0~300 mg/dL 사이에서 20 mg/dL 차이로 각각을 희석시킨다. 희석된 혈청 헤모글로빈을 생화학 자동화 장비 Hitachi-7600 (Hitachi, Japan)으로 측정하여 용혈 지수와 혈청 헤모글로빈을 평가하였다. 용혈 지수와 혈청 헤모글로빈은 선형성을 보였으며 용혈 지수 1은 대략 혈청 헤모글로빈 20 mg/dL 정도였다. 용혈 거절 기준을 결정하기 위해 용혈 지수를 세 그룹으로 나눈다: 용혈 지수 0~1, 용혈지수 4~6, 용혈 지수 9~15. 또 다른 임상 검체 40개의 검체를 Hitachi-7600 (Hitachi, Japan)로 각각의 임상 검사 종목을 측정한 후, 각각의 검체를 주사기의 피스톤을 앞 뒤로 움직여 인위적인 체외 용혈을 시키고 Hitachi-7600 (Hitachi, Japan)로 측정하였다. 세 그룹 사이의 임상 검사 종목의 용혈로 인한 백분율 차이(percentage difference)를 ANOVA 또는 Kruskal-Wallis test 분석하였다. 사후 검정에서 용혈 지수 0~1인 그룹과 용혈지수 5~6인 그룹 사이에 유의한 차이가 나는 종목들은 Glucose, creatinine, total protein, AST, direct bilirubin, uric acid, phosphorus, triglyceride, LDH, CPK, magnesium, potassium이였다. 많은 임상 검사 종목들이 용혈지수 4~6인 그룹과 참조 그룹인 용혈지수 0~1인 그룹 간에 통계적으로 유의미한 차이를 보이기 때문에 용혈 기준은 대략 용혈지수 5 (혈청 헤모글로빈 100 mg/dL)가 적합하다 판단된다.
Feline panleukopenia virus (FPV) causes leukopenia and severe hemorrhagic diarrhea, killing 50% of naturally infected cats. Although intact FPV can serve as an antigen in the hemagglutination inhibition (HI) test, an accidental laboratory-mediated infection is concern. A non-infectious diagnostic reagent is required for the HI test. Here, we expressed the viral protein 2 (VP2) gene of the FPV strain currently prevalent in South Korea in a baculovirus expression system; VP2 protein was identified by an indirect immunofluorescence assay, electron microscopy (EM), Western blotting (WB), and a hemagglutination assay (HA). EM showed that the recombinant VP2 protein self-assembled to form virus-like particles. WB revealed that the recombinant VP2 was 65 kDa in size. The HA activity of the recombinant VP2 protein was very high at 1:215. A total of 143 cat serum samples were tested using FPV (HI-FPV test) and the recombinant VP2 protein (HI-VP2 test) as HI antigens. The sensitivity, specificity, and accuracy of the HI-VP2 test were 99.3%, 88.9%, and 99.3%, respectively, compared to the HI-FPV test. The HI-VP2 and HI-FPV results correlated significantly (r = 0.978). Thus, recombinant VP2 can substitute for intact FPV as the serological diagnostic reagent of the HI test for FPV.
Canine respiratory coronavirus (CRCoV) is a significant pathogen that causes respiratory diseases in dogs, collectively known as a canine infectious respiratory disease. The virus is highly contagious and exhibits high seroprevalence worldwide. Currently, bovine coronavirus (BCoV) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits are used to detect CRCoV antibodies. However, BCoV-ELISA kits cannot differentiate between infections caused by BCoV and those caused by CRCoV. In this study, we evaluated the hemagglutination inhibition (HI) test for CRCoV by comparing it with the virus neutralization (VN) test. Subsequently, we evaluated the seroprevalence of CRCoV in 383 dog serum samples collected from South Korea utilizing the HI test. The HI test for CRCoV showed a strong correlation with the VN test (R = 0.83, p < 0.001). The analysis of seroprevalence revealed that 52.2% (95% confidence interval [CI], 47.2%-57.1%) of the Korean dog serum samples were positive. The seroprevalence exhibited varied with age, with a positivity rate of 43.9% in dogs under 1 year of age and 66.7% in dogs aged 3 to 5 years (odds ratio, 2.54; 95% CI, 1.43-4.59). In conclusion, the HI test to monitor CRCoV antibody proved to be closely related to the VN test. Furthermore, over half of the dogs in Korea tested positive for CRCoV antibodies. These findings contribute to a better understanding of the sero-epidemiology of CRCoV.
A serological survey was performed to establish basic data for the prevalence of antibodies to some major diseases of domesticated boar serum samples from January to December 2000. Sera collected in breeding farms in Gyeongbuk province were tested for Aujeszky's disease virus(ADV), Porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), Porcine parvovirus(PPV), Japanese encephalitis virus (JEV), Bordetella bronchiseptica(B bronchiseptica), Mycoplasma ; APP), Toxoplasma, and Brucella. There was no antibody to ADV in domesticated boars serum samples detected by Anti-ADV-gpI assay kit. Sero-positive samples to PRRS by IFA were 0.9%(3/330) The HI titers to PPV ranged variously from less than 10 to over 1,280. Two hundred ninety-four out of 330 tested sera showed HI titer of less than 10. In HI test to JEV, 90.3% of the sera (298/330) were below 10. The majority of the serum samples had low prevalence of the antibody B bronchiseptica. ELISA titers to M hyopneumoniae ranged variously from $\leq$ 10 to $\geq$ 1,280. Antibody titers to A pleuropneumoniae type 2(APP2) and type 5(APP5) were 58.2% and 52.7%, respectively, and the tested samples showing ELISA antibody titers of less than 20. There was no significant geographical difference between APP2 and APP5 in this study. In the antibody test of Toxoplasma, 11.5%(38/330) were positive and samples were all negative in sera test of Brucella.
Japanese encephalitis(JE) shows its explosive epidemicity in the temperate zone of Asia but little is known on the overwintering mechanism. One of the hypotheses on the overwintering mechanism is that the virus overwinters in the hibernating animals. There has been no report on the proliferation of JE virus(JEV) or antibody formation in the snakes. The purpose of this experiment is to explore the mutual relationship between JEV and snake and to clarify whether JEV proliferates and induce antibody formation in snakes. Three species of non-poisonous common snakes were employed. Precipitation test was carried out after injecting calf serum and, HI and neutralization tests were done by injecting JEV into the snakes. The gamma globulin fraction of pre- and post-injection serum were compared by paper chromatography. According to the results, precipitating antibody reaction to calf serum could be observed only at $4^{\circ}C$. It was failed to demonstrate HI antibody formation but neutralizing antibody could be detected in one of the 9 snakes. Although antibody could not be detected in test-tube, tile result of paper chromatography shows the remarkable increase of gamma globulin fraction after the injection. Above results are strongly indicating the antibody formation in the snakes.
세계적으로 가장 출현빈도가 높은 혈청형인 마사추셋형 IBV를 발육란에서 증식시킨 다음 요막강액을 채취, 바이러스를 농축 정제하여 항원으로 사용하고 야외 IBV감염계군에서 채취한 혈청중 HI반응에 의해 양성 및 음성혈청을 선발, 표준혈청으로 사용하여 ELISA를 시도한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. 정제항원은 ELISA plate의 well당 40ng 단백량으로 coating하였을 때 높은 P/N치를 나타냈고 혈구응집항원은 well당 1.2~2.5 HA unit로 coating하였을 때 정제항원과 유사한 결과를 보였다. 2. 항원의 coating시 온도와 시간은 37$^{\circ}C$, 1시간이나 4$^{\circ}C$에 12~16시간 처리하였을 때 P/N에서 유의성 있는 차이를 보이지 않았으며 항원을 건조시켜 4$^{\circ}C$에 1개월 보관하여도 항원성의 변화를 인정할 수 없었다. 3 제품이 다른 3종류의 plate에서 항원 coating의 차이를 비교한 결과 제품간에 항원 coating의 균일도와 농도에 있어서 뚜렷한 차이가 인정되었다. 4. 음성혈청희석배수 1:50에서도 비특이 반응은 인정되지 않았으며 가경혈청은 1:100희석했을 때 높은 P/N치를 보여서 screen용 희석배수로 적당하였다. 5. Substrate처리한 후 발색 정도는 15분 이후에는 일정하여 30분까지 변화가 없었으며 이때 발색정지제를 처리하였을 때 치리직후부터 4시간까지도 흡광도에 있어서 유의성 있는 차이가 인정되지 않았다. 6. 74개의 혈청에 대해 ELISA에 의한 P/N치와 HI항체가와의 상관관계는 r=0.42였으며 HI가 2$^{6}$이상, P/N치 1.4이상을 기준으로 하였을 때 양성 case의 일치율은 98.7%였다. 1. 백신접종 시험계군에서 ELISA와 HI test에 의한 항체 소장 비교에서는 10주째를 제외하고는 양 test에서 유사한 추이를 보였다.
Incidence of infectious bronchitis virus(IBV) infection in vaccinated breeder chickens was investigated by hemagglutination inhibition(HI)test for IBV using Mass 41 antigen. In the breeder chickens with the reduced egg production. chalky deposit. wrinkled
This study was performed to verify the effect of modified live virus vaccine against canine parvovirus (CPV) infection. Serum hemagglutination inhibition (Hl) test, histopathological and immunohistochemical techniques and polymerase chain reaction were used. The results were as follows: 1. During the experimental terms after vaccination, serum Hl titer was stable. Geometric mean titer (GMT) after the 1st vaccination was 280. After virulent CPV was challenged, GMT was 1,306. 2. After challenge by virulent CPV, the vaccinated group was not shown clinical signs and gross and histopathological findings. 3. After challenge by virulent CPV, the vaccinated group was not detected viral antigens in the small intestine immunohistochemically. 4. After challenge by violent CPV, the vaccinated group was not shown virus shedding in feces. In conclusions the overall results confirmed that modified live virus vaccine was effective on prevention of canine parvovirus infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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