• Title/Summary/Keyword: secondary embryogenesis

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제초제 저항성 유전자에 의한 인삼의 형질전환 (Genetic Transformation of Panax ginseng with Herbicide Resistant Gene)

  • 양계진
    • 식물조직배양학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.353-357
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    • 2001
  • 인삼의 자엽과 callus에 Biolistic system을 이용한 비선택성 제초제인 bialaphos에 대한 내성을 갖게 하는 PAT 유전자의 형질전환효율 향상 및 형질전환체의 유전분석에 관한 실험을 수행하였다. 자엽의 경우에는 형질전환율이 약했지만 callus의 경우에는 target distance 9 cm, rupture disk-macro-carrier gap distance를 1/3"로 했을 때 가장 양호한 형질전환 결과를 보였다. 형질전환된 인삼식물체에서 PAT 및 NPT 유전자의 존재 여부를 확인하기 위해서 PCR을 수행한 결과 정상 식물체서는 전혀 PCR product가 형성되지 않은 반면 형질전환체 모두에서 PAT (약 300 bp)와 NPT (약 800 bp) 유전자의 band를 확인하여 각각의 유전자가 삽입되어 PAT 및 NPT IIgene이 도입된 형질전환체임을 확인할 수 있었다. 있었다.

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A Screen for Genetic Loci on the X Chromosome Required for Body-Wall Muscle Development during Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

  • 이덕규;신지연;안주홍
    • Animal cells and systems
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    • 제1권2호
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    • pp.355-361
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    • 1997
  • We have screened available chromosomal deficiencies on the X chromosome for genetic loci whose zygotic expression is required for body-wall muscle development during embryogenesis in Caenorhabditis elegans. Previously, it had been reported that no sign of muscle development was detected in nullo-X embryos arrested at an early stage of embryogenesis. Based on this observation, it has been suggested that genetic loci exist on the X chromosome whose zygotic expression is essential for body-wall muscle formation. In order to identify such myogenic loci, 9 chromosomal deficiencies covering approximately 45% of the X chromosome have been tested. Homozygous embryos from these deficiency strains were collected and terminal phenotypes of arrested embryos were observed by Nomarski microscopy. As a secondary assay, monoclonal antibodies against two myosin heavy chain (MHC) isoforms, the products of the myo-3 and unc-54 genes, were used to detect body-wall muscle differentiation. All the homozygous deficiency embryos were positively stained with both MHC antibodies and muscle twitching movement was observed in most cases. Combined with previously analyzed deficiencies, our deficiency screen has covered approximately 70% of the X chromosome. We conclude that the regions covered by the available deficiencies on the X chromosome do not include any myogenic locus required for body-wall muscle formation. Alternatively, the possibility that nullo-X embryo may not form body-wall muscle due to a general failure to differentiate during embryogenesis remains to be tested.

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고구마 정단분열조직으로부터 체세포배발생 및 식물체 재분화에 미치는 casein의 영향 (Effect of Casein on Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration in Shoot Apical Meristem Explants of Sweetpotato (Ipomoea batatas L.))

  • 신공식;노경희;이연희;박용환;서석철
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제31권1호
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    • pp.67-72
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    • 2004
  • 고구마의 정단배양에 의한 배발생 캘러스로부터 대량증식 체계가 개발되어져 왔다. 고구마 정단분열조직은 1mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에서 배양 4주 경에 최적의 배발생 캘러스가 형성되었다. 또한 2,4-D가 첨가된 배지에 casein을 첨가함으로써 고구마 신천미 품종의 배발생 효율을 최고 90%이상으로 2.4-D단독처리보다 현저하게 증가시켰다. 배발생 캘러스로부터 체세포배의 유도는 식물생장조절제가 제거된 MS 기본배지에서 효과적으로 형성되었으며 300∼500mg/L casein을 첨가한 배지에서는 더 높은 형성 빈도와 녹색의 단단한 체세포배가 발달하였다. 한편, 2mm이하의 체세포배로부터 이차 배발생 캘러스 형성 및 체세포배의 발달이 100∼300mg/L casein의 첨가에 의해 증가하였다 배발생 캘러스에서 얻어진 체세포배는 직접 MS기본배지에서 쉽게 각 기관이 형성되었으며, 발근과 shoot를 발달시켜 정상적인 식물체로 하여 토양에 성공적으로 옮겨 심을 수 있었다.

Somatic embryogenesis from the axillary meristems of peanut (Arachis hypogaea L.)

  • Singh, Shweta;Hazra, Sulekha
    • Plant Biotechnology Reports
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    • 제3권4호
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    • pp.333-340
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    • 2009
  • Developmental anomalies in the plumule meristem of peanut (Arachis hypogaea L.) somatic embryos resulted in poor shoot differentiation and reduced plant recovery. Existing meristems with caulogenic potential have never been tested for embryogenesis in peanut. The present experiment was designed to test the mature zygotic embryo axis derived plumule with three meristems for somatic embryogenesis. Embryogenic masses and embryos developed from the caulogenic meristems in the axils. Exposure of 2 weeks in primary medium with $90.5{\mu}M$ 2,4-D suppressed the shoot tip differentiation temporarily which then regained the ability to form the shoot on withdrawal of 2,4-D. Exposure of 4 weeks in primary medium with $90.5{\mu}M$ 2,4-D suppressed the shoot tip differentiation irreversibly. No shoot formation was noted from the tips in any of the cultures which were in secondary medium with $13.6{\mu}M$ 2,4-D. Development of somatic embryos directly from axillary meristems was confirmed histologically. Conversion frequency of these embryos was 11%. Thus, in this report, we describe a method to obtain somatic embryos from the determined organogenic buds of the axillary meristem, by culturing the nodal explant vertically on embryo induction medium. It also displays the possibility of obtaining both embryogenic and organogenic potential in two parts of the same explant simultaneously. The possibility of extending this approach for genetic transformation in in vivo system through direct DNA delivery or Agrobacterium injection in meristems can also be explored. Using Agrobacterium rhizogenes, we have demonstrated the possibility of gene transfer in the axillary meristems of seed-derived plumule explant.

고려인삼으로부터 Squalene Synthase 유전자의 Cloning 및 형질전환체 특성

  • 심주선;손화;양덕춘
    • 고려인삼학회:학술대회논문집
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    • 고려인삼학회 2004년도 추계 학술대회 및 정기총회
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    • pp.50-52
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    • 2004
  • Introduce of gene connected with disease and transformation system of ginseng, Squalene systhase(PSS) gene cloned from and disease resistant gene were carried out for expression and transformation of plant using Agrobacterium. PSS of 35S-35S-AMV-PSS-Tnos, has been constructed which were mobilized into Agrobacterium tumefaciens strain MP 90 disarmed Ti-plasmid. PSS gene were introduced into the binary vector pRD 400. The transgenic ginseg plants were propagated using repetitive secondary embryogenesis and introduced NPTII and PSS genes of the transgenic ginseng were successfully indentified by the PCR and survival test on the medium.

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신생아 호흡곤란을 유발한 비인강 기형종 1례 (A Case of Airway Obstruction Secondary to Neonatal Nasopharyngeal Dermoid Teratoma)

  • 김민식;선동일;이정학;조승호
    • 대한기관식도과학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.90-95
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    • 1999
  • Dermoids are rare disease which arise during embryogenesis. They are the most common variety of teratomas occurring in the head and neck region and most arsies in the nasopharynx or oropharynx. They are invariably benign and derived from only two germinal layers, ectoderm and mesoderm. They usually present as repiratory distress and swallowing difficulty at or soon after birth. Treatment consists of surgical resection. We recently experienced a case of a neonatal nasopharyngeal dermoid which led to severe airway obstruction and feeding difficulty and necessitated the endotracheal intubation.

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야생 현호색 (Corydalis remota for. peatinata)의 꽃자루로부터 체세포배 발생과 소식물체형성 (Plantlet Formation and Somatic Embryogenesis from the penduncle explants of wild Corydalis remota for. peatinata)

  • 천우재;이대원
    • 식물조직배양학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.15-19
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    • 1999
  • Corydalis remota for. peatinata의 꽃자루에서 캘러스를 유도한 후 MS기본배지에 생장조절물질을 첨가하여 체세포 배발생 및 재분화를 시도하였다. 생장조절 물질에 따른 캘러스 유도율을 비교하면 2,4-D 2.0 mg/L 에 zeatin 2.0 mg/L를 혼용 처리한 배지에서 아주 양호한 캘러스 유도 및 생장율을 나타냈다. 식물생장조절물질 또는 호르몬 첨가에 의한 체세포 배의 발생율은 광조건에서 cytokinin류의 농도가 0.5mg/L 단독 첨가한 배지에서 가장 높았다. 또한 발생된 부정배중 MS기본배지에 zeatin 1.0mg/L을 단독처리한 경우가 가장 쌍자엽형성율이 높은 것으로 나타났다. 또한 2,4-D를 미량 첨가하고 cytokinin류를 혼용첨가한 배지나 BAP를 단독 처리한 배지에서는 소식물체의 배지 접지면인 뿌리부분에 활발한 2차 배발생이 나타났다.

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알팔파 캘러스로부터 형성된 이차체세포배의 형태가 유식물 발달에 미치는 영향 (Effect of Embryo Morphology on Plant Development in Secondary Somatic Embryogenesis of Alfalfa)

  • 원성혜;이병현;조진기
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제19권4호
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    • pp.297-302
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    • 1999
  • 알파파의 재분화된 식물체로부터 다량의 이차체세포배를 유도하였으며, 이들 체세포배로부터 재분화되는 식물체의 획득빈도를 향상시키기 위하여, 캘러스에서 유래된 배의 형태 및 형태별 유식물 분화 양상에 관한 실험을 수행하였다. 2,4-D 농도에 따라 체세포배의 형성에 차이를 나타내었는데, 생장조절제가 첨가되지 않았거나, 2,4-D가 $0.1mg/{\ell}$ 첨가된 배지에서 형성된 배는 약 57% 이상이 2개의 자엽을 갖은 정상배였으며, 2,4-D 농도가 증가할수록 정상체세포배의 출현빈도는 감소하였고, 2,4-D $4mg/{\ell}$에서는 10%만이 정상배로 나타났다. 배의 형태에 따른 발아율 및 유식물 분화양상을 조사한 결과, 2개의 자엽을 갖는 정상배의 경우는 발아율이 85%로 가장 높았으며, 정상식물체로 발육되는 비율도 80%로 나타났다. 그러나 자엽이 1개 또는 3~4개인 배는 정상적으로 발육되는 식물체의 비율이 10% 이하로 매우 낮았으며, 자엽이 5개인 배와 나팔모양의 배는 정상적인 식물체로 발달하지 못하였다.

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장뇌삼의 2차 체세포배 발생을 통한 식물체 유도 및 순화 (Plant Regeneration via Secondary Somatic Embryogenesis and Acclimatization in Panax ginseng)

  • 이수광;김지희;강호덕
    • 한국산림과학회지
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    • 제97권1호
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    • pp.127-133
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    • 2008
  • 본 연구는 장뇌삼(Panax ginseng)의 효율적인 증식과 성공적인 토양 순화의 최적 조건을 구명하기 위해 수행되었다. 장뇌삼의 자엽을 시료로 사용하여 체세포배를 유도한 후, 유도된 체세포배를 발아시켜 얻은 자엽을 다시 시료로 사용하여 2차 체세포배를 유도함으로써 효율성을 증가시켰다. 2차 체세포배의 형성율은 MS 배지의 경우 약 53%이고, WPM 배지의 경우 약 48%인 것으로 나타나 1차 체세포 배의 형성율인 MS 배지와 WPM 배지의 각각 83%, 73%에 비해 약간 떨어지는 것으로 나타났다. 형성된 체세포배는 $GA_3$가 첨가된 WPM 배지에서 발아시키고, 무기염류의 양을 반감시키고, $GA_3$가 첨가된 WPM 배지에서 신장시킨 후, 무기염류를 줄인 SH 배지에서 대기 순화와 무당배양의 처리에 따른 줄기와 뿌리길이, 생존율 차이를 조사하였다. 기내에서 대기 순화와 무당배양 혼용처리 시 가장 정상적인 유식물체로 성장 시킬 수 있었고, 뿌리길이도 가장 길었으며, 생존율 또한 75%로써 가장 높은 생존율을 보였다.

체세포배발생에 의한 한국 고구마 품종의 고빈도 식물체 재분화 (High frequency Somatic Embryogenesis and Plant Regeneration in Tissue Cultures of korean Cultivar Sweet Potatoes)

  • 민성란;유장렬;노태홍;김칠현;주정일
    • 식물조직배양학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.157-160
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    • 1994
  • 국내 두 품종의 고구마를 대상으로 경단분열조직 배양에 의한 체세포배발생과 이들로부터 식물체 재분화 체계를 확립하였다. '부여재래' 나 '율미'의 경단분열조직 절편을 1mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에서 배양하여 6주후에 80% 이상의 절편으로부터 배발생 캘러스를 얻었다. 이 캘러스를 0.1 mg/L 24-D와 0.1 mg/L kinetin이 첨가된 배지에 옮겼을때 '부여재래' 와 '율미'의 체세포배 발생률이 각각 71% 및 63%로 다른 처리에 비해 현저히 높았다. 형성된 체세포배를 상하로 이등분하여 1 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS배지에 치상하였을 경우 품종에 관계없이 길이가 짧은 체세포배의 상반부에서 이차배가 더 많이 발생하였다. 이들 체세포배는 MS 기본배지에서 90% 이상이 완전한 식물체로 발달하였다. 이러한 결과는 우리가 이전에 확립하였던 고구마의 경단분열조직으로부터의 체세포배발생 방법(SABRAO J 21:93-101)이 광범위한 고구마 계통에 적용될 수 있음을 시사한다.

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