For effective screening research, to isolate many different strains not duplicated would be essential. Three kinds of media were used for selective isolation of actinomycetes to test the reisolation frequency. Sixty species were isolated on Bennet's agar, 47 were on glycerol-asparagine agar and 77 were on humic acid-vitamin agar from 10 domestic soil samples. All of these isolates were identified to the genus level based on morphological characters and examined the sameness on each medium. The reisolation frequency between two different media was 10% or so(8.3~16.7%) and among three different media was 25% or so(22.1~27.7%).
Purpose: The purpose of this study was to examine the health information media use, health interest, and health promoting behaviors of nursing college students, and the influence factors of health promoting behaviors. Methods: Participants were 144 nursing students in D city. Data collection was conducted from August 21st to 30th, 2019. Data were collected with structured questionnaires and analyzed using t-test, ANOVA, Pearson's correlation analysis, and multiple regression analysis. Results: There were positive correlations between the health information media use and health interest with health promoting behaviors. Factors affecting health promoting behaviors of nursing college students were grade, health information media use, and health interest, which explained 28.2% of the variance. Conclusion: Characteristics of nursing students should be taken into consideration to improve their abilities for screening of health and using correct health information. In addition, health promotion programs should be developed and implemented for increasing nursing students' health interests.
Background: It has been proven that an individuals health behavior is determined through a series of processes. This study aimed to assess the stages of adoption of breast cancer screening, and to identify the factors relating to progress through these stages. Materials and Methods: There were 202 female participants aged 20-59 years who were living in Chungbuk, South Korea. They were informed of the study purpose and agreed to participate. Data were collected from October 2010 to January 2011 by assessing the breast cancer screening stage, health beliefs, socio-demographic factors, and other facilitating factors. The participant current stage of adoption of breast cancer screening was classified using the Precaution Adoption Process Model (PAPM), and the various PAPM stages were compared with each other to identify factors likely to determine progress between stages. The data were analyzed using the ${\chi}^2$-test, ANOVA, Duncan test, and multiple logistic regression. Results: Approximately half of all participants were not on-schedule for breast self-examination and mammography (unaware, 9.4% and 11.4%, unengaged, 8.4% and 5.0%, undecided, 20.3% and 17.8%, decided not to act, 1.5% and 1.0%, decided to act, 13.4% and 15.3%, respectively). The factors likely to determine the progress from one stage to another were age, marital status, exposure to media information about breast cancer, self-efficacy, and perceived severity. Conclusions: These results suggest that it is necessary to develop a tailored message for breast cancer screening behavior.
Anti-hepatocyte growth factor (anti-HGF) monoclonal antibodies (mAbs) are potential therapeutics against various cancers. Screening for high-producer clones is a time-consuming and complex process and is a major hurdle in the development of therapeutic mAbs. Here, we describe an efficient approach that allows the selection of high-producer Chinese hamster ovary (CHO) cell lines producing the novel anti-HGF mAb SFN68, which was generated previously by immunizing HGF bound to its receptor c-Met. We selected an SFN68-producing parental cell line via transfection of the dihydrofolate reductase-deficient CHO cell line DG44, which was preadapted to serum-free suspension culture, with an SFN68-expression vector. Subsequent gene amplification via multiple passages of the parental cell line in a methotrexate-containing medium over 4 weeks, followed by clonal isolation, enabled us to isolate two cell lines, 2F7 and 2H4, with 3-fold higher specific productivity. We also screened 72 different media formulated with diverse feed and basal media to develop a suboptimized medium. In the established suboptimized medium, the highest anti-HGF mAb yields of the 2F7 and 2H4 clones were 842 and 861 mg/l, respectively, which were about 10.5-fold higher than that of the parental cell line in a non-optimized basal medium. The selected CHO cell lines secreting high titers of SFN68 would be useful for the production of sufficient amounts of antibodies for efficacy evaluation in preclinical and early clinical studies.
Ectomycorrhizal (ECM) mushrooms play a major role in plant growth promotion through symbiotic association with roots of forest trees. They also provide an economically important food resource to us and therefore they have been studied for their artificial cultivation for decades in Korea. We have secured bio-resources of ECM mushrooms from Korean forests and performed their physiological studies. To investigate the cultural characteristics, the fungi were cultured under different conditions (medium, temperature, pH of the medium, inorganic nitrogen source). More than 90% of total 160 strains grew on three solid media (potato dextrose agar, PDA; sabouraud dextrose agar, SDA; modified Melin-Norkrans medium, MMN). The rate of mycelial growth on malt extract agar (MEA) was lower than those of three media (PDA, SDA, MMN). None of the Tricholomataceae strains grew on MEA. Many strains of ECM mushrooms were able to grow at the temperature range of $15{\sim}25^{\circ}C$ on PDA, while they showed poor growth at $10^{\circ}C$ or $30^{\circ}C$. In particular, the growth rates of both Gomphaceae and Tricholomataceae were significantly lower at $10^{\circ}C$ than at $30^{\circ}C$. The optimal pH of many strains was pH 5.0 when they cultured in potato dextrose broth (PDB). Fifty-seven percent of tested strains grew well on medium containing ammonium source than nitrate source. Many strains of Tricholomataceae showed a notable growth on ammonium medium than nitrate medium. Twenty-three percent of strains preferred nitrate source than ammonium source for their mycelial growth. The production and activity of two enzymes (cellulase and laccase) by ECM fungi were also assayed on the enzyme screening media containing CMC or ABTS. Each strains exhibited different levels of enzymatic activities as well as enzyme production. The number of laccase-producing strains was less than that of cellulase-producing strains. We found that 77% of tested strains produced both cellulase and laccase, whereas 2% of strains did not produce any enzymes. The morphological characteristics of mycelial colony were also examined on four different solid media. Yellow was a dominant color in mycelial colony and followed by white and brown on all culture media. ECM mushrooms formed mycelial colonies with a single or multiple colors within a culture medium depending on the strains and culture media. The most common shape of mycelial colony was a circular form on all media tested. Other families except for Amanitaceae formed an irregular colony on MMN than PDA. All strains of Tricholomataceae did not form a filamentous colony on all media. The pigmentation of culture media by mycelial colonies was observed in more than 50% of strains tested on both PDA and SDA. The degree of pigmentation on PDA or SDA was higher than MMN and brown color was dominant than yellow color. The production of exudates from mycelial colony was higher on PDA than MMN. Brown exudates were mainly produced by many strains on PDA or SDA, whereas transparent exudates were mainly produced by strains on MMN. We observed the mycelial colonies with a single or multiple textures in just one culture plate. Wrinkled or uneven colony surfaces were remarkably observed in many strains on PDA or SDA, while an even colony surface was observed in many strains on MMN. Sixty percent of Tricholomaceae strains formed wrinkled surface on PDA. However, they did not form any wrinkle on MMN plate. Cottony texture was observed in mycelia colonies of many strains. Velvety texture was often observed in the mycelial colonies on SDA than PDA and accounted for 60% of Suillaceae strains on SDA.
In the current study, a total of 135 enterococci strains from different sources were screened for the presence of the enterocin-encoding genes entA, entP, entB, entL50A, and entL50B. The enterocin genes were present at different frequencies, with entA occurring the most frequently, followed by entP and entB; entL50A and L50B were not detected. The occurrence of single enterocin genes was higher than the occurrence of multiple enterocin gene combinations. The 80 isolates that harbor at least one enterocin-encoding gene (denoted "Gene+ strains") were screened for antimicrobial activity. A total of 82.5% of the Gene+ strains inhibited at least one of the indicator strains, and the isolates harboring multiple enterocin-encoding genes inhibited a larger number of indicator strains than isolates harboring a single gene. The indicator strains that exhibited growth inhibition included Listeria innocua strain CLIP 12612 (ATCC BAA-680), Listeria monocytogenes strain CDC 4555, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 29213, S. aureus ATCC 6538, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium strain UK-1 (ATCC 68169), and Escherichia coli BAC 49LT ETEC. Inhibition due to either bacteriophage lysis or cytolysin activity was excluded. The growth inhibition of antilisterial Gene+ strains was further tested under different culture conditions. Among the culture media formulations, the MRS agar medium supplemented with 2% (w/v) yeast extract was the best solidified medium for enterocin production. Our findings extend the current knowledge of enterocin-producing enterococci, which may have potential applications as biopreservatives in the food industry due to their capability of controlling food spoilage pathogens.
선별마커로써 Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 7962 유래의 $\beta$-galactosidase 유전자를 포함하는 Lactococcus용 셔틀/발현 벡터 pWgall3T를 제조하여 Escherichia coli DH5$\alpha$와 고. Lactis MG1363내로 도입하였다. 이들 형질 전환체들은 X-gal을 포함하는 배지에서 파란색의 표현형을 보임으로써 쉽게 확인할 수 있었다. 또한, L. lactis MG1363 형질전환체로부터 $\beta$-galactosidase 활성을 측정한 결과 기존에 $\beta$-galactosidase를 활성을 지닌 L. lactis ATCC 7962에 비해 glucose를 포함하는 M17배지에서 4배정도 높은 활성을 보임으로써 선별마커로써의 효율성을 나타내었다. pWgal13T는 $\beta$-galactosidase 유전자 외에 L. lactis Wg2유래의 replicon과 외래 유전자의 발현을 위한 L. lactis ssp. cremoris LM0230의 promoter P13C, terminator를 포함하고 있다. 이 벡터의 이용가능성을 확인하기 위하여 외래 유전자 EGFP유전자를 P13C 아래에 삽입하여 E. coli와 L. iactis에서 발현을 확인하였다. 이 연구에서 제조된 Lactococcus용 발현 벡터 pWgal13T는 E. coli와 L. lactis에서 외래 유용 유전자를 생산을 위해 이용 할 수 있을 것이다.
Shin, Jong-Hwan;Han, Joon-Hee;Park, Hyun-Hoo;Fu, Teng;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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제35권6호
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pp.575-584
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2019
Colletotrichum acutatum is a species complex responsible for anthracnose disease in a wide range of host plants. Strain C. acutatum KC05, which was previously isolated from an infected pepper in Gangwon Province of South Korea, was reidentified as C. scovillei using combined sequence analyses of multiple genes. As a prerequisite for understanding the pathogenic development of the pepper anthracnose pathogen, we optimized the transformation system of C. scovillei KC05. Protoplast generation from young hyphae of KC05 was optimal in an enzymatic digestion using a combined treatment of 2% lysing enzyme and 0.8% driselase in 1 M NH4Cl for 3 h incubation. Prolonged incubation for more than 3 h decreased protoplast yields. Protoplast growth of KC05 was completely inhibited for 4 days on regeneration media containing 200 ㎍/ml hygromycin B, indicating the viability of this antibiotic as a selection marker. To evaluate transformation efficiency, we tested polyethylene glycol-mediated protoplast transformation of KC05 using 19 different loci found throughout 10 (of 27) scaffolds, covering approximately 84.1% of the entire genome. PCR screening showed that the average transformation efficiency was about 17.1% per 100 colonies. Southern blot analyses revealed that at least one transformant per locus had single copy integration of PCR-screened positive transformants. Our results provide valuable information for a functional genomics approach to the pepper anthracnose pathogen C. scovillei.
Choi, Kwang-Hwan;Yoon, Ji Won;Kim, Minsu;Jeong, Jinsol;Ryu, Minkyung;Park, Sungkwon;Jo, Cheorun;Lee, Chang-Kyu
한국축산식품학회지
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제40권4호
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pp.659-667
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2020
Muscle stem cells isolated from domestic animals, including cows and pigs, were recently spotlighted as candidates for the production of alternative protein resources, so-called cultured meat or lab-grown meat. In the present study, we aimed to optimize the in vitro culture conditions for the long-term expansion of pig muscle stem cells via the screening of various signaling molecules. Pig muscle stem cells were collected from the biceps femoris muscles of 3-d-old crossbred pigs (Landrace×Yorkshire×Duroc, LYD) and cultured in minimum essential medium-based growth media. However, the pig muscle stem cells gradually lost their proliferation ability and featured morphologies during the long-term culture over two weeks. To find suitable in vitro culture conditions for an extended period, skeletal muscle growth medium-2, including epidermal growth factor (EGF), dexamethasone, and a p38 inhibitor (SB203580), was used to support the stemness of the pig muscle stem cells. Interestingly, pig muscle stem cells were stably maintained in a long-term culture without loss of the expression of myogenic marker genes as determined by PCR analysis. Immunostaining analysis showed that the stem cells were capable of myogenic differentiation after multiple passaging. Therefore, we found that basal culture conditions containing EGF, dexamethasone, and a p38 inhibitor were suitable for maintaining pig muscle stem cells during expanded culture in vitro. This culture method may be applied for the production of cultured meat and further basic research on muscle development in the pig.
구전(WOM: Word of Mouth)는 주변 사람들에게 상품에 대한 경험을 입에서 입으로 전달하는 현상을 말하며 소셜 미디어의 발전으로 온라인 구전(eWOM: Electronic Word of Mouth) 형태로 발전하였다. 구전 효과의 중요성으로 인해서 대부분의 기업들의 자사의 상품이나 서비스에 대한 온라인 구전에 촉각을 세우고 있으며, 특히 영화와 같은 경험재의 경우에는 그 영향력이 더욱 크다. 본 연구에서는 영화 커뮤니티에 대한 사회 네트워크 분석을 통해서 영화 흥행성과 지표인 매출에 미치는 영향요인을 규명하고자 한다. 영화 흥행성과 연구들에서 주요하게 다루어진 영화에 대한 구전의 크기(volume)와 방향성(valence)과 같은 구전 요인들을 추가하여, 구전 네트워크의 중심성 척도를 영향 요인에 고려하였다. 구전의 크기, 방향성, 그리고 3가지 중심성 척도(연결 중심성, 매개 중심성, 근접 중심성)의 최종 영화 매출에 영향 관계를 가설로 설정하였다. 제시한 연구 모형을 검증하기 위하여 대표적인 온라인 영화 커뮤니티 사이트인 IMDb(Internet Movie Database)에서 영화 구전 데이터를 수집하였고, Box-Office-Mojo사이트에서 영화 매출 데이터를 수집하였다. 2012년 9월부터 1년 동안, 주간 Top-10에 포함된 적이 있는 영화들을 대상으로 하였으며, 총 103개의 영화가 선정되어 이 영화들에 대한 메타 데이터와 커뮤니티 데이터가 수집되었다. 영화 커뮤니티 네트워크는 평가자들간의 댓글 관계를 기초로 구축하였다. 본 연구에서 사용한 3가지 중심성 척도는 사회 네트워크 분석 도구인 NodeXL을 사용하여 계산되었으며, 각 영화별 커뮤니티 참여자들의 중심성 척도의 평균값을 활용하였다. 가설 검증의 사전 분석을 위한 상관관계 분석에서는 3가지 중심성 척도간에 상관 관계가 높은 것으로 파악되어서, 각각에 대하여 별도로 회귀분석을 수행하였다. 분석 결과, 기존 연구와 일관성 있게 구전의 크기와 방향성은 영화 성과지표인 최종 매출에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 파악되었다. 또한 구전 네트워크 내의 참여자 매개중심성 평균은 영화의 최종 매출에 영향을 미치는 것으로 파악되었다. 하지만 연결중심성과 근접중심성은 최종 매출에 영향을 주지 못하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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