• 한국식품과학회지
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• 제35권4호
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• pp.556-560
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• 2003

CP4 EPSPS에 대한 특이항체(다클론 및 단클론)을 이용하여 확립한 전보의 sandwich ELISA 분석법을 원료 콩의 GMO 분석에 적용가능한 가를 검토하였다. 원료 콩은 수입산 47점, 국산 20점을 분석하였다. 그 결과, 수입산 콩의 CP4 EPSPS 분석치는 크게 두 군으로 나뉘어 높은 군$(39.1{\pm}13.5{\mu}g/g,\;n=33)$과 낮은 군$(2.6{\pm}1.2{\mu}g/g,\;n=14)$으로 나타났다. 수입산 콩의 GMO 비율은 약 70.2%로 나타났다. 한편, 국산 콩의 CP4 EPSPS의 함량 $(0.9{\pm}0.5{\mu}g/g,\;n=20)$은 아주 낮은 것으로 나타났고 이는 non-GMO인 것으로 판단되었다. 콩나물의 경우에 GM과 non-GM 간 CP4 EPSPS의 차이를 보이고 있었고 GM 콩나물의 자엽부에서 뿌리보다 높은 CP4 EPSPS의 함량을 보여주고 있다. 국산 콩으로 만든 콩나물의 경우 CP4 EPSPS의 함량은 아주 낮은 것으로 나타나 GM과 non-GM 콩간의 구분이 가능하였다. 또한 PCR에 의해 sandwich ELISA가 정확하다는 것을 보여주었다. 이상과 같이 sandwich ELISA 방법은 신속, 간편하게 많은 콩 시료의 GMO 여부를 판단할 수 있음을 보여주었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제12권1호
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• pp.23-27
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• 2005

분리 대두단백질과 옥수수 전분을 혼합한 복합 필름의 막 특성을 이용하여 메추리알을 코팅하고 저장성 향상 및 품질 유지를 증대시키고자 하였으며 복합 필름을 복합조리식품(샌드위치)에 적용하여 식빵의 품질을 유지하기 위한 저장 실험을 하였다. 메추리알에 필름 용액을 코팅시킨 후 저장 중 Haugh unit yolk index, 중량변화를 측정하였다. $25^{\circ}C,\;50\%\;RH$로 조절된 incubator에서 20일간 저장된 대조구와 복합 필름으로 코팅된 메추리알의 Haugh unit, yolk index를 측정한 결과 코팅 처리된 메추리알이 감소율이 적었으며, 중량 변화에서도 복합 필름으로 코팅된 메추리알이 대조구 보다 더 낮은 중량 감소를 나타내었다. 샌드위치 사이에 복합 필름을 넣고 부재료의 수분이 식빵으로 이동하는 현상을 알아본 결과 12시간 후 복합 필름은 $5\%$의 중량 증가를 나타내었으며 대조군은 $31\%$ 중량 증가를 보여 복합필름이 대조군 보다 수분 이동을 억제시킬 수 있음을 알 수 있었다. 그러므로 SPI/CS 복합 필름 용액을 이용하여 난류에 코팅하면 제품의 품질 유지 및 저장성을 향상시킬 수 있을 것으로 기대되고 복합조리 식품에 적용할 경우 부재료의 수분이동을 막아 빵의 눅눅해짐으로 인한 품질 저하와 저장성을 향상시킬 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국식품과학회지
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• 제35권3호
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• pp.366-372
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• 2003

유전자재조합 콩의 Agrobacterium sp. CP4 유래 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase(CP4 EPSPS)를 편리하고 경제적으로 검출하고자 효소면역측정법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)을 개발하였다. CP4 EPSPS에 대해 특이적인 다클론 및 단클론항체를 생산하였다. 다클론 항체의 경우 sandwich ELISA(검출한계, 0.03${\mu}g/mL$)는 competitive indirect ELISA(1${\mu}/mLg$)보다 CP4 EPSPS의 검출감도가 낮았다. 생산된 단클론항체 3종의 CP4 EPSPS에 대한 인식부위는 Mab1과 Mab2는 서로 같은 부위를 Mab3는 다른 부위를 인식하는 것으로 나타났다. 한편, 다클론항체 및 단클론항체를 조합하여 실시한 sandwich ELISA의 검출감도를 서로 비교하였다. 그 결과, 항원 포획단계에서 단클론항체 Mab2를 코팅하고 다클론항체-horseradish peroxidase(HRP) conjugate를 사용하였을 때 가장 양호한 검출감도(검출한계, 0.02${\mu}g/mL$)를 나타내었다. 본 연구에서 개발한 sandwich ELISA는 제초제 저항성 유전자재조합 콩의 분석에 적용가능할 것으로 생각된다.

• 한국축산식품학회지
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• 제24권2호
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• pp.176-181
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• 2004

우유내 Salmonella를 검출하기 위한 Sandwich ELISA의 특이성을 조사하였다. Sandwich ELISA에 사용한 항체들은 OMP 분획을 닭에 면역주사하여 얻은 IgY와 OMP 분획을 gel filtration하여 얻은 분자량 40,000의 OMP를 토끼에 면역 주사하여 얻은 토끼 IgG를 사용하였다. Immnoblot assay에서 IgY는 분자량 6,000의 OMP에 강하게 반응하였으며 토끼 IgG는 분자량 40,000, 35,000과 6,000의 OMP들에 강하게 반응하였다. IgY와 토끼 IgG는 Salmonella typhimurium의 다른 단백질에도 반응하였다. Competitive ELISA에서 IgY가 Salmonella의 두 개 균주에 대해 특이성을 나타냈으며 Eshcherchia coli와 Yersinia enterocolitica에 의하여서는 반응을 나타내지 않았다. 우유에 세균을 첨가하여 실시한 sandwich ELISA에서 Salmonella typhimurium 2균주가 가장 높은 흡광도를 보였다. Salmonella cholerasuis 균주들은 상대적으로 흡광도가 낮았으며 이루 일부 Salmonella cholerasuis 균주들은 비 Salmonella 균주들과 차이가 없었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제13권5호
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• pp.794-799
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• 2003

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the rapid detection of Fusarium species, known as harmful fungi in food. One of the hybridoma cell lines (lB8) which produced a monoclonal antibody (Mab) specific to Fusarium extracellular polysaccharide (EPS) was screened and the Mab was produced and purified. A detection limit of the sandwich ELISA against F. moniliforme EPS was $0.001\;\mu\textrm{g}/ml$ in the standard curve. Among the 59 strains tested, most Fusarium species showed hight reactivity with Mab lB8, even when the culture broths were diluted 100,000 times. On the other hand, the other genera, except A. versicolor and Trichoderma viride, had no reactivity. When 1 to $100\;\mu\textrm{g}$ of F. moniliforme EPS was spiked into rice, potato, and mandarine orange, the average recoveries were 151%, 84%, and 94%, respectively, determined by sandwich ELISA. The correlation coefficients between the EPS levels determined by sandwich ELISA and the dry mycelial weight of the liquid culture of F. moniliforme, as well as between the EPS and colony forming unit in solid culture of potato, were 0.97 and 0.91, respectively.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제9권6호
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• pp.764-772
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• 1999

To develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting mold, we produced anti-mold polyclonal antibodies by immunizing extracellular polysaccharide (EPS) of Aspergillus flavus or Penicillium citrinum in rabbits subcutaneously. Using the purified antibody (Ab) and Ab-HRP conjugate, a sandwich ELISA for EPS was established. The standard curve of the ELISA showed the detection limit for P citrinum EPS to be $0.003{\;}\mu\textrm{g}/ml$. The cross-reactivities of the anti-P citrinum EPS Ab toward components of P citrinum such as EPS, liquid, and solid culture mycelium were 100, 10.5, and 0.58%, respectively, and those toward components of A. flavus such as EPS, liquid and solid culture mycelium, and spore were 300, 0.67, 0.29, and 0%, respectively. When the reactivities toward culture broths of 59 mold strains were tested by the sandwich ELISA, most of the Aspergillus (16 of 18) and Penicillium (14 of 16) strains along with one of the two Cladosporium strains gave positive signals in the culture broths even when diluted 1,000 fold, while the rest of species such as Fusarium, Absidia, Alternaria, and Candida gave negative signals. When the water extracts of 30 corn samples were analyzed by the sandwich ELISA, the EPS in the com could be detected in the concentration range of $0.1-1.6{\;}\mu\textrm{g}/g$.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권2호
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• pp.385-389
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• 2004

The antibody-mix sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (Ab-mix sELlS A) system was developed in order to simultaneously detect the extracellular polysaccharide (FPS) of Aspergillus, Penicillium, or Fusarium species using one detection system. The detection limit and detection range of the Ab-mix sELISA towards EPS of Penicilliun citrinum were not changed, and those towards Fusarium moniliforme EPS were changed a little compared to that of individual sandwich ELISA [9, 10]. The fungal culture filtrates of Aspergillus and Penicillium species showed nearly similar reactivity towards Ab-mix sELISA as that of sELISA using the MAb lB8 alone [9]. Also, the fungal culture filtrates of Fusarium species showed nearly the same reactivity towards Ab-mix sELISA as that of sELISA using the MAb lB8 alone [10]. Thus, this ELISA system showed that the three genera of molds, Aspergillus, Penicillium, or Fusarium, which are three major important molds producing mycotoxins in food or agricultural commodities, could be detected at the same time, using one detection system.

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권4호
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• pp.600-604
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• 2001

감마선 조사된 새우의 신속한 판별을 위한 방법으로 갈색새우의 TPM을 항원으로 하여 개별적으로 생산된 M-IgG와 P-IgG를 이용한 Sandwich ELISA를 분석법으로 확립하였다. M-IgG를 항원 포획을 이한 coating 항체로 사용하고, P-IgG를 포획된 TPM에 대한 반응항체로 사용하였을 때, 12.5에서 50$\mu\textrm{g}$/mL의 농도 범위에서 TPM을 정량할 수 있었다. 감마선 조사된 새우의 TPM 농도는 선량에 의존하며 감소하였고, 감마선 조사와 가열 또는 냉동 등의 병용 처리에서도 선량에 의존하며 감소하였다. 이 결과는 면역분석기법의 하나인 Sandwich ELISA가 감마선 조사된 새우의 검지법으로 이용될 수 있다는 가능성을 나타내었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권1호
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• pp.133-137
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• 2006

Wheat gluten-chitosan composite film (WGCCF) can prevent moisture migration and enhance the antimicrobial properties of gluten in intermediate-moisture foods like sandwiches. To mimic the structure of actual sandwich-type products we developed multi-layer food models, where moisture content and water activity differ. Water activity gradients direct moisture migration and therefore determine product characteristics and product stability. A 10% wheat gluten film-forming solution was mixed with chitosan film-forming solution (0-3%, w/w) and evaporated to generate WGCCF. Addition of 3% chitosan enhanced the mechanical properties of the film composite, lowered its water vapor permeability, and improved its ability to protect against both, Streptococcus faecalis and Escherichia coli, in a 24 hr sandwich test (reduction of 1.3 and 2.7 log cycles, respectively, compared to controls). Best barrier and antimicrobial performance was found for 3% chitosan WGCCF at pH 5.1. Film of this type may find application as barrier film for intermediate-moisture foods.

• 한국축산식품학회지
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• 제18권1호
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• pp.27-34
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• 1998

This study was carried out to evaluate of the microbial and sensory quality of ready-made hamburger and sandwich. Initial total plate count of hamburger for establishment A and B were 1.2$\times$102 cfu / g and 3.4$\times$102 cfu / g, respectively, and for establishment C was 7.9$\times$104 cfu / g. After 48 hour storage at 1$0^{\circ}C$, total plate count of hamburger for establishment A and B increased to 1.2$\times$104 cfu / g and 6.8$\times$103, respectively, and for establishment C increased to 1.2$\times$107 cfu / g. Initial total plate count of sandwich for establishment A and B were 3.2$\times$102 cfu / g 7.9$\times$102 cfu / g, respectively, and for establishment C was 1.1$\times$105 cfu / g. After 48 hour storage at 1$0^{\circ}C$, total plate count of hamburger for establishment A and B increased to 8.1$\times$103 cfu / g and 2.3$\times$104, respectively, and for establishment C increased to 4.4$\times$108 cfu / g. No E. coli, Salmonella, Vibrio, and Staphylococcus aureus were detected under simulated storage conditions. There was no significant changes in pH, acid value, and volatile nitrogen number under simulated conditions. In sensory evaluation of hamburger and sandwich, sensory score was lowered by increase of total plate count.