For the regeneration of periodontal tissues, the microenvironment for new attachment of connective tissue fibers should be provided, At this point of view, cementum formation in root surface plays a key role for this new attachment. This study was performed to figure out which factor promotes differentiation of cementoblast Considering anatomical structure of tooth, we selected the cells which may affect the differentiation of cementoblast - Ameloblast, OD11&MDPC23 for odontoblasts, NIH3T3 for fibroblsts and MG63 for osteoblasts. And OCCM30 was selected for cementoblast cell line. Then, the cell lines were cultured respectively and transferred the conditioned media to OCCM30. To evaluate the result, Alizarin red S stain was proceeded for evaluation of mineralization. The subjected mRNA genes are bone sialoprotein(BSP), alkaline phosphate(ALP) , osteocalcin(OC), type I collagen(Col I), osteonectin(SPARC ; secreted protein acidic and rich in cysteine). Expression of the gene were analysed by RT-PCR, The results were as follows: 1. For alizarin red S staining, control OCCM30 didn't show any mineralized red nodules until 14 days. But red nodules started to appear from about 4 days in MDPC-OCCM30 & OD11-OCCM30. 2. For results of RT-PCR, ESP mRNAs of control-OCCM30 and others were expressed from 14 days, but in MDPC23-OCCM30 & OD11-OCCM30 from 4 days. Like this, the gene expression of MDPC23-OCCM30 & OD11-OCCM30 were detected much earlier than others. 3. For confirmation of odontoblast effect on cementoblast, conditioned media of osteoblasts(MG63) which is mineralized by producing matrix vesicles didn't affect on the mineralized nodule formation of cementoblasts(OCCM30). This suggest the possibility that cementoblast mineralization is regulated by specific factor in dentin matrix protein rather than matrix vesicles. Therefore, we proved that the dentin/odontoblast promotes differentiation/mineralization of cementoblasts. This new approach might hole promise as diverse possibilities for the regeneration of tissues after periodontal disease.
The axillary buds of 15-year-old Tilia amurensis were cultured on Saito and Ide (IS), Murashige and Skoog (MS) media and woody plant medium (WPM) to establish an effective micropropagation method. Five levels of 6-benzylaminopurine (BAP) were tested. On IS medium and WPM addition of 1.0/l BAP enhanced shoot development and shoot elongation, whereas addition of 0.5/l BAP was effective on MS medium. A better results were obtained from WPM with 1.0/l BAP and MS with 0.1/l BAP. Developed shoots were subcultured on each basal media but with 0.2/l BAP, Multiple shoots were almost doubled in a month. Root formation could be enhanced at higher concentration of indole-3-butyric acid (IBA). Better rooting rate (83.3%) was achieved on a half-strength MS medium with 3.0 /l IBA. Regenerated plantlets were successfully transferred to soil. To investigate the clonal variation in shoot development and shoot elongation by axillary bud culturing, seven plus tree clones were tested, Clonal variation in tissue culturability among plus trees was recognized by the Duncan's multiple range test at the 5% level. Kang Won No. 12 showed the best response on WPM with 1.0/l BAP.
Tae Hyun Ha;Jun-Hyung Lee;So Young Yi;Si-Yong Kang
Korean Journal of Plant Resources
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v.37
no.4
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pp.431-438
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2024
Hops enhance beer flavor and bitterness, acting as a preservative. In recent years, the booming trend of craft beer has prompted the introduction of foreign hop varieties for cultivation and production in South Korea. This study focuses on developing efficient in vitro culture condition of the hop (Humulus lupulus L.) variety 'Cascade' for treatments of plant growth regulators, i.e. IAA and Cytokinin. Using Auxin IAA and Cytokinin 2iP, Zeatin, BAP, and TDZ on MS medium as plant growth regulators, the experiment involved removing three nodes from the shoot apex. In vitro hop culture showed the highest shoot proliferation rate when only IAA was added, with approximately 21% higher compared to the combination with Cytokinin. Notably, IAA 0.1 mg/L + BAP 1 mg/L resulted in a superior shoot proliferation rate of around 91%. IAA 0.1 mg/L + BAP 1 mg/L was advantageous for shoot elongation. Callus induction occurred with TDZ, while control or IAA-only conditions exhibited shoot and root growth. Cytokinin addition led to callus formation and increased weight. Assessing survival and soil adaptation during in vitro hop seedling acclimatization involved maintaining near 100% humidity initially, gradually reducing it over three weeks. When transferred outdoors, 9 out of 10 seedlings acclimated successfully, confirming a 90% acclimatization rate.
To evaluate the effect of horticultural therapy (HT) on the emotional improvement of depressed patients, computer-based heart rate variability (HRV) was compared with self-report scale (SRS) known as existing subjective evaluation method. SRS included four test areas: mental stress scale (MSS), physical stress scale (PSS), Beck anxiety inventory (BAI), and Beck depression inventory (BDI). HRV was itemized into four parameters: standard deviation of the N-N intervals (SDNN), square root of mean squared difference of successive N-N intervals (RMSSD), total power (TP), and low-frequency/high-frequency ratio (LF/HF ratio). Thirty patients with depression at the same mental hospital participated in this study. 15 patients of the treatment group received HT once a week for three months, but the control group did not during the same period. As a result, the emotional improvement in treatment group was clearly identified through HRV as well as SRS. The significant difference was shown at three test areas (MSS, BAI, and BDI, $p$ < 0.001) in SRS and at one parameter (total power, $p$ < 0.05) in HRV. There was noticeable increase in SDNN, RMSSD, and LF/HF ratio in treatment group after HT activity, but no significant difference. Although all parameters of HRV did not show significance, the possibility of HRV as an objective evaluation method to HT was recognized in this study. These results also implied that HT was efficient in the mental and physical regeneration of the depressed patients in both subjective and objective evaluation methods.
The objectives of this study were to compare soil physical and chemical properties and early growth of Pinus densiflora and Larix kaempferi seedlings in harvested Larix kaempferi and Pinus rigida stands. Study stands were located in harvested L. kaempferi (Yeongju) and Pinus rigida (Wonju) plantations. Seedlings of L. kaempferi (1-1) and P. densiflora (1-0) were planted in April, 2008, Yeongju. Also, seedlings of L. kaempferi (1- 1) and P. densiflora (1-1) were planted with the density of 3,000 seedlings/ha in April, 2010, Wonju. We analyzed soil physical and chemical properties and the relative growth rate of seedlings using diameter at root collar and seedling height. Soil organic matter, total nitrogen and available phosphorus concentrations in harvested P. rigida stand were significantly higher than those in harvested L. kaempferi stand. The relative growth rate of P. densiflora seedlings with former stands were not significantly different. The relative growth rate of diameter at root collar of L. kaempferi seedling in harvested P. rigida stands were significantly higher than that in harvested L. kaempferi stand. Higher concentrations of organic matter, total nitrogen and available phosphorus in harvested P. rigida stand was probably positively affect to the early growth of seedlings.
Kim, Ji-Ah;You, Xiang-Ling;Ahn, Chang-Ho;Lee, Jae-Seon;Choi, Yong-Eui
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.96
no.1
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pp.83-88
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2007
Micropropagation of Ulmus davidiana Planch was established via adventitious shoot formation from the segments of adventitious roots. Adventitious roots were produced directly from root segments of seedlings on a 1/2 SH medium plus various concentrations of IBA. The maximum growth of adventitious roots was observed in the presence of 2.0 mg/L IBA. After the segments of adventitious roots were cultured on various cytokinins (zeatin, 2-iP, BA, kinetin) and cytokinins plus auxin (IBA), formation of adventitious shoot was investigated. Among cytokinin treated, kinetin was the most effective on both adventitious shoot induction and number of shoots. Especially, 2.0 mg/L kinetin was the best to increase adventitious shoot induction (95.8%) and a number of shoots (8.4). Adventitious shoots were rooted on 1/2 WPM medium and the plantlets were acclimated 100% on composed soil (peatmoss : vermiculite 1 : 1).
Martin, Kottackal Poulose;Zhang, Chun-Lai;Hembrom, Manoj Emanuel;Slater, Adrian;Madassery, Joseph
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.2
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pp.163-169
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2008
Roots of Ophiorrhiza prostrata D. Don serve as a rich source of camptothecin (CPT), an anticancer drug. Because of the large-scale collection of its roots, the plant has become a threatened species. The present study accomplishes the induction of adventitious roots as a means for the production of CPT as well as for the large-scale propagation of this anticancer drug plant using leaf and internode explants. The biomass yield and CPT content of adventitious roots induced from different explants were compared to roots developed on ex vitro rooted stem cuttings. Adventitious roots were produced on half-strength Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with $10.74{\mu}M$${\alpha}-naphthaleneacetic$ acid and $2.32{\mu}M$ kinetin at mean fresh weights of 0.753, 0.739 and 0.748 g roots from leaf, internode and shoot, respectively. CPT yield from in vitro derived roots after 50, 80 and 120 days of incubation (0.028, 0.06 and 0.1% dry weight, respectively) was not significantly different from those harvested at the same age from ex vitro rooted (0.03, 0.06 and 0.13%, respectively) stem cuttings. CPT from subcultured roots derived from solid (0.08%) medium was lower than from suspension culture medium (0.12%). Subsequent cultures of the adventitious roots showed a stable production of CPT (0.16%). The yield of CPT from 360-day-old plant-derived roots was 0.19%. Elicitation using methyl jasmonate and acetyl salicylic acid exhibited no enhancement in CPT yield. In vitro propagation through direct shoot regeneration was achieved from the adventitious roots upon transfer to MS medium with $8.87{\mu}M$$N^6-benzyladenine$ (BA) and $2.46{\mu}M$ indole-3-butyric acid (IBA) with a mean of 21.2 shoots per culture in 50 days. The shoots upon subculture on medium having the same level of BA and IBA underwent rapid proliferation. The shoots transferred to field conditions after in vitro rooting exhibited 95% survival. Adventitious root induction, from leaf and internode explants, enables the feasible production of CPT as well as the large-scale rapid propagation of this species which can safeguard it from extinction.
In order to investigate the changes and characteristics of biochemical metabolic substances of soybean tissue culture during the cultural period, immature cotyledons were detached form the plant on 15th days after flowering and cultured in vitro for 3 weeks. The cultures were classified into embryogenic(EC) and non-embryogenic callus(NEC). A part of the EC lines were subcultured for another 3 weeks and classified into root forming(RFC), and shoot forming cultures(SFC). Another part of the EC lines were used for isolation of protoplasts, which were subsequently cultured in vitro for 4 weeks. The cultures were classified into embryogenic(PEC) and non-embryogenic callus(PNEC) derived from the protoplasts. The cultures of EC and PEC lines showed higher phenylalanine content and lower methionine content than those of NEC and PNEC. At organ differentiation stage, both cultures showed the content of aspartic acid decreased, while the other amino acids increased as a whole. The protein pattern analysis of the cultures revealed that EC and NEC lines contained distinctive polypeptides, with mass of ca. 18KD for EC and ca. 22KD for NEC respectively. The EC and PEC lines also showed high activity of peroxidase isozyme A(piA), while the RFC and SFC lines showed that of peroxidase isozyme B(piB).
Bacillus sp. YBL-7 which had been isolated from ginseng root-rot suppressive soil was able to antagonize Fusarium solani causing ginseng root-rot by their antibiotic substance. In order to develop multifunctional antagonist on Bacillus sp. YBL-7 as a biocontrol agent against Fusarium salam', optimal conditions for protoplast transformation system of Bacillus sp.YBL-7 by the vector plasmid pE194 were investigated. The protoplasts of Bacillus sp. YBL-7 were obtained at best efficiency by treatment with 200${\mu}g$/ml of lysozyme in the pH 7.0 of SMM buffer for 90 minutes at $40^{\circ}C$. The cell wall of the protoplast was regenerated on the agar plate containing 1.2% agar and 0.7 M mannitol. Under the best condition for protoplast formation and regeneration, the optimal transformation was achieved with 40% polyethylene glycol (M.W. 4000) treatment for 10minutes. The vector plasmid pE194 showed the best transformation frequency at 5$\mu$g/ml of final concentration. The pE194 was very stable over 80% in the transformants.
Park, Cheol-Hong;Lee, Chang-Seop;Lee, Sang-Ho;Lee, Nan-Young
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.32
no.4
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pp.657-661
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2005
Various chemotherapeutic agents have been recommended for pulpotomy of primary teeth, and there are formocresol, ferric sulfate, and calcium hydroxide. Of those, formocresol has fixation effect of pulp tissue and high clinical success rate, so it is most commonly used agent. But formocresol has strong cytotoxic effects, thus many articles reported displacement and loss of permanent successor, amelogenesis imperfecta, mutation by general absorption, possibility of cancer induction. Recently, it has been reported that leakage by imperfect temporary sealing when FC-soaked cotton was inserted into the root canal caused necrosis of surrounding tissues. and that necrosis of alveolar bone related to the use of excessive formocresol. In this case, 2nd primary molar of upper left jaw was treated using formocresol in local clinic, but extracted because of lasting pain. Furthermore, symptoms didn't disappear so patient was refered to us. The patient was 8-year-old male, had foul odor from oral cavity and circular alveolar bone necrosis around the permanent successor' crown. Thus sequestrectomy was operated and observed through 19 months after operation, we found normal root development of permanent successor but no complete regeneration of alveolar bone defect and attached gingiva. Lesion of periodontal tissues by formocresol is irreversible, so we have to confirm the indication in using formocresol and pay attention to complete temporary sealing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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