Gingival fibroblasts are embedded in an extracellular matrix. The matrixs have influence on the development, polarity, and behavior of nearby cells. The major component of periodontal extracellular matrix is a glycosaminoglycan. The glycosaminoglycan are large carbohydrates that are composed of repeating disaccharide units and exist in three main form: dermatan sulfate, chondrotitin sulfate, heparan sulfate. The purpose of present study is to examine the biologic effects of glycosaminoglycan on human gingival fibroblast. Human gingival fibroblasts were supplemented with each glycosaminoglycan, and cellular attachment and proliferation was determined by MTT assay. Dermatan sulfate and chondroitin sulfate did not stimulate the attachment and proliferation of human gingival fibroblasts, but heparan sulfate increased the proliferation and attachment in a time- and dose dependent manner. These results indicated that heparan sulfate seems to have a high potential for gingival regeneration and root surface attachment.
Orostachys japonicus A. Berger is a Perennial herbaceous plant which has been traditionally used as an anti-inflammatory agent to treat hepatitis and as an anticancer agent. The objective of this study was 1) to establish and proliferate in vitro plant of O. japonicus 2) to induce indirect somatic embryogenesis from O. japonicus. General calli and embryogenic calli in all ranges of 2,4-D and BA combination, were induced and were best at 22% (embryogenic cell) in 5.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA combination. Embryogenic cell line was maintained by subculture at 2 week intervals and transferred to solid and liquid medium for embryo formation. In solid medium culture, globular and heart shaped embryos were observed in MS medium containing 5.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA combination. The number of embryos was 6.5 per 0.5 g cell, and then the immature embryos transferred to MS basal medium for embryo development. In a suspension culture of embryogenic cells, globular and heart shaped embryos were emerged in MS medium supplemented with 3.0 mg/L 2,4-D and 0.3 mg/L BA combination after 10 days of incubation. The embryo formation rate was about 33% by suspension culture. The ratio of embryo germination was 60.9%, on the other side, the root formation rate was 74.3% in 1/2 MS continuously.
치근흡수 연구에서 치아재식을 위한 적당한 동물모델을 찾는일은 대단히 중요하다. 본 실험에서는 쥐 대구치의 발치 및 재식을 통해서 치근흡수가 발현되는 모양을 관찰했다. 모두 20마리의 쥐(30일생)에게 0.4% ${\beta}$-APN(aminoproprionitrile)가 포함된 분말용쥐사료를 5일간 먹인후 케타민 마취후 상악좌우측 제일대구치를 손상을 최소화하여 발치 하였다. 발거된 쥐치아는 0.02M Tris-HCl로 표면처리하여 부착치근막을 제거한후 파라핀팍스로 치근단을 밀폐 하여 재식하였다. 재식후 1, 2, 4, 6, 8 및 12일이 경과된 후 심장관혈을 통하여 쥐를 희생시킨후 3% glutaraldehyde가 포함된 EDTA에서 탈회한후 Epon 포매 하였다. 모든 시편은 유리칼을 사용하여 1미크론 두께로 절편한후 veronal acetate buffer에 녹인 1% toluidine blue로 염색하였다. 파치세포양 세포에 의한 치근흡수는 재식 5-7일후 처음 관찰되었다. 재식 12일후에는 치근 전체에 걸친 광범위한 치근흡수가 관찰되었다. 이상의 결과 ${\beta}$-APN을 포함한 쥐사료 식이요법은 쥐 상악제일대구치의 발치와 재식을 용이하게 하여 일정한 치근흡수를 발현시키는데 많은 도움이 된 것으로 판단되었다.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1995.06a
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pp.40-56
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1995
During the past two decades, China has seen her great progress in plant biotechnology. Since the Chinese market of herb medicine is huge, while the plant resources are shrinking, particular emphasis has been placed in plant tissue and cell cultures of medicinal plants, this includes fast propagation, protoplast isolation and regeneration, cell suspension cultures and large scale fermentation. To optimize culture conditions for producing secondary compounds in vitro, various media, additives and elicitors have been tested. Successful examples of large scale culture for the secondary metabolite biosynthesis are quite limited : Lithospermum ery throrhizon and Arnebia euchroma for shikonin derivatives, Panax ginseng, P. notoginseng, P. quinquefolium for saponins, and a few other medicinal plants. Recent development of genetic transformation systems of plant cells offered a new approach to in vitro production of secondary compounds. Hairy root induction and cultures, by using Ri-plasmid, have been reported from a number of medicinal plant species, such as Artemisia annua that produces little artemisinin in normal cultured cells, and from Glycyrrhiza uralensis. In the coming five years, Chinese scientists will continue their work on large scale cell cultures of a few of selected plant species, including Taxus spp. and A. annua, for the production of secondary metabolites with medicinal interests, one or two groups of scientists will be engaged in molecular cloning of the key enzymes in plant secondary metabolism.
Digitalis purpurea L. is a medicinal herb and have been used to congestive heart failure, mycocardial infarction, edema, angina etc. A protocol has been developed for in vitro propagation of adventitious shoot buds directly from leaf segments of D. purpurea Leaf explants of D. purpurea directly formed shoot buds when cultured on a MS medium supplemented with $2\;mg/l$ BA and $0.1\;mg/l$ IAA for 5 weeks. Adventitious shoots were multiplied by subculturing on the $B_5$ medium and shoot elongation was developed by subculturing on the WPM medium. Root formation from the shoot regenerated was achieved on MS basal medium containing 1 mg/ IBA.
Optimal protocol for efficient genetic transformation has been defined to aid future strategies of genetic engineering in pigeon pea with agronomically important genes. Transgenic pigeonpea plants were successfully produced through Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation method using cotyledonary node explants by employing defined culture media. The explants were co-cultivated with A. tumefaciens strain C-58 harboring the binary plasmid, pCAMBIA-1301 [con-ferring $\beta$-glucuronidase(GUS) activity and resistance to hygromycin] and cultured on selection medium (regeneration medium supplemented with hygromycin) to select putatively transformed shoots. The shoots were then rooted on root induction medium and transferred to pots containing sand and soil mixture in the ratio of 1:1. About 22 putative TO transgenic plants have been produced. Stable expression and integration of the transgenes in the putative transgenics were confirmed by GUS assay, PCR and Southern blot hybridization with a transformation efficiency of over 45%. Stable integration and expression of the marker gene has been confirmed in the TO and T1 transgenics through PCR, and Southern hybridization.
Kim, Hyun-Soon;Kang, Hyeon-Jung;Lee, Young-Tae;Lee, Seung-Yeob;Nam, Jeong-Kwon;Kim, Tae-Soo;Rha, Eui-Shik;Jin, Il-Doo
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.47
no.1
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pp.62-67
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2002
An efficient system of rice microspore culture could contribute to the production of genetically modified rice. The microspores were isolated by mechanical or shed methods. The number of microspores per 100 anthers isolated at uninucleate stage was higher than (or similar to) those at binucleate stage in isolation method with pestle or spatular, but microspore divisions were not easily observed on both stages. On the other hand, pollen division in shed pollen culture was observed more frequently at uninuclear than at binuclear stage. Cold pretreatment at 1$0^{\circ}C$ for 10 days resulted in the best multicellular division to produce microcalli at 12.5% efficiency in shed microspores. Heat shock at 33$^{\circ}C$ for one hour before or after pollen shedding enhanced cell division and callus formation. Out of twelve green regenerants, two were haploids and ten were diploids based on the chromosome analysis of root tips. The size of stoma was 12$^{m}$ m in haploids and 15 ${\mu}{\textrm}{m}$ in diploids determined by scanning electron microscope (SEM).
Park, Jeong-Min;Choi, Byung-Son;Lee, Seok-Cho;Kim, Hyung-Seop
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.26
no.1
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pp.133-142
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1996
Ten intrabony defects in 10 patients were treated by flap surgery including root surface debridement and placement of an expanded polytetrafluoroethylene(ePTFE) membrane. The membranes were removed after 4-6 weeks. This study was performed to examine the retrived ePTFE membrane by scanning electron microscopy(SEM) for bacterial contamination and adherent connective tissue elements, and to compare it with clinical conditions. The cervical portion of the membrane, which in most cases had become partially exposed to the oral cavity, had a bacterial deposit. Small bacterial colonies and a scatter of single cells in some instances extended into the apical portion of the membrane. Fibroblast-like cells, erythrocytes and fibrous structures were seen in the apical portion of the membrane. Outer surface of membrane tends to more bacterial contamination than inner surface(p<0.01), and upper portions more than lower portions(P<0.01). Comparison of ultrastructural findings and clinical conditions revealed that extent of bacterial contamination of the membrane correlated with gingival inflammation and extent of membrane exposure, but it was not significant statistically. The results suggested that gingival inflammation and membrane exposure affect periodontal regeneration by the use of ePTFE membrane.
An efficient protocol was established for high frequency somatic embryogenesis through a callus culture of Coelogyne cristata. The best frequency of callusing was obtained from a PLB segment (3-5 mm) cultured on MS medium supplemented with coconut water (CW) and a combination of both 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ of 2,4-D and BA. When the calli were sub-cultured on the MS medium without any PGRs, the average number of somatic embryos were higher than those with PGRs treatment. NAA is the most critical factor among PGRs, which dramatically hindered for the formation of a somatic embryo. The efficacy of the addition of coconut powder (CP) for somatic embryogenesis was almost the same in all treatments. However, the number of somatic embryos formed distinctly depended on age of the callus. The somatic embryos converted into healthy plants with well-developed shoots on the same medium. Plantlets showed the best responses of root and shoot growth when transferred to $\frac{1}{2}$ MS medium containing 1.5 $g{\cdot}L^{-1}$ of activated charcoal. All plants with above 3.0-cm-high were successfully acclimatized in the greenhouse.
Leaf and stem explants of Sedum erythrostichum Miq. were cultured on MS medium supplemented with various combinations of growth regulators. After two weeks of culture, 100% of the leaf explants formed calli on medium containing 2.0 mg/L 2, 4-D and 1.0 mg/L BA. Callus proliferated when subcultured on medium containing 2.0 mg/L 2, 4-D and 1.0 mg/L BA. Numerous adventitious buds were regenerated from callus cultured on the medium containing 2.0 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA. Root formation from shoot was occurred on the MS basal medium containing 1.0 mg/L IAA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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