The protein profiles among Korean rice cultivars were assessed by total protein determination, solubility fractionation, SDS-PAGE analysis and scanning densitometry. In the extraction of protein, the SDS/urea system at a neutral pH was more efficient than that at alkaline pH. The determination of total protein showed that the protein content was similar among cultivars, ranging from 87.9 to 92.7 mg/g dry weight. Additionally, the water/NaCl-soluble protein fraction, containing 14${\sim}$16 kDa albumin and 22 kDa globulin ${\alpha}$-globulin, was also similar among cultivars, with a range of 9.94 to 11.98 mg/g dry weight. The SDS-PAGE/densitometry of total protein showed that there was no discernable difference in proteins of higher molecular weights among various cultivars, whereas the amount of lower molecular weight proteins (14${\sim}$16 kDa) is somewhat variable among cultivars. Furthermore, SDS-PAGE analysis of water/NaCl-soluble and propanol-soluble fractions indicates that there is a discernible change in the content of albumin, globulin or prolamin among cultivars. Thus, the PAGE/densitometry method, preceded by solubility fractionation, is useful for examining differences in protein profiles of rice cultivars.
Heat shock proteins play an important role in plant stress tolerance and are mainly regulated by heat shock transcription factors (Hsfs). In this study, we generated transgenic rice over-expressing OsHsfA7 and carried out morphological observation and stress tolerance assays. Transgenic plants exhibited less, shorter lateral roots and root hair. Under salt treatment, over-expressing OsHsfA7 rice showed alleviative appearance of damage symptoms and higher survival rate, leaf electrical conductivity and malondialdehyde content of transgenic plants were lower than those of wild type plants. Meanwhile, transgenic rice seedlings restored normal growth but wild type plants could not be rescued after drought and re-watering treatment. These findings indicate that over-expression of OsHsfA7 gene can increase tolerance to salt and drought stresses in rice seedlings.
Membrane process was investigated to recover useful components, such as protein from rice-washing water generated in the production of the washed-rice. The filtration experiments were carried out using not only a dead-end Amicon cell to determine suitable membranes but also a hollow fiber ultrafiltration, spiral wound nanofiltration and reverse osmosis modules for home water purification. Ultrafiltration module(molecular weight cut-off : 10,000 dalton) was not suitable for recovery of useful components or protein in the rice-washing water, but nanofiltration and reverse osmosis modules showed a good performance. in the case of 250% concentration of the rice-washing water contained about 9% protein the proteins in concentrates of nanofiltration and reverse osmosis were 18% and 22%, which were about 2 and 2.4 times higher protein concentrations than those of feed, respectively.
Capillary electrophoresis (CE) with rice proteins was used to discriminate 10 domestic rice cultivars in less than 25 min. Most cultivars were differentiated quickly and easily using P-ACN buffer system. CE of rice prolamins allowed classifying ten varieties of Korean rice into three groups. Peak h was characteristic peak for Dongjinbyeo, Gaehwabyeo and Yongnambyeo which were classified into the group of Dongjinbyeo. Chuchungbyeo, Odaebyeo, Mangeumbyeo and Bonggwangbyeo easily differentiated from the group of Dongjinbyeo by the absence of peak h which were classified into the group of Chuchungbyeo. Peak g typical for Illpumbyeo, Hwaseungbyeo and Hwayoungbyeo accounted for 70% of total peak area. They belong to the group of Illpumbyeo. Some cultivars showed specific peak patterns among ten cultivars, Illpumbyeo was differentiated from others by several peaks between peak c and peak f, and the peak d was apparently detected in Odaebyeo not in others. Other minor differences were also found within each group. The result of the study showed that CE has potential for discrimination of rice cultivars. It also possesses the inherent advantages such as low mass requirements, fast seperations, and quantitative analysis through on-capillary UV detection.
Yoon-Hee Jang;Jae-Ryoung Park;Eun-Gyeong Kim;Kyung-Min Kim
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.286-286
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2022
The properties of starch play an important role in determining the palatability of rice. In addition, the gelatinization temperature (GT) of rice starch is an important factor in determining the quality of rice because it is related to the cooking time and texture of rice. For the development of high-quality rice, it is important to understand the genetic basis of palatability-related traits, and QTL analysis is an effective method to explain the genetic basis of variation in complex traits. QTL mapping related to alkali digestion value (ADV) of brown and milled rice was performed using the 120 Cheongcheong/Nagdong double haploid (CNDH) line. As a result, 12 QTLs related to ADV were detected, and 20 candidate genes were selected from the RM588-RM1163 region of chromosome 6 through screening by gene function analysis. The comparison of the relative expression level of candidate genes showed that OsSS1q6 is highly expressed in CNDH lines with high ADV in both brown rice and milled rice. In addition, OsSS1q6 has high homology with starch synthase 1 protein, and interact with various starch biosynthesis-related proteins, such as GBSSII, SBE, and APL. Therefore, we suggest that OsSS1q6 identified through QTL mapping could be one of the various genes involved in the GT of rice by regulating starch biosynthesis. This study can be used as basic data for breeding high-quality rice and provides a new genetic resource that can increase the palatability of rice.
Quality of rice grain changes during dry storage with internal physiological changes and external injury by organism. Storage rice changes by condition with respiration via variable temperature, hydrolysis enzyme reaction, lipid peroxidation occurs with change of palatability. During dry storage, physiological change with protein variation pattern was examined by image analysis on proteomic technology. Analysis revealed that protein activity had no change store at room temperature and store at $40^{\circ}C$, but decreased store at $60^{\circ}C$. Analysis of variable hydrophobic protein pattern revealed that protein activity of beta-tubulin, protein disulfide isomerase, vacuolar ATPase b subunit, globulin was not significantly decreased all dry and store condition. However, heat shock protein 70, and glutathione transferase was significantly decreased when rice dried at $60^{\circ}C$ compared with room temperature and $40^{\circ}C$ dry condition.
Fusarium proliferatum KGL0401 was previously isolated from Physalis alkekengi var. francheti plant roots and exhibited a high GA productivity. A gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis of extracts of the culture fluid of F proliferatum KGL0401 also revealed the presence of $GA_1$, $GA_3$, $GA_4$, $GA_7$, $GA_{20}$, and $GA_{24}$. Therefore, the present study conducted a proteome analysis of waito-c rice treated with the culture fluid of the isolated F proliferatum KGL0401 to identify the protein expression triggered by the GA-containing culture fluid. The results revealed the overexpression of 180 protein spots in the sample treated with the culture fluid. Among them, 75 induced proteins were selected and analyzed by MALDI-TOF (matrix-assisted laser desorption-iorrization time-of-flight) mass spectrometry, followed by database searching, and 51 proteins were identified.
Park, Hye-Jee;Park, Chang-Jin;Bae, Nahee;Han, Sang-Wook
The Plant Pathology Journal
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v.32
no.3
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pp.266-272
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2016
A bacterial tyrosine sulfotransferase, RaxST, is required for activation of rice XA21-mediated immunity, and it catalyzes sulfation of tyrosine residues of Omp1X and RaxX in Xanthomonas oryzae pv. oryzae, a causal agent of bacterial blight in rice. Although RaxST is biochemically well-characterized, biological functions of tyrosine sulfation have not been fully elucidated. We compared protein expression patterns between the wildtype and a raxST knockout mutant using shotgun proteomic analysis. Forty nine proteins displayed a more than 1.5-fold difference in their expression between the wildtype and the mutant strains. Clusters of orthologous groups analysis revealed that proteins involved in cell motility were most abundant, and phenotypic observation also showed that the twitching motility of the mutant was dramatically changed. These results indicate that tyrosine sulfation by RaxST is essential for Xoo movement, and they provide new insights into the biological roles of RaxST in cellular processes.
The pharmaceutical function of tocotrienol in rice bran was evaluated. Distinctive antioxidative effects by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) could be observed. Also, Superoxide Dismutase(SOD) and Glutathione Peroxidase(GPX) activities of the cultured cells such as human firbroblast and hepatocyte, were increased up to 2 fold by the treatment of tocotrienol. The effects on GPX activity were more evident than SOD activity, and the stimulation was up to 2 fold. The changes of gene expression patterns were examined by applying the cell extracts of fibroblast treated with the increasing concentrations of tocotrienol on two-dimensional gel electrophoresis(2-D gel electrophoresis). As the concentrations increasing, many proteins began to appear with the increasing amounts, while several proteins diminished or disappeared. From these results, tocotrienol was clearly shown to have abilities on protecting any oxidizing damages and stimulating anti-oxidizing activities of the organisms.
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