Ile-269 in horse liver alcohol dehydrogenase isoenzyme S(HLADH-S) was mutated to serine by phosphorothioate-based site-directed mutagenesis in order to study the role of the residue in coenzyme binding. The specific activity of the mutant(1269S) enzyme to ethanol was increased 49-fold. All turnover numbers of 1269S enzyme toward 9 primary alcohols were increased. The mutant enzyme showed 3.6, 4.6, 11.6-fold higher catalytic efficiency for $5{\beta}$-androstane-3, 17-dione, $5{\beta}$-cholanic acid-3-one and retinal than wild-type, respectively. The reaction mechanism of 1269S enzyme was ordered bi bi as wild-type's. These results indicate that the hydrophobic interaction of Ile-269 residue with coenzyme plays an important role in dissociation of coenzyme from enzyme-coenzyme complex, which has been known as the rate limiting step of ADH reaction.
Erythropoietin (EPO), a glycoprotein hormone, regulates the proliferation and differentiation of ereythroid progenitor cells. Many attempts have been made to identify the functionally important amino acids of the hormone. One of those early studies has found that heavy redioiodination of EPO caused the loss of its biological activity, suggesting some important role of one of the four tyrosine residues (Goldwasser, 1981). Thus, in this study, we have generated and tested four $Tyr{\dashrightarrow}Phe$ substitution mutants to clarify the possible role of the tyrosine residue(s) in the hormone's Tyrosine residue(s) in the hormone's biological activity. When the mutant and wild type EPO cDBAs were transfected into COS-7 cells and the biological activities of the muteins were assayed using the primary murine erythroid spleen cells, no mutation tested was found to affect the biological activity of the hormone. Thus we conclude that, contrary to the previous observation, none of the four tyrosine in eryghropoietin is critically involved in the binding of the hormone to its receptor.
The Extension of Base is a fundamental Method to expend the moduli in RNS(Residue Number System). RNS has the benefit of parallelism and no carry propagation at each moduli, but division , extension of base and etc. is the problem of RNS in case of the operation speed.Generally this method is applied to system using Mixed Radix Conversion. it appears to decrease the size of Arithmetic Unit, but increasing the time of operation. So in this paper, the Improved Extension of Base is proposed using Chinese Remainder Theorem. it has the comparative small size and Improved speed.
This study was carried out with the detection for multiresidue of the carbamate pesticide such as carbaryl and cabofuran by enzyme-inhibition method. The check time for determination of acetylcholinesterase(AChE) activity was selected at 60 sec. The AChE activity in chicken brain determined by the Ellman's method was $162{\mu}$mol/min/g protein. $I_{50}$ for AChE by carbamate pesticide with wet kit was 0.169mg/L of carbaryl and 0.089mg/L of cabofuran, respectively. The incubation time for enzyme kit with substrate kit was 30min for determination of AChE activity. Enzyme kit with substrate kit was stable at $4^{\circ}C\;and\;25^{\circ}C$ for 5 days. Limit detection concentration of carbaryl with dry kit for AChE was 0.05mg/L. The dry kit such as wet kit applied Enzyme-Inhibition(EI) method with AChE was confirmed the multi residue method to detect the carbamate pesticides.
After removal of mercury in the silver oxide batteries with the distillation process, the leaching of valuable metals from the residue was studied. The distilled residue was reacted with the various HNO, concentration, reactlon temperature, readion time and pulp density. It was found that the optimum condition for leachmg was 2N HNO,, 40-60% reaction temperature, 6 hours reaction tlme and 10g/200ml pulp density. More than 99% of silver and zinc were dissolved in this process while less than 50% of iron and nickel were leached
Park, Hye-Jin;Ko, Kwang-Yong;Han, Kook-Tak;Kim, Il-Jung;Lee, Yong-Jae;Kim, Sung-Hun;Lee, Kyu-Seung
Korean Journal of Agricultural Science
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v.32
no.2
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pp.215-221
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2005
The residual study of pesticide has been used in various areas, such as food safety, environmental protection, establishment of tolerance, and explaining the pathway and reaction mode of pesticides, and its importance was expected to increase further more. The aspect of food safety, the pesticide residue survey have been practiced at many organizations, but there were no verification of analytical results at present. In this experiment, we focused on instrumental stability, including response of each instrument and the recovery ratio of each organization's method. As samples for this experiment, we prepared cucumber and sesame, and chose 4 pesticides (bifenthrin, chlorpyrifos, diazinon, and ethoprophos), which were mostly detected from pesticide residue survey and widely used for each crop. The standard deviation of peak areas in the chromatogram of each pesticide were under 1.212 %, so it showed that most instruments were stable. The relationship of recovery ratio of each organization were over 0.996 for every pesticide and each organization. Finally, the analytical results for pesticide residue from each participated organization were not statically significant and we could put confidence in the result from each organization.
Mutations in the human connexin 32 (Cx32) gene are responsible for X-linked Charcot-Marie-Tooth (CMTX) disease. Although over 300 different mutations have been identified the detailed molecular etiology of CMTX disease is poorly understood. Several studies reported that connexin membrane channels share most biophysical properties with their parental gap junction channels. In this study, two connexin mutant membrane channels (one mutant channel called the M34T channel in which the methionine residue at the $34^{th}$ position of the Cx32 protein is replaced with threonine residue and the other mutant channel called the T86C channel in which the threonine residue at the $86^{th}$ position is replaced with cysteine residue) associated with CMTX mutations were characterized at the single-channel level instead of using mutant gap junction channels. The biophysical properties of the M34T channel were very similar to those of the gap junction channel formed by M34T mutation. In addition, the mutant membrane channel study revealed the reversal of the gating polarity, the loss of fast gating and the gain of slow gating. The T86C channel also behaves like its parental wild type Cx32 membrane channel. Taken together, these results suggest that a study using connexin membrane channels is useful to characterize CMTX mutants.
Hur, Kyung Jin;Woo, Min Ji;Kim, Ji Yoon;Saravanan, Manoharan;Kwon, Chan-Hyeok;Son, Yong Wook;Hur, Jang Hyun
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.34
no.4
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pp.328-335
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2015
BACKGROUND: The present investigation was aimed to predict the pre-harvest residue limits (PHRLs) of the fluopicolide and metrafenone on cherry tomato and to estimate their half-life and characteristics of the residues.METHODS AND RESULTS: Pesticides were treated once on cherry tomato in field 1 and 2 under the standard application rate. The samples were collected 7 times at the end of 0(2 hours after pesticides spaying), 1, 2, 3, 5, 7 and 10 days before harvest. Residues of fluopicolide and metrafenone were analyzed by the LC-MS/MS. In this study, the method limit of quantification (MLOQ) for both fluopicolide and metrafenone in cherry tomato was found to be 0.005 mg kg-1. Their recovery levels were 92.7∼94.8% and 82.6∼88.0%, shown with coefficient of variation of less than 10%. Half-life of fluopicolide and metrafenone in field 1 and 2 were found to be 15.0 days and 12.8 days, 18.9 days and 21.5 days, respectively.CONCLUSION: Based on the results, this study shows the level of PHRL on cherry tomato is 0.27 mg/kg for fluopicolide and 2.29 mg/kg for metrafenone at 10 days before harvesting. The present study indicates the residues of both pesticides on cherry tomato will be below maximum residue limit (MRL) at harvest.
Eun Ha, Jeong;Keun-Taek, Kim;Dong Hun, Shin;Jun Sung, Bae;Kang Uk, Lee;Chae Won, Lee;Chan Yeong, Yang;Areum, Kim;Ji-Hoon, Lee;Su-Jin, Bak;Kwan Ha, Park
Journal of fish pathology
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v.35
no.2
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pp.195-203
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2022
This study was performed to delineate pharmacokinetic residue characteristics of lincomycin (LM) in olive flounder at low water temperature (13℃), and to examine whether LM is effective against main Gram-negative pathogens. It was observed that the times for residue declined below the maximal residue limit (0.1 mg/kg) in the muscle was, respectively, 32, 33 and 55 days following 10, 20 and 40 mg/kg intramuscular LM injections. The in vitro MIC value of LM against Edwardsiella piscida was higher than 256 ㎍/mL and against Vibrio harveyi 32 ㎍/mL when examined with several clinical isolates. These results suggest that the withdrawal time of LM should be more than 30 days in consideration of the 10 mg/kg employed as the regular clinical dose. It was also found that LM administered to treat streptococosis in olive flounder is not likely to be effective against some pathogenic Gram-negative bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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