Plant Regeneration via organogenesis from leaf disk of Korean dandelion was investigated. Leaf disk cultured on MS medium with various combinations of BA (0-4 mg/L) and 2,4-D (0-1 mg/L). Shoot regeneration from leaf explant was observed after 3 weeks of culture. The highest shoot regeneration frequency from leaf disk was obtained with 2 mg/L BA. To analyze the effect of leaf age along shoot formation, we measured number of shoots per explant, shooting rate, fresh and dry weight of leaf explant. The highest number of shoots (11.5) per explant were obtained leaf from 7 weeks old plantlets after seed germination. The regenerated shoots were transferred in 1/2 MS medium with 0.5 mg/L NAA for root formation. Regeneratied plantlets thought organogenesis were growing to whole plants in the pots with acclimation.
A simple, high-frequency and reproducible protocol for induction of adventitious shoot buds and plant regeneration from leaf-disc cultures of Jatropha curcas L. has been developed. Adventitious shoot buds were induced from very young leaf explants of in vitro germinated seedlings as well as mature field-grown plants cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with thidiazuron (TDZ) ($2.27{\mu}M$), 6-benzylaminopurine (BA) ($2.22{\mu}M$) and indole-3-butyric acid (IBA) ($0.49{\mu}M$). The presence of TDZ in the induction medium has greater influence on the induction of adventitious shoot buds, whereas BA in the absence of TDZ promoted callus induction rather than shoot buds. Induced shoot buds were multiplied and elongated into shoots following transfer to the MS medium supplemented with BA ($4.44{\mu}M$), kinetin (Kn) ($2.33{\mu}M$), indole-3-acetic acid (IAA) ($1.43{\mu}M$), and gibberellic acid ($GA_3$) ($0.72{\mu}M$). Well-developed shoots were rooted on MS medium supplemented with IBA ($0.5{\mu}M$) after 30 days. Regenerated plants after 2 months of acclimatization were successfully transferred to the field without visible morphological variation. This protocol might find use in mass production of true-to-type plants and in production of transgenic plants through Agrobacterium/biolistic-mediated transformation.
This study was conducted to provide useful information for improvement on the efficency of transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens. The result from the sensitivity test of cotyledon explants of tomato to kanamycin suggested that 50mg/L could be a proper concentration for selection media. Two hundred mg/L of cefotaxime was selected as a proper concentration to remove Agrobacteria from media without any negative effect on explants. Both callus formation and shoot regeneration from cotyledon explants of tomato were significantly suppressed by the cocultivation with Agrobacterium. Three days of cocultivation was effective on callus formation and shoot regeneration in all of tomato cultivars tested. Confirmation of transformation for regenerated shoots was carried out by histochemical GUS assay and PCR analysis using NPTII primer, and transgenic shoots were obtained from all of 3 tomato cultivars tested.
Khaskheli, Allah Jurio;Ali, Muharam;Shah, Syad Zakir Hussain;Memon, Zohra Fatima;Awan, Saleem;Khaskheli, Muhammad Ibrahim;Khaskheli, Mohsin Ali;Magsi, Bilqees;Qambrani, Zareen;Khaskheli, Asad Ali
Journal of Plant Biotechnology
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v.48
no.2
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pp.86-92
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2021
The present study aimed to evaluate the initiation, proliferation potential, and mass clonal production ability of a micropropagation system for banana through tissue culture. A total of 60 explants were cultured on basal media supplemented with various concentrations of BAP and NAA. Banana plants regenerated on MS basal medium (control) without the addition of BAP + NAA showed a significantly (P < 0.05) lower survival rate with no signs of shoots up to the end of the experimental period. The results further revealed that the performance in MSS-XI medium was almost 89%, followed by MSS-IX and MSS-X media, both of which showed performance up to 88%. In contrast, the performance in the MSS-XVI medium was less than 60%, at the less duration of time and highly shoot induction detected at MSS-XIII medium. The maximum number of shoots (4.9) was observed in the medium supplemented with growth adjuster MSS-XI, followed by the MSS-XII medium (4.5). Surprisingly, the best performance was observed for the MSR-VII medium approximately 16 days after initiation, while the lowest performance was observed with MSR-XI (approximately 31 days). The maximum rooting percentage (98%) was observed in the MSR-V to MSR-VIII media (98%), while the minimum rooting percentage was observed in MSR-XI (approximately 45%).
Eun, Jong-Seon;Kim, Young-Seon;Park, Jong-Suk;JIN, Song Nan;CAO, Hounan
Journal of Plant Biotechnology
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v.29
no.3
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pp.179-183
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2002
This study was carried out to investigate the influence of medium composition for in vitro mass propagation of Lycoris squamigera Max. After the disks of short stems, segments of leaf within bulb and scale were cultured on MS basal medium supplemented with various plant growth regulators, they were examined for the extent of callus formation, shoot and root regeneration. In the culture of stem disks, adventitious shoots were regenerated from the basal tissue of bulb scales, and combined medium of 1.0 mg/L 2,4-D or NAA+2.0 mg/L BA or kinetin showed the the best response and 4∼6 shoots per explant formed. In the culture of leaf segments within bulbs, both MS medium supplemented with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ and with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA were produced callus profusely on the base of leaf tissue and 3∼6 shoots were regenerated per explant. In the scale segments culture, calli were produced on the basal tissue on medium with 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. The best result were shown on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ, and 1.0 mg/L 2,4-D+1.0∼2.0 mg/L BA. Maximum number of regenerated shoots was up to 10∼12. Adventitious root formation from explants were formed profusely on MS medium with 1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L kinetin. The most desirable method for mass propagation of plantlets was the shoot regeneration from scale segments then subsequently subcultured on medium for rooting.
Guzmania was propagated through in vitro culture of lateral shoots. When new shoots grown in greenhouse were cut and cultured in vitro, contamination rate was very high at about 80% in the first stage of in vitro culture. Among cytokinin treatments for agar medium, 2.0 mg/L BA was most effective for shoot multiplication, and those with 0.5 mg/L kinetin and 0.5~1.0 mg/L BA were favorable for shoot multiplication. BA was more effective for shoot multiplication than kinetin, and shoot multiplication was more enhanced when 2.0 mg/L BA was combined with 0.1~0.5 mg/L IAA than 2.0 mg/L BA alone. The medium with 2.0 mg/L BA and 0.1 mg/L IAA showed the highest rate of shoot multiplication with about 8.7 in shoot number, and those with 2.0 mg/L BA and 0.5~1.0 mg/L IAA also resulted in high multiplication of shoots. Shoots were multiplicated more in liquid rotation culture(80 rpm) with the medium containing 0.5 mg/L BA and 0.1 mg/L IAA than liquid stagnating and solid cultures. Regenerated shoots formed roots very favorably in the medium supplemented with 2.0 mg/L IBA.
Conditions for efficient organogenesis and plant regeneration from Dianthus gratianopol suspension cultured cells were established. Shoot-forming calli of glossy surface, pale green and knobby type were selected from leaf explant-derived calli and were suspension-subcultured every week in CP liquid medium with 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP. Combinations of 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP, and 1.5 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BAP were effective for the induction of regenerative callus from the suspension cultured cell clusters. Multiple shoot primordia were initiated from the green spots of these regenerative callus and formed shoots on MS medium with 1.0 mg/L TDZ and 0.5 mg/L PAA. Shoot regeneration frequency (calli regenerating at least one shoot) was about 87%. For plant regeneration, proliferated shoots were excised and transferred to MS medium with 0.1 mg/L NAA for root initiation after 9 weeks of culture. The regenerants were potted in soil and formed the flowering buds and petals. Also, adventitious shoots were formed from the excised green shoot primordia of regenerative callus and these shoots proliferated successfully and regenerated to whole plants.
Park, Kyung-Hwa;Yang, Deok-Chun;Jeon, Jae-Heung;Kim, Hyun-Soon;Joung, Young-Hee;Hyouk Joung
Journal of Plant Biotechnology
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v.1
no.2
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pp.85-90
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1999
In order to protect fungal diseases, leaf disc explants of Solanum tuberosum cultivar, Belchip, was infected with an Agrobacterium MP90 strain containing chimeric gene construct, consisting of antibiotic resistance and chitinase gene driven by the CaMV 35S promoter, for transformation. Regenerated multiple shoots were selected on a medium containing kanamycin and carbenicillin after exposure to Agrobacterium. The presence and integration of the npt II and chitinase gene were confirmed by polymerase chain reaction(PCR). Northern blot analysis indicated that the genes coding for the enzyme could be expressed in potato plants. The chitinase activity of transgenic potato plants was higher than the control potato.
Choi, Kyung-Mi;Hwang, Sung-Jin;Chung, Sang-Jin;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.14
no.2
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pp.87-91
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2006
An efficient plant regeneration of C. asiatica was achieved from organogenesis using petiole explants of in vitro plantlet on MS basal medium controled with different plant growth regulators (NAA,2,4-D, IAA kinetin, and BA). Best results that 50%, efficiency of regeneration per explant for regeneration were obtained with IAA $17.13\;{\mu}M$ and BA $8.9\;{\mu}M$. Formation of adventitious shoots via organogenesis from the petiole explant was verified by histological sectioning of plantlets. Regenerated plants were transplanted into soil.
Several plant growth regulators were examined for on their effect on the in vitro propagation of Kalopanax pictus$(T_{HUNB}.)$$(N_{AKAI}.)$ on WPM medium. Among the cytokinins tested, BA at $13.32\;{\mu}M$ appeared to be the most effective for multiple axillary shoot formation. Although the addition of $2.89\;{\mu}M\;GA_3$ promoted stem elongation, it produced morphologically abnormal leaves and stems. For rooting of the shoots, $4.9\;{\mu}M$ IBA seemed to be more effective than $2.69\;{\mu}M$ NAA. When the regenerated plants were transferred on artificial mixture containing vermiculite and peat-moss (1 : 1, v/v), 81% of them survived and grew normally.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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