In fish vaccinology, the secondary antibodies against fish immunoglobulins (Igs) are necessary to measure specific humoral immune responses in immunized fish. In the present study, polyclonal antiserum against olive flounder (Paralichthys olivaceus) IgM heavy chain was generated by intramuscular immunization of rabbit with Escherichia coli/eukaryotic shuttle vector containing open reading frame (ORF) of olive flounder IgM heavy chain. Western blot analysis demonstrated the specific activity of the rabbit antiserum with reduced olive flounder serum H chain at dilutions up to 1:1000. Titer of immunized rabbit serum against olive flounder serum was significantly higher than that of pre-immunized rabbit serum when determined by ELISA.
Alloxan is a diabetogenic agent which destroys the beta-cell of the Langerhan's islet of pancreas and it disturbs the secretion of insulin. It is known that alloxan interfers with the hepatic enzyme activity and some aspect of the other metabolism. The author attempted to investigate the influence of reserpine upon the serum transaminase activity, blood sugar and serum total cholesterol contents of rabbit treated alloxan. The results obtained were summarized as follows; 1. The serum GOT and GPT activity of alloxanized rabbit pretreated with reserpine showed marked decrease compared with alloxan control group. 2. The blood sugar level of alloxanized rabbit pretreated with reserpine showed lower than the alloxan control group. 3. The total cholesterol level of alloxanized rabbit pretreated with reserpine was lower than that of alloxan control group.
Effects of Akebiae Lignum, whose scientific name is Akebia quinata Decaisne, on the blood pressure were investigated with EtOH extract in whole and spinal rabbits. Akebia Lignum EtOH extract (AEE), when given intravenously, produced a fall in blood pressure not only in whole rabbit but also in spinal rabbit and AEE administered into a lateral cerebral ventricle of whole rabbit did not elicit a fall in blood pressure. The depressor responses of the whole rabbit to intravenous AEE were weakened by treatment of the animals with atropine and chlorisondamine but not by vagotominijation, phentolamine avil, and then the depressor action causing by AEE in the whole rabbit was not affected by pretreatment of physostigmine which is cholinesterase inhibitor and of hemicholinium which blocks acetylcholine synthesis by interfering with choline uptake in nerves. These observations suggest that the hypotensive action of AEE of which component is not affected by cholinesterase is due to direct action at parasympathetic receptor.
The blood pressure response to Junci Herba water and methanol extracts in rabbit and $LD_{50}$ to Junci Herba water extract in mouse were investigated in order to develop a hypotensive agent from natural resources. $LD_{50}$ of Junci Herba water extract (WE) was 600 mg/kg in mouse, when WE was injected intraperitonealy. Junci Herba water and methanol extract, when injected into the vein of rabbit, produced a fall of blood pressure. Hypotensive effect of WE was suppressed by atropine and potentiated by phentolamine, while not affected by avil, propranolol, and phenoxybenzamine. Intravenous injection of chlorisondamine weakened the hypotensive effect of WE, and WE produced hypertensive effect in this rabbit. Intravenous injection of bretylium did not affect the hypotensive effect of WE, but WE produced hypertensive effect in this rabbit. In the rabbit treated with chlorisondamine, hypertensive effect of WE was suppressed by methysergide or bretylium, but not affected by atropine or phenoxybenzamine.
국내에서 발생한 토끼 바이러스성 간염 소위 토끼 출혈병의 원인 바이러스를 감염토끼의 간조직으로 부터 분리정제한 후 바이러스의 핵산과 구성 단백질의 특징을 관찰하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 토끼간염바이러스는 분자량이 약 54 kilodalton인 한개의 구조단백을 가진 RNA 바이러스이며 바이러스 핵산의 크기는 약 7.5 kilobases로 나타났고 바이러스의 RNA는 배양세포에서는 감염을 일으키지 않았다. 바이러스 구성단백의 양상과 핵산의 크기 등을 종합해 볼 때 토끼의 간염 바이러스는 Caliciviridae에 속하는 것으로 간주된다.
This experiment was carried out to improve in vitro development of rabbit one-cell embryos to the blastocyst stage. One-cell rabbit embryos were collected at 19\ulcorner20hr after superovulation induction and incubated at 39\ulcorner in 5% CO2 for 72hr. In order to find optimum conditions in medium that affects the rabbit embryo's development in vitro, RDH medium which mixed with RPMI1640, DMEM and Ham's F10 was compared with the previously reported mediums (Ham's F10 and RD) for embryo development and cell numbers. Three additives (BSA, taurine and glucose) were tested for the development of rabbit one-cell embryos in vitro. When the embryos were cultured in RDH medium, their development was markedly promoted as compared with Ham's F-10 or RD alone. Glucose exhibited no significant effects on embryo development and cell numbers. BSA a, pp.ared to promote transition from morula to blastocyst stage and taurine increased cell numbers of cultured embryos markedly regardless of medium. BSA and taurine together in RDH medium showed the additive effects on embryos development and cell number.
Recently various molecular diagnostic techniques have been used to identify rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV), a causative agent responsible for acute hepatitis and disseminated intravascular coagulation in rabbit. But they were hard to perform and time consuming. To detect RHDV in a rapid and easy way, we developed biotinylated oligonucleotide probe within ORF 1 region encoding the polyprotein of RHDV in formalin-fixed and paraffin-embedded tissues from various tissues of 20 rabbits naturally infected with RHDV, Our in situ hybridization (ISH) was quickly carried out within two hours by MicroProbe capillary action system. The ISH produced a positive reaction in liver, kidney and lung. In conclusion, ISH with a biotintlated oligonucleotide probe provided a useful diagnostic method for detecting RHDV.
Lee, Yun Chan;Oh, Yeonsu;Choi, Sang Ho;Chae, Mi Kyung;Na, Ki Bok;Yook, Sim Yong;Han, Jeong Hee
한국동물위생학회지
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제44권1호
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pp.35-43
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2021
Rabbit infectious hemorrhagic fever has been reported in rabbits worldwide. The disease is also frequently reported on Korean rabbit farms, and the pathological study of 9 rabbits on such disease-occurring farms was attempted to identify the pathogen. Clinical signs were torticollis and ear ulceration. Most rabbit died with bloody nasal discharges. At necropsy, multiple hemorrhages and inflammation were observed in heart, lung, liver and uterus. The main histopathologic features were hemorrhagic suppurative meningoencephalitis, fibrinous bronchointerstitial pneumonia, bacteremia, liver cell necrosis, multifocal hemorrhages in kidney and disseminated intravascular coagulopathy. The viral VP60 gene of RHDV was identified by Reverse Transcriptase PCR. Pasteurella multocida organisms were cultured, identified by biochemical test and serotyped as A by multiplex capsular typing PCR. In conclusion, the fatal hemorrhagic disease was due to combined infection with both RHDV and P. multocida in rabbits. To our knowledge, this is the first case report about co-infection with both RHDV and P. multocida in rabbits in Korea.
This experiment was carried out to develop an in vitro culture system for rabbit embryos. The zygotes or 2-cell embryos were collected from the oviducts of the superovulated and mated does with D-PBS/10% FCS at 24 hours after hCG injection. The in vitro developmental rate of blastocyst formation and the number of nuclei in the embryos were examined under the following treatments; 1) TCM-199 with 10% FCS, 2) EBSS with 10% FCS, 3) rabbit vitreous humor(VH), 4) TCM-199 with 10% FCS+BOEC, 5) TCM-199 with 10% FCS+ROEC, 6) EBSS with 10% FCS+BOEC and 7) EBSS with 10% FCS+ROEC. For a comparative study of in vivo and in vitro development, the fresh blastocysts, which were developed in vivo for 96 hours after hCG injection, were collected from the uterus and their numbers of nuclei were counted. 1. The zygotes or 2-cell embryos developed to the blastocyst stage in TCM-199, EBSS and VH at the rates of 93, 92 and 89%, respectively. 2. The higher developmental rates 95~98% of blastocyst formation was achieved when the embryos were co-cultured with a monolayer of bovine or rabbit oviductal epithelial cells in TCM-199 or EBSS. No significant difference in developmental rates was shown between bovine and rabbit oviductal epithelial cells. 3. In a comparative study of in vivo and in vitro development, the total numbers of nuclei were significantly less in the in vitro cultured embryos(104~224) than the in vivo developed embryos(1, 0090 at 96 hours after hCG injectin. 4. The mean cell cycle numbers in the embryos cultured for 72 hours in TCM-199 with 10% FCS, EBSS with 10% FCS, TCM-199 with 10% FCS+BOEC, TCM-199 with 10% FCS+ROEC, EBSS with 10% FCS+BOEC and in vivo was 7.38, 6.63, 7.76, 7.69, 7.01 and 9.92, respectively. From these results, it can be suggested the optimal culture system for in vitro culture of rabbit embryos is a co-culture system with bovine or rabbit oviductal epithelial cells in TCM-199 with 10% FCS. Considering the significant reduction in total numbers of nuclei in the in vitro cultured embryos, the advanced research on development of in vitro culture system for rabbit embryos is expected.
The pronuclear injection of metallothionein-human growth hormone (MT-hGH) gene into rabbit zygotes was performed to establish in vitro developmental system and to detect the presence of the injected gene by nested PCR. Mature female New Zealand White rabbits were superovulated by eGG and hCG treatments. The rabbits were mated and the zygotes were collected from the oviducts 18-22 h after hCG injection by flushing with D-PBS. Two to three picoliters of MT-hGH gene was microinjected into male pronuclei. The foreign gene-injected zygotes were cultured in TCM-199 or RD mediurn containing 10% FCS with a monolayer of rabbit oviductal epithelial cefls in a 5% $CO_2$ incubator. The presence of injected DNA in rabbit embryos or blastomeres at different developmental stages .vas detected by a nested PCR analysis. The results are summarized as follows ; 1.The developmental rate of the MT-hGH gene-injected zygotes to blastocyst was significantly higher in TCM-199 medium (68.1%) than in RD medium (42.9%). 2.The gene injection into pronuclei at 18 or 22 hours post hCG treatment during pronuclear stage did not much affect on the in vitro development of the rabbit embryos. 3.The rate of gene-positive embryos detected by the nested PCR analysis was significantly decreased when they developed to blastocysts. The results indicate that the screening of transgene in rabbit embryos by nested PCR analysis could be a prornisible method for the preselection of transgenic embryos. Furthermore, the preselection of transgenic embryos would greatly reduce hoth the cost and effort of production of transgenic animals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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