• 한국환경성돌연변이발암원학회지
• /
• 제16권2호
• /
• pp.103-108
• /
• 1996

The mutagenic potential of rHu-EPO was evaluated using the short-term genotoxicity tests including Ames, chromosome aberration and micronuclei tests. In Salmonella typhimurium assay, rHu-EPO did not show any mutagenic response in the absence or presence of S9 mix with TA98, TA100, TA1535, and TA1537. In chromosome aberration test, rHu-EPO did not show any significant effect on Chinese Hamster Ovary(CHO) cells compared with control. In micronucleus test using male ICR mice, a dose-dependence increase in the frequency of micronucleuted polychromatic erythrocytes(MNPCEs) was observed in bone marrow cells treated with rHu-EPO. However, it was related to the secondary effect of rHu-EPO and the number of MNPCEs was equal to spontaneous frequency. These results indicate that rHu-EPO does not show any positive response in short-term genotoxicity assays.

• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제4권1호
• /
• pp.68-77
• /
• 1996

Efficacy and general pharmacology of recombinant human erythropoietin (rHu-EPO), were investigated. Efficacy studies were conducted in normal, cisplatin- and acute hemorrhage-induced anemic rats. Normal and anemic animals were treated intravenously with rHu-EPO for 5 days and the changes in the numbers of red blood cells (RBC), hemoglobin (Hb), hematocrit (Hct) and reticulocytes (Ret) were examined. In normal rats, rHu-EPO significantly increased RBC, Hb, Hct and Ret at doses of 50∼ 1250 IU/kg/day. Cisplatin-induced anemic rats showed significant increase of RBC, Hb, Hct and Ret in a dose-dependent manner after administration of rHu-EPO (50∼200 lU/kg/day). And in acute hemorrhage-induced anemic rats, rHu-EPO(4∼100 Iu/kg/day) accelerated recovery of anemia with significant increase in Ret. These changes disappeared gradually after cessation of the treatment. The general pharmacological effects of rHu-EPO were investigated in mice, rats, guinea-pigs, rabbits and cats. rHu-EPO had no influences on central nervous, cardiovascular, gastrointestinal and blood coagulation system. It also had no influence on the contraction of phrenic nerve-diaphragm preparation. rHu-EPO produced significant increase of urine volume at a dose of 7000 IU/kg. These results suggest that rHu-EPO might be useful for the therapy of anemia without serious side effect.

• Journal of Yeungnam Medical Science
• /
• 제14권2호
• /
• pp.399-414
• /
• 1997

신 부전 환자에게 발생하는 빈혈의 원인은 여러 가지가 있다. 그러나 rHuEPO를 투여할 시 이러한 요인들을 극복하고 빈혈을 교정할 수가 있다. 하지만 약 10%의 환자들에서는 고용량의 rHuEPO에도 불구하고 rHuEPO 저항성 빈혈을 나타낸다. 이러한 경우 DFO는 이러한 저항성을 극복할 수 있다고 하며, 이에 대한 기전은 아직 논란이 많다. 따라서 저자들은 DFO를 투여시 나타나는 여러 인자들을 고려해보고 기존의 보고보다 장기적인 관찰을 통하여 이러한 환자에게서 DFO가 빈혈을 교정할 수 있을지 여부를 알아보고 DFO가 rHuEPO 저항성 빈혈을 극복하는 기전을 추측해보고자 하였다. 영남대학교 의과대학 부속병원 투석실에서 투석을 시행하는 만성 신부전 환자 중 rHuEPO의 효과에 저항성을 나타내는 7명의 환자가 실험군(DFO+EPO)으로 정해지고, 다른 7명이 대조군으로 선정되었다. 실험군은 주당 4000 U의 고용량의 rHuEPO에도 불구하고 혈색소치가 9 g/dL이하 이며 출혈이나 철결핍성 빈혈같은 뚜렷한 원인 없이 정구성 정색소성 빈혈을 나타낸 환자들이었으며 대조군은 나이, 평균 투석 기간에 있어서 대조군과 차이를 보이지 않으며 rHuEPO에 비교적 적절한 반응을 보이는 환자들이었다. DFO는 8주간 rHuEPO와 함께 투여 되어 졌고 rHuEPO의 사용 용량은 지난 6개월의 평균 용량과 같게 투여 되었다(평균 사용 용량은 123.5 U/Kg/Wk). 8주간 DFO가 투여된 후 15 개월간 혈색소치와 rHuEPO 사용 용량을 추적하였다. 이 15개월간은 각 개인의 혈색소치와 경제 사정에 의해 rHuEPO의 용량이 결정지어 졌다. 대조군에서는 같은 기간 실험군에서와 같은 방법으로 rHuEPO가 투여되어 졌으나 DFO는 사용되지 않았다. DFO가 투여된 15 개월의 추적기간은 Time I(DFO투여후 7개월간)과 Time II(Time I 이후 8개월간)으로 나누었다. 성적은 다음과 같다: DFO 투여 전, 실험군의 평균 혈색소치는 대조군과(평균 8.2 g/dL) 같은 정도의(p>0.05) 수준인 7.8 g/dL 이었다. 하지만 rHuEPO의 사용 용량은 평균 123.5 U/Kg/Wk으로서 대조군의 그것(평균 41.6 U/Kg/Wk)보다 의미있게 많은(p<0.05) 용량을 사용하여 rHuEPO에 대한 저항성을 나타내었다. 하지만 DFO사용후 실험군에서 혈색소치는 의미있게 상승되었고(p<0.05) 이것은 Time II에 이르기까지 지속되었다(Time I; 평균 8.6 g/dL, Time II; 평균 8.6 g/dL). 즉, 혈색소치에 대한 DFO의 효과는 투여 후 15 개월간 Time I, Time II의 시기에 걸쳐 균등한 정도로 지속되었다. 또한 실험군에서 rHuEPO의 사용 용량은 DFO투여후 대조군과 유사한 수준으로 감소하였고 이것도 마찬가지로 15개월간 지속되었다(Time I; 평균 48.1 U/Kg/Wk. Time II; 평균 51.8 R/Kg/Wk. 한편, 같은 기간 대조군에서의 혈색소치와 rHuEPO사용 용량의 변화는 없었다. 특히, 실험군에서 혈색소치의 증가와 rHuEPO의 사용 용량의 감소는 DFO투여 후 1개월동안에 극대점을 이루었다. 즉, DFO 사용 후 감소된 rHuEPO사용 용량으로도 조혈 작용을 증강시킬 수 있었고 따라서 DFO를 사용함으로써 rHuEPO의 저항상을 극복할 수 있으리라고 생각된다. 보다 대규모의 실험과 잠재적으로 위험한 DFO의 부작용을 최소화 할 수 있는 적절한 용량과 투여 방법에 대한 연구가 더 필요하다고 사료된다.

• Toxicological Research
• /
• 제12권2호
• /
• pp.309-318
• /
• 1996

This study was conducted to investigate the subacute intravenous toxicity of rHu-EPO in Sprague-Dawley rats. rHu-EPO was daily administered to male and female rats for 30 days with different dose levels(100, 500, 2,500 unit/ kg). After the administration period of 30 days, 5 males and 5females rats per each dose group were assigned for recovery period of additional 30 days. There were no clinical signs compared with control group but slight decrease in spontaneous motor activities and locomotions were observed at high dose groups of males and females. In males, feed consumption was reduced at 500 unit/kg and body weight gain was retarded. In the administration sites of tail, focal congestion was observed in a few animals treated with rHu-EPO. No deaths were occurred during the course of study. In hematological examination. a significant increase of hemoglobin and hematocrit was observed in the males and females rats receiving high dose of rHu-EPO. rHu-EPO administration for 30 days showed a marked decrease in glucose concentration. At the highest dose groups, there was a significant incerase in the weights of spleens in both sexes. but this was considered to be related to its pharmacological activity. These results indicate that rHu-EPO does not induce any significant toxic effect on Sprague-Dawley rats for 30 days.

• Neonatal Medicine
• /
• 제16권2호
• /
• pp.221-233
• /
• 2009

목 적 : 신장에서 분비되어 적혈구를 생산하는 빈혈제로 알려진 에리스로포이에틴(Erythropoietin, EPO)은 단순히 피를 만드는 조혈기능 뿐 아니라 최근 신경계 보호 및 신경강화 효과가 있다고 발표되고 있지만 주산기 가사로 인한 저산소성 허혈성 뇌병증의 치료제로서 그 기전이 명확하게 밝혀지지 않았다. 저자들은 유전자 재조합 인 에리스로포이에틴(recombinant Human EPO, rHuEPO)을 이용하여 주산기 저산소성 허혈성 뇌병증의 치료제로서 N-methyl-D-aspartate (NMDA) 수용체와 관련된 흥분성 독성작용을 통한 조절 등 그 기전을 알아보고자 하였다. 방 법 : 재태기간 19일된 태아 백서의 대뇌피질 세포를 배양하여 정상산소군은 5% $CO_2$ 배양기(95% air, 5% $CO_2$)에 두었고, 저산소군과 농도별 뇌손상 전 rHuEPO 투여군(1, 10, 100 IU/mL)은 1% $O_2$ 배양기(94% $N_2$, 5% $CO_2$)에서 6시간 동안 뇌세포손상을 유도하였다. 세포성장과 생존력을 평가하기 위해 MTT 실험을 시행하였다. 동물 모델에서는 생후 7일된 신생백서의 좌측 총 경동맥을 결찰한 후 6개 군; 정상산소군, sham-operated군, 저산소-허헐성군, 저산소-허헐성+vehicle군, 저산소-허헐성 손상 전 rHuEPO 투여군, 저산소-허헐성 손상 후 rHuEPO 투여군으로 나누었고, 저산소-허헐성 손상은 특별히 제작한 통속에서 2시간 동안 8% $O_2$ (8% $O_2$, 92% $N_2$)에 노출시켰다. rHuEPO은 뇌손상 전후 30분에 체중 kg당 1000 IU를 투여하였고, 저산소-허헐성 손상 후 7일째 조직을 실험하였다. 적출한 조직으로 H&E 염색을 하여 뇌손상을 형태학적으로 관찰하였다. 세포배양 및 동물실험에서 NMDA 수용체의 아단위인 NR1, NR2A, NR2B, NR2C, NR2D를 이용하여 실시간 중합효소연쇄반응을 실시하였다. 결 과 : 저산소군에서 세포 생존률은 정상산소군보다 60% 감소하였으며, rHuEPO 투여군(1, 10 IU/mL)은 80% 증가하였다. rHuEPO 투여군(100 IU/mL)은 회복되지 않았다. 우측 반구 대비 좌측 반구의 범위는 정상산소군 98.9%, sham-operated군 99.1%, 저산소-허헐성군 57.1%, 저산소-허헐성+vehicle군 57.0%, 저산소-허헐성 손상 전 rHuEPO 투여군 87.6%, 저산소-허헐성 손상 후 rHuEPO 투여군 91.6%으로 나타났다. NMDA 수용체의 아단위 생체외 실험에서 실시간 중합효소연쇄반응의 결과 NMDA 수용체 아단위 mRNA의 발현은 rHuEPO 투여군에서 저산소군보다 모두 증가하였다. 결 론 : 본 연구에서 rHuEPO은 흥분성 독성작용과 관련되어 NMDA 수용체를 조절하면서 저산소성 허헐성 뇌손상을 보호하는 것을 알 수 있었다.

• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제4권4호
• /
• pp.330-333
• /
• 1996

Acute intravenous toxicities of rHu-EPO (recombinant human erythropoietin) were investigated in Sprague-Dawley rats. Seven days after administration of rHu-EPO, we examined the clinical signs, mortalities, body weight and etc. No clinical signs and mortalities of toxicity were observed in animals. Also, a significant change of body weights was not observed. These results suggest that LD$_{50}$ value was >25,000 unit/ kg in Sprague-Dawley rats and the acute intravenous toxicities of rHu-EPO were not significant.t.

• Journal of Yeungnam Medical Science
• /
• 제11권1호
• /
• pp.115-126
• /
• 1994

1991년 1월부터 1993년 2월까지 영남대학교 의과대학 부속병원에서 출생하여 신생아 중환자실에서 치료 받았던 12명의 미숙아를 대상으로 무작위로 대조군과 rHuEPO투여군으로 나누어 체중 kg당 100unit의 rHuEPO을 1주간 3회씩 4주동안 피하주사하고 rHuEPO투여 시작과 같이 체중 kg당 3mg의 elemental iron을 매일 경구투여 하였고 출생 후 수유가 가능할 때 부터 25unit씩의 비타민 E를 매일 경구투여 하였다. 망상적혈구, 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, 총 철결합능, erythropoietin농도, 활력징후, 체중, 간기능, 신장기능 및 피하주사부 위의 국소 부작용을 비교해 본 결과 치료 시작전 erythropoietin의 농도는 대조군과 rHuEPO투여군 사이에 차이는 없었으며 모두 정상 범위에 속했고 rHuEPO투여군에서는 치료 1주에서 3주사이에 급격한 망상적혈구의 경향이 관찰되었고 전반적으로 혈색소치, 백혈구수, 혈소판수, 혈청 철, ferritin, TIBC등에서는 차이가 없었다. 그리고 체중증가 및 활력증상, 간기능, 신장기능에서도 대조군과 rHuEPO투여군 사이에서 차이가 없었고 rHuEPO 투여 기간 동안 계속 정상적으로 유지되었다. 결론적으로 우리의 연구에서는 rHuEPO치료로 뚜렷한 혈색소치 및 헤마토크리의 증가를 볼 수 없었지만 망상적혈구가 치료 초기에 증가되는 경향이 관찰되었고 치료로 인한 특이할 만한 부작용이 없었으므로 첫째, 치료 기간 중의 예견할 수 없이 발생하는 패혈증, 무시할 수 없는 채혈량과 spontaneous endogenous erythropoietin생산이 rHuEPO의 반응에 미치는 영향, 둘째. rHuEPO의 가장 높은 효과를 얻기 위한 보다 적절한 투여용량, 기간 및 rHuEPO의 투여를 출생 후부터 바로 예방 목적으로 할 것인지 또는 출생 몇 주 후부터 rescue therapy로 할 것인지 투여 시작 시기, 셋째, 용량의 증가 및 감소에 동반되는 부작용의 정도등을 고려해서 앞으로 더 많은 미숙아를 대상으로 지속적인 연구를 한다면 rHuEPO을 이용해 더욱 더 활발하고 효과적으로 미숙아 빈혈을 치료할 수 있으리라 기대한다.

• Toxicological Research
• /
• 제21권3호
• /
• pp.209-218
• /
• 2005

We investigated effects of recombinant human erythropoietin (rHuEPO) on profiles of mRNA transcripts in 6 male cynomolgus (M. fascicularis) monkey's spleen for 4 weeks. Six monkeys, composed of control and treatment group (Control : M1, M2, M3: Treatment : M4, M5, M6) were intravenously administered 3 times per week without or with a dose of rHuEPO 2730 IU/0.1 ml/kg. After 4 weeks rHuEPO treatment, spleen was removed for RNA isolation. Splenic gene expression was assessed using Affymetrix U133A 2.0 arrays containing 18,400 transcripts and variants, including 14,500 well-characterized human genes. Gene expression pattern was very different between individuals even in same treatment. In rHuEPO treated groups showed number of genes were up- or down-regulated (M4: 79: M5: 48; M6: 73 genes). Six genes (epidermal growth factor receptor, calgranulin A, estrogen receptor binding site associated antigen, matrix metalloproteinase 19, zinc finger and BTB domain containing 16, progestin and adipoQ receptor) were commonly expressed in rHuEPO treated group. The different individual response could be major considering factor in monkey experiment. Further study is needed to clarify the different individual response to rHuEPO in molecular level. This study will be valuable in the fundamental understanding and validation of molecular toxicology for bio-generic drugs including rHuEPO in cynomolgus monkey.

• Toxicological Research
• /
• 제12권2호
• /
• pp.305-308
• /
• 1996

The acute toxicity of rHu-EPO, newly developed recombinant erythropoietin, was tested in beagle dogs. rHu-EPO, when administered intravenously at 25, 000 IU/kg, did not cause any death. Also, rHu-EPO did not induce any change of body weight, food intake and clinical signs compared to controls. There were no significant changes in hematological, urine analysis and pathological examination. These results showed that rHu-EPO did not induce any remarkable toxic response and the $LD_50$ was greater than 25, 000 IU/kg in beagle dogs.

• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제4권4호
• /
• pp.323-329
• /
• 1996

A recombinant human erythropoietin (rHu-EPO), was administered intravenously to beagle dogs at doses of 100, 500 and 2, 500IU/kg/day for 30 days. There were no significant clinical signs such as body weight, food intake, physical and opthalmic examination, urine analysis, etc. Any toxic response was not observed except for enlarged spleen and extramedullary hematopoiesis. No observed adverse effect level (NOAEL) of rHu-EPO for 30 days was considered to be 100IU/kg/day in beagle dogs.