철피석곡은 중국에서 전통의약식물로 잘 알려진 난과 식물 중 하나이다. 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직 배양된 철피석곡에 대하여 화장품 성분으로써 응용 가치를 평가하였다. 이미 몇몇 보고된 논문에서 철피석곡은 항암, 상처 치유 그리고 면역기능증진 등의 약리학적 활성에 대한 연구가 진행되었다. 본 연구에서는 생물반응장치를 이용하여 조직 배양된 철피석곡의 원괴체상구체 및 다신초에 대하여 화장품 성분으로서 효능, 효과를 자연에서 자란 철피석곡과 비교 평가하였다. 항산화 활성 비교 실험 결과 철피석곡의 원괴체상구체는 조직배양된 다신초 및 철피석곡 지하부 및 지상부보다 항산화 효과가 우수하였다. 조직배양된 원괴체상구체의 총 페놀 및 총 플라보노이드 성분 또한 다른 다신초나 자연에서 자란 철피석곡 추출물보다 함유량이 높음을 알 수 있었다. 다른 한편으로는 피부 미백과 관련한 효과를 비교 조사한 결과, 조직 배양된 다신초가 자연에서 자란 철피석곡 지상부, 지하부 및 조직 배양된 원괴체상구체보다 타이로 시네이즈 활성 억제 및 멜라닌 생성 억제 효과가 우수하였다. 이러한 결과들은 피부개선을 위한 화장품 성분으로서 조직배양체의 부분별 응용 가능성을 제공할 수 있을 것으로 사료된다.
This experiment was conducted to establish the in vitro propagation of Dendrobium moniliforme through protocorm like body (PLB) induction from the culture of leaf, stem and root explants. Frequency of PLB formation from root explants was higher than those of leaf and stem explants. PLB's proliferation in MS medium including 1.0 mg/L NAA was better than 1.0 mg/L IBA. Frequency of PLB's proliferation on medium with various concentrations of BA, Kinetin, Tidiazuron (0. 1.0, 3.0 mg/L) and NAA (0, 1.0 mg/L) was tested. The maximun proliferation of PLB's was obtained on MS medium supplemented with 3.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NAA after 6 weeks of culture. Addition of 200 mg/L activated charcoal (AC) and 30 g/L sucrose was effective on PLB proliferation for D. moniliforme.
Root cluster section culture, showing high efficient Protocorm-like body (PLB) formation capacity, were established in Doritaenopsis hybrids. Three types of root were obtained from excised shoots in 1/2MS medium containing different concentrations of NAA; \circled1normal roots, \circled2multiple roots and \circled3abnormal root clusters. Those were placed on 1/2MS medium supplemented with 0.5 mg/L thidiazuron for PLB regeneration. PLB regeneration rate was greater in root cluster section cultures (77.8%) compare to normal root tip cultures(30%). Number of PLBs regenerated from root cluster sections were counted over 11 per explant (5.3 per normal root tip).High frequency of PLB regeneration was achieved in root cluster section culture. This result can be used as an efficient method for clonal proliferation of Doritaenopsis hybrids.
Optimization of the protocorm-like body (PLB) formation of Phalaenopsis and Dendrobium hybrids was performed by determining the effects of plant growth regulators (PGRs) and different parts and division sizes of the PLB. For both genera, the base part was the best for the proliferation of PLBs, yielding the highest number of PLBs on a PGR-free medium for Phalaenopsis and medium containing $0.1{\mu}M$ NAA and $10.0{\mu}M$ BAP for Dendrobium. As regards the division size, four-division sections resulted in a higher PLB formation efficiency for Phalaenopsis, while two-division sections produced a higher PLB formation efficiency for Dendrobium. It is expected that these findings will be applicable to efficient PLB formation of other Phalaenopsis and Dendrobium orchids.
본 연구는 Agrobacterium을 이용한 효율적인 호접란 형질 전환 시스템의 확립을 위해 실시하였고, 호접란 PLB의 대량증식을 위한 배지 조성은 하이포넥스 기본 배지에 활성탄 1g/l, 티아민 0.1 mg/l 및 sucrose 30 g/l을 배지에 첨가한 경우 PLB가 안정적으로 증식되었다. 계대 배양시 PLB 절단 방법이 PLB의 생존과 증식에 큰 영향을 미치며, PLB 위쪽으로 부터 1/3 부위를 절단하여 계대 배양한 경우 90% 이상의 가장 높은 증식률을 나타났다. Agrobacterium 접종 시 균이 묻어 있는 침으로 PLB를 찔러 상처를 내는 dipping 방법을 이용하여 형질전환 효율을 높일 수 있었다. Agrobacterium 배양액의 흡광도 값이 0.8일 때 형질전환 효율이 가장 높았고, 형질전환된 PLB의 선발은 1 mg/l 정도의 저농도 hygromycin을 함유한 배지에 계대배양 하는 것이 효율적이었다. 호접란 형질전환체를 먼저 GUS assay를 통하여 선발하였고, 선발된 개체로부터 genomic DNA를 추출하여 GUS 특이적 primer와 probe로 PCR과 Southern blot 분석을 수행하고 유전자의 도입여부를 조사한 결과 GUS 염색된 형질전환체에서 정상적으로 GUS 유전자가 도입된 것을 확인할 수 있었다.
Jo, Man-Hyun;Ham, In-Ki;Lee, Mi-Ae;Han, Gyu-Heung;Woo, In-Shik
Plant Resources
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제5권3호
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pp.176-180
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2002
This study was conducted to develop the clonal propagation technique through in vitro culture using by leaf sheath explants of Phalaenopsis grown in vitro. The highest frequency of protocorm-like body (PLB) formation was obtained when explants of leaf sheath were cultured on VW medium containing 30g/L sucrose, 500 mg/L activated charcoal, 150 mVL coconut water, 1 mg/L NAA, 1 mg/L 2ip and 2.5 g/L gelrite. The PLB formation rate of VW medium was highest followed by modified Hyponex medium, and lowest in MS medium. Plantlets induced from PLBs transferred to plastic pots including spagnum moss were well developed.
Jo, Man-Hyun;Ham, In-ki;Park, Sang-kyu;Seo, Gwan-Seok;Han, Gyu-Heung;Woo, In-Shik
Plant Resources
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제6권2호
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pp.89-93
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2003
This study was conducted to develop the clonal propagation technique through in vitro culture using basal stem explants in Phalaenopsis hybrid grown in vitro. The highest frequency of protocorm-like body (PLB) formation was obtained when basal stem explants were cultured on VW medium containing 30g/L sucrose, 500 mg/L activated charcoal, 150 ml/L coconut water, 1 mg/L NAA, 5 mg/L 2iP and 2.5g/L gel rite. PLBs transferred to Hyponex medium were regenerated to plantlets. Plantlets transferred to plastic pots containing spagnum moss were developed and successfully acclimatized under greenhouse. The flower was bloomingly opened in plants regenerated from basal stem explants. The flower was not different from both mother plant and plant induced through clonal propagation of Phalaenopsis hybrid.
심비디움의 교배에 의한 신품종 육성시 발아율을 증진시키고 발아기간을 단축시켜 육종 효율을 높이고자 자가 또는 타가수분 후 경과일수에 따라 무균발아에 가장 적합한 수분 후 일수 및 배지에 대해 조사한 결과는 다음과 같다. 자방의 길이 생장은 교배조합에 관계없이 수분후 110일경, 자방의 폭은 교배조합에 따라 다소차이가 있으나 대체로 140일경에 생육이 정지되었다. 자방의 수가 많고 교배된 꼬투리의 교배율이 높은 조합일수록 발아상태가 양호하였다. 수분후 150일 부터 180일 경과된 꼬투리를 배양하는 것이 발아 상태가 가장 양호하였고 발아 소요일수도 짧았다. 무균파종 및 발아 후 생육에 적합한 배지는 하이포넥스 배지로 나타났다.
This study was conducted to regenerate shoots from internode sections(about 1mm in thickness) of Ardicia pusilla de Candolle. Internode sections were cultured on MS medium supplemented with TDZ or both TDZ and IBA. At one month after culture, primodium, which looks like protocorm like body(PLB) of orchid, appeared around swollen internodes. And then it grew and changed into the shape similar to granule of orange at two or three months after culture. At four to five months after culture, explants covered with them became a cluster, and then multiple shoots were regenerated from them. Primodia formation was the best when internode was cultured on MS medium supplemented with 0.25 $mg{\cdot}L^{-1}$ thidiazuron(TDZ) and 0.5 $mg{\cdot}L^{-1}$ indole-3-butyric acid(IBA). That internodes were cultured on MS medium supplemented with either higher concentration of TDZ than that of IBA, or equal concentration of TDZ and IBA, or TDZ only was little effective for primodia formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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