Fluorescent in situ hybridization (FISH) with rRNA-targeted oligonucleotide probes was used to compare the community structures of free-living and aggregated bacteria at thawing period in Lake Baikal. Targeted groups were Eubacteria, $\alpha$-, $\beta$-, $\gamma$- proteobacteria groups, Cytophaga-Flavobacterium group and Planctomycetales. Total bacterial numbers of free-living bacteria were ranged from $0.2{\times}10^6\cells{\cdot}ml^-1$ to $3.2{\times}10^6\cells{\cdot}ml^-1$, which were decreasing with depth, while the aggregated bacterial numbers were dramatically increasing from $0.4{\times}10^4 to 3.3{\times}10^4 \cells{\cdot}ml^-1$ with depth. The ratios of EUB probe binding cells to DAPI counts were ranged from 52.3 to 74.1% in free-living bacteria, and from 39.6 to 66.7% in the aggregated bacteria, respectively. Community structures of the aggregated bacteria were very different from each free-living bacteria at every depth. At 25 m depth, where the chlorophyll a concentration was highest, both structures were quite different from those of surface layers, rendering the fact that the community structures might be affected by phytoplankton. The vertical profile of community structure of aggregated bacteria is particular. The proportion of $\beta$-proteobacteria group was increasing with depth and it was 51.8% at 100 m, but the dominant group was $\gamma$-pro-teobacteria group at 250 m. Taken together, the biodiversity and succession of aggregated bacteria are quite different from free-living bacteria.
The dynamics of bacterial populations belonging to $\alpha\;\beta\;\gamma-subclass$ proteobacteria, Cytophaga-Flavobacterium (CF) group and sulfate reducing bacteria (SRB) in water column of the middle reaches of Nakdong River depending on sediment harvesting were analyzed by fluorescent in situ hybridization (FISH) at sediment harvesting site (near the Seongju bridge) and non-sediment harvesting site (near the Gumi bridge). In addition, some physico-chemical parameters such as temperature, pH, $chi-\alpha$ and electrical conductivity were measured. Regarding the number of total cell counts, cells stained by DAPI, there were no substantial quantitative differences between both sites, but those fluctuation at sediment Harvesting site was greater. And also the ratios of CFgroup and SRB to total cell counts tend to increase at sediment harvesting site with higher $chl-\alpha$, maybe due to the resuspension of sediment into water column. But the total proportion of all determined bacterial populations to total cell counts were greater at non-sediment harvesting site, compared with those at sediment harvesting site. Since the detectibility of bacteria by FISH depends on their metabolic activity, those lower proportion at the sediment harvesting site implies that sediment harvesting may lead to malfunction of those bacteria respect to nutrient recycling and subsequently negative effects on microbial food web.
To determine the degree of common genes and the phylogenetic relationships among genome-sequenced 680 prokaryotes, the similarities among 4,631 clusters of orthologous groups of protein (COGs)’ presence/ absence and gene content trees were analyzed. The number of COGs was in the range of 103–2,199 (mean 1377.1) among 680 prokaryotes. Candidatus Nasuia deltocephalinicola str. NAS-ALF, an obligate symbiont with insects, showed the minimum COG, while Pseudomonas aeruginosa PAO1, an opportunistic pathogen, represented the maximum COG. The similarities between two prokaryotes were 49.30–99.78 % (mean 72.65%). Methanocaldococcus jannaschii DSM 2661 (hyperthermophilic and autotrophic, Euryarchaeota phylum) and Mesorhizobium loti MAFF303099 (mesophilic and symbiotic, alpha-Proteobacteria class) had the minimum amount of similarities. As gene content may represent the potential for an organism to adapt to each habitat, this may represent the history of prokaryotic evolution or the range of prokaryotic habitats at present on earth. COG content trees represented the following. First, two members of Chloroflexi phylum (Dehalogenimonas lykanthroporepellens BL-DC-9 and Dehalococcoides mccartyi 195) showed a greater relationship with Archaea than other Eubacteria. Second, members of the same phylum or class in the 16S rRNA gene were separated in the COG content tree. Finally, delta- and epsilon-Proteobacteria were in different lineages with other Proteobacteria classes in neighbor-joining (NJ) and maximum likelihood (ML) trees. The results of this study would be valuable to identifying the origins of organisms, functional relationships, and useful genes.
This study investigated the population densities and diversity of heterotrophic bacteria, and the rhizosphere-to-soil ratios (R/S) in the rhizosphere soil of halophyte Phragmites communis at the western coastal mudflats of Korea. The population densities of aerobic heterotrophic bacteria on the rhizosphere soil of P. communis were in the range of $3.3\;{\pm}\;0.9\;{\times}\;10^7\;{\sim}\;1.2\;{\pm}\;0.5\;{\times}\;10^8\;cfu\;g^{-1}$ dry weight (d. wt.). Population densities of amylolytic bacteria ranged from $1.1\;{\pm}\;0.2\;{\times}\;10^6$ to $3.0\;{\pm}\;1.2\;{\times}\;10^6\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, while those of cellulolytic bacteria and proteolytic bacteria ranged from $5.6\;{\pm}\;2.3\;{\times}\;10^6$ to $1.5\;{\pm}\;0.3\;{\times}\;10^7\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$ and from $1.4\;{\pm}\;0.3\;{\times}\;10^6$ to $3.5\;{\pm}\;2.3\;{\times}\;10^7 \;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, respectively. The R/S ratios ranged from 2.26 to 6.89. Genetic (16S DNA) analysis of fifty-one isolates from the roots of P. communis suggested that the dominant species were closely related to the ${\gamma}$-proteobacteria group (18 clones) and the ${\alpha}$-proteobacteria group (14 clones). We found that halophyte species and mudflat environment both affected the rhizosphere bacterial communities.
The diversity elucidation by amplified ribosomal DNA restriction analysis and 16S rDNA sequencing of 96 associative diazotrophs, isolated from the feeder roots of tea on enriched nitrogen-free semisolid media, revealed the predominance of Gram-positive over Gram-negative bacteria within the Kangra valley in Himachal Pradesh, India. The Gram-positive bacteria observed belong to two taxonomic groupings; Firmicutes, including the genera Bacillus and Paenibacillus; and Actinobacteria, represented by the genus Microbacterium. The Gram-negative bacteria included ${\alpha}$-Proteobacteria genera Brevundimonas, Rhizobium, and Mesorhizobium; ${\gamma}$-Proteobacteria genera Pseudomonas and Stenotrophomonas; and ${\beta}$-Proteobacteria genera Azospira, Burkholderia, Delftia, Herbaspirillum and Ralstonia. The low level of similarity of two isolates, with the type strains Paenibacillus xinjiangensis and Mesorhizobium albiziae, suggests the possibility of raising species novum. The bacterial strains of different phylogenetic groups exhibited distinct carbon-source utilization patterns and fatty acid methyl ester profiles. The strains differed in their nitrogenase activities with relatively high activity seen in the Gramnegative strains exhibiting the highest similarity to Azospira oryzae, Delftia lacustris and Herbaspirillum huttiense.
Kim, Won-Il;Cho, Won-Kyong;Kim, Su-Nam;Chu, Hyo-Sub;Ryu, Kyoung-Yul;Yun, Jong-Chul;Park, Chang-Seuk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.8
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pp.777-790
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2011
To elucidate the biodiversity of plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) in Korea, 7,638 bacteria isolated from the rhizosphere of plant species growing in many different regions were screened. A large number of PGPR were identified by testing the ability of each isolate to promote the growth of cucumber seedlings. After redundant rhizobacteria were removed via amplified rDNA restriction analysis, 90 strains were finally selected as PGPR. On the basis of 16S ribosomal RNA sequences, 68 Gram-positive (76%) and 22 Gram-negative (24%) isolates were assigned to 21 genera and 47 species. Of these genera, Bacillus (32 species) made up the largest complement, followed by Paenibacillus (19) and Pseudomonas (11). Phylogenetic analysis showed that most of the Grampositive PGPR fell into two categories: low- and high- G+C (Actinobacteria) strains. The Gram-negative PGPR were distributed in three categories: ${\alpha}$-proteobacteria, ${\beta}$- proteobacteria, and ${\gamma}$-proteobacteria. To our knowledge, this is the largest screening study designed to isolate diverse PGPR. The enlarged understanding of PGPR genetic diversity provided herein will expand the knowledge base regarding beneficial plant-microbe interactions. The outcome of this research may have a practical effect on crop production methodologies.
This study was carried out to investigate the population densities, R/S ratios, and identification of heterotrophic bacteria on the rhizosphere soil of halophyte Suaeda japonica found on the western and southern mudflats of Korea. The population densities of aerobic and anaerobic heterotrophic bacteria on the rhizosphere soil of Suaeda japonica were in the range of $1.3\;{\pm}\;0.3\;{\times}\;10^6\;{\sim}\;6.3\;{\pm}\;3.3\;{\times}\;10^7\;and\;2.8\;{\pm}\;1.3\;{\times}\;10^4\;{\sim}\;1.8\;{\pm}\;0.7\;{\times}\;10^7\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, respectively. In case of physiologically specific bacteria, population densities of amylolytic bacteria on the rhizosphere soil of Suaeda japonica were in the range of $4.4\;{\pm}\;0.6\;{\times}\;10^6\;{\sim}\;2.5\;{\pm}\;1.2\;{\times}\;10^7\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, those of cellulolytic bacteria were from $8.5\;{\pm}\;6.0\;{\times}\;10^4\;{\sim}\;2.3\;{\pm}\;1.6\;{\times}\;10^6\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, and those of proteolytic bacteria were from $3.8\;{\pm}\;1.8\;{\times}\;10^5\;{\sim}\;4.2\;{\pm}\;2.9\;{\times}\;10^6\;cfu\;g^{-1}\;d.\;wt.$, respectively. The R/S ratios were ranged from 2.33 to 2.39. Among eleven isolates from the roots of halophyte Suaeda japonica of Goheung bay by using 16S rDNA analysis, five clones were closely related to ${\gamma}-Proteobacteria$ group and six clones were closely related to ${\alpha}-Proteobacteria$ group. Among four isolates from Suncheon bay, two strains were related to ${\gamma}-Proteobacteria$ group and another two were related to Actinobacteria and Bacilli group, respectively.
Preservation of artifacts that are excavated from archeological sites is closely related to soil environment. Biological remains are especially influenced by degradation activity of microorganism from soil environment. In this study a preserved human bone in archaeological tomb, Tou-kwang-myo from Joseon Period was analyzed to characterize bacteria groups by molecular genetic tools using 16S rDNA sequences. 117 clones were identified and classified 9 phylogenetic groups : ${\alpha}$-, ${\beta}$-, ${\gamma}$-, ${\delta}$-Proteobacteria, Sphingobacteria, Clostridia, Actinobacteridae, Nitrospiraceae, and Gemmatimonadetes according to homologous 16S rDNA sequences submitted in NCBI. ${\gamma}$-Proteobacteria group appears the highest ratio in bones (about 35%) while about 19.6% belong to the Actinobacteria group. The results may contribute to study on the effect of microorganisms on the human remains with burial method.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2002.10a
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pp.15-21
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2002
Terminal-restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) analysis has been optimized by using in vitro model community composed of genomic DNAs of known bacterial strains and has been applied to assess the bacterial community structure in marine sediments. The specific fluorescence-labeled terminal restriction fragments (T-RFs) between 39 and 839 base long specifying each strain were precisely measured for known bacterial strains. The addition of a co-solvent (dimethylsulfoxide or glycerol) into PCR reactions has reduced differential PCR amplification. Comparative bacterial community structure was investigated for pristine and polluted sediments. A complex T-RFLP pattern showing complex bacterial community structure was obtained in the pristine sediment, whereas simple T-RFLP pattern (low bacterial diversity) was shown in polluted sediments where caged aquaculture has been conducted for several years. The results of T-RFLP analysis were compared with that of cloning and sequencing 16S rDNA clones from the same sediments. Sequence analysis of 16S rDNA clones (72) of the pristine sediment revealed a diverse collection of lineages, largely of the class Proteobacteria ($6\%$ alpha subdivision, $46\%$ gamma subdivision, $13\%$ delta subdivision, and $3\%$ epsilon subdivision), Nitrospina $(8\%)$, high G+C gram positive $(8\%)$, Verrucomicrobia $(7\%)$, and Planctomycetes $(6\%)$. In the contaminated sediments, 17 $(59\%)$ of the 16S rDNA clones (29) were related to Campylobacter and symbiont of Rimicaris exoculata belonging to epsilon subdivision of Proteobacteria. The results obtained indicated that T-RFLP analysis is a rapid and precise technique for comparative bacterial community analysis.
A 16S rDNA clone library was generated to investigate the bacterial diversity in tidal flat sediment in Ganghwa Island, Republic of Korea. A total of 103 clones were sequenced and analyzed by comprehensive phylogenetic analyses. No clones were identical to any of known 16S rRNA sequences in public databases. Sequenced clones fell into thirteen lineages of the domain Bacteria: the alpha, beta, gamma, delta, and epsilon Proteobacteria, Actinobacteria, CFB group, Chloroflexi, Acidobacteria, Planctomycetes, Verrucomicrobia, and known uncultured candidate divisions (OP11, BRC1, KSB1, and WS1). Two clones were not associated with any known bacterial divisions. The majority of clones belonged to the gamma and delta Proteobacteria (46.7%). Clones of Actinobacteria were distantly related to known taxa. It is evident from 16S rDNA-based community analysis that the bacterial community in tidal flat sediment is remarkably diverse and unique among other marine environments examined so far.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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