The objective of this study was to purify and characterize the ${\beta}-secretase$ inhibitor from enzymatic hydrolysates of blackfin flounder muscle, for development of a novel anti-dementia agent that may be used in the drug or functional food industries. ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide was purified from various enzymatic hydrolysates of blackfin flounder muscle. Among six enzymatic hydrolysates, the Alcalase hydrolysate revealed highest ${\beta}-secretase$ inhibitory activity. Consecutive purification of the blackfin flounder muscle hydrolysate using Sephadex G-25 column chromatography and octadecylsilane C18 reversed phase HPLC techniques were used to isolate a potent ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide composed of 5 amino acids, Leu-Thr-Gln-Asp-Trp (MW: 526.7 Da). The $IC_{50}$ value of purified ${\beta}-secretase$ inhibitory peptide was $126.93{\mu}M$. Results of this study suggest that peptides derived from blackfin flounder muscle may be beneficial as anti-dementia compounds in functional foods or as pharmaceuticals.
The potential utility of fish scales to the functional food industry has been investigated due to its antioxidant and antihypertensive characteristics. In this study, we report on the reactive oxygen species (ROS) scavenging and angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activities of gelatin hydrolysates processed from Branchiostegus japonicus scales, which are also high in protein content (about 46.1%). We prepared the enzymatic gelatin hydrolysates with four proteases (${\alpha}$-chymotrypsin, Alcalase, Neutrase and trypsin) from B. japonicus scale gelatin, which was prepared according to different reaction times, substrate/enzyme ratios and substrate concentrations. The enzymatic hydrolytic degrees of the gelatin increased time-dependently up to 6 hrs, while the Alcalase gelatin hydrolysates showed the highest hydrolysis degrees compared to the others. Furthermore, gelatin hydrolysates of Neutrase and ${\alpha}$-chymotrypsin showed the highest DPPH radical and $H_2O_2$ scavenging activities ($IC_{50}$ value; 9.18 mg/mL and 9.74 mg/mL), respectively. However, the activities were not significant (P<0.05). We also observed that the four gelatin hydrolysates significantly increased ACE inhibitory activities from approximately 20% to 60% (P<0.05), Among them, the Alcalase gelatin hydrolysates showed the higher ACE inhibitory activity ($IC_{50}$ value; 0.73 mg/mL) compared to the others. These results suggest that the enzymatic gelatin hydrolysates prepared from B. japonicus scales may possess a potentially useful function as an ACE inhibitory agent. As such, the utility of B. japonicus scales should be given due consideration for application in the functional food industry.
The present study was carried out to investigate the effects of soy protein hydrolysates (SPHs) addition on the quality characteristics of pork patties. The SPHs was prepared by subcritical water process (SWP) at 180℃ without holding time and mixed with the pork patty components at varying concentrations (0-3%), and the patties were stored at 4℃ for 14 d. As quality parameters, instrumental color, thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS), pH, water holding capacity (WHC) and shear force were measured at the end of storage. Regardless of SPHs concentration, the addition of SPHs significantly manifested low L* and high a* values compared to those of untreated control (p<0.05). For b* value, addition of SPHs in the 0.5-1.5% was unaffected, while >2.0% of SPHs caused significantly lower b* than control (p<0.05). The color changes in pork patties with and without SPHs were also identified in visual appearance where the pork patties containing 0.5-2.0% showed bright red color which was comparable to brownish color of control and patties containing >2.5% SPHs. Lipid oxidation was delayed by the addition of 0.5-1.5% SPHs, while it was accelerated by the addition of 3% SPHs. The pH of patties increased with increasing concentration of SPHs, whereas there were no significant differences in WHC and shear force of patties. Consequently, the results indicated that the addition of 0.5-1.5% SPHs had a potential advantage in suppressing oxidative deterioration of fat-containing meat products during chilled storage.
This study investigated the effect of soy protein hydrolysates (SPH) prepared by varying subcritical media on the physicochemical properties of pork patties. For resource of SPH, two different soybean species (Glycine max Merr.) of Daewonkong (DWK) and Saedanbaek (SDB) were selected. SPH was prepared by subcritical processing at 190℃ and 25 MPa under three different of media (water, 20% ethanol and 50% ethanol). Solubility and free amino group content revealed that water was better to yield larger amount of SPH than ethanol/water mixtures, regardless of species. Molecular weight (Mw) distribution of SPH was also similar between two species, while slightly different Mw distribution was obtained by subcritical media. For pork patty application, 50% ethanol treatment showed clear red color comparing to control after 14 d of storage. In addition, ethanol treatment had better oxidative stability than control and water treatment based on thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) analysis. For eating quality, although 20% ethanol treatment in SDB showed slightly higher cooking loss than control, generally addition of SPH did not affect the water-binding properties and hardness of pork patties. Consequently, the present study indicated that 50% ethanol was the best subcritical media to produce SPH possessing antioxidant activity, and the SPH produced from DWK exhibited better antioxidant activity than that produced SDB.
Kim, Da Young;Yoo, Jung Sik;Cho, Yoon Ah;Yoon, Ho Sik;Kim, Cheol-Hyun
한국축산식품학회지
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제41권4호
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pp.687-700
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2021
This study performed to evaluate the applicability of functional dairy food materials by comparing the calcium solubilization ability and anti-inflammatory effects of hydrolyzed casein protein. Commercial enzyme (Alcalase®; Neutrase®; Protamex®; Flavourzyme®) was added to the 10% casein solution to prepare the casein hydrolysates. Samples obtained every hour [1:200 (w/v)]. According to results of measuring the degree of hydrolysis (DH), all of four enzymatic hydrolysates increased rapidly from 30 to 40 min, and after 150 min, there were no change. Protamex® and Neutrase® had the highest DH compared to others enzymatic hydrolysates. After that, peptides obtained throughout a preparative liquid chromatography system. In the calcium solubility experiments, neutrase fraction (NF) 4 and NF7 showed similar activities with casein phosphopeptide (CPP). In vitro cell experiments showed that no cytotoxicity except for NF6. Also, the production of nitric oxide (NO) inhibited as the concentration of fraction samples increased. The cytokine (IL-1α, IL-6, and TNF-α) production was lower than lipopolysaccharide (+) group significantly. Therefore, the possibility of anti-inflammatory activity found in the hydrolyzed samples. According to the above experiments, NF3 and Protamex Fraction (PF) 3 selected. Amino acids selected throughout an AccQ-Tag system. As a result, 17 species of amino acids and several species of unknown amino acids identified. Both fractions had the highest content of phenylalanine. This study identified the potential of biologically active and functional peptides derived from casein that affect the food and dairy industry.
보다 항암력이 강하고 독성이 적은 항암물질을 얻기 위해, 경기도 수원에서 채집한 애기졸각버섯 Laccaria laccate의 자실체 및 배양균사체로 부터 다당체를 분리하여 그 화학적 조성 및 sarcoma 180에 대한 항암효과를 검토하였다. 이 물질의 구성 성분은 다당류와 단백질이었으며 다당류는 한 종류의 미확인 물질을 포함한 7종의 단당으로 구성되어 있고 단백질은 14종의 아미노산으로 구성되어 있었다. 마우스에 sarcoma 180을 이식한 후 자실체의 단백질-다당류를 1일 20mg과 50mg/kg씩을 각각 투여했을 때 75%와 65%의 높은 저지율을 나타내었으며, 배양균사체에서 추출한 단백질-다당체는 1일 20mg/kg씩 투여시 58%의 항암효과를 나타내었다.
쌀 단백질 유래의 감칠맛 소재를 개발하기 위해 도정 부산물인 미강과 쌀 단백질을 원료로 효소분해물을 제조하고 품질 특성을 평가하였다. 미강과 쌀 단백질의 비율을 4:0, 3:1, 2:2, 1:3(w/w)으로 달리하여 효소분해한 후 분해물의 특성을 분석한 결과, 3:1의 비율에서 질소분해율 및 감칠맛과 종합 기호도가 우수하였다. 효소분해 원료로 미강과 쌀 단백질을 3:1의 비율로 선정하여 13일 동안 효소분해를 진행하면서 시간에 따른 분해물의 특성을 분석하였다. 총질소, 아미노태 질소, 질소분해율은 분해 10일에서 최대값을 나타내었으며, 단백질 전기영동 결과 효소분해 시간이 길어질수록 펩타이드의 저분자화가 진행되는 것으로 추정되었다. 유리 아미노산 분석 결과 분해 시간에 따른 모든 효소분해물에서 감칠맛 성분인 glutamic acid 함량이 가장 높게 나타났으며, 효소분해 시간에 따라 쓴맛 성분은 감소했지만 단맛 성분은 증가하는 경향을 나타내었다. 관능적 특성(색, 향, 감칠맛, 종합기호도)은 분해 10일의 효소분해물에서 가장 우수한 기호도를 나타내었다. 따라서 미강과 쌀 단백질을 3:1의 비율로 하여 효소분해를 10일 동안 진행하였을 때 효소분해물은 쌀 유래의 감칠맛 소재로서 품질 특성이 우수하며, 영 유아식과 건강식에 다양하게 활용이 가능할 것으로 생각된다.
Amyloid plaque, also called senile plaque, the product of aggregation of ${\beta}$-amyloid peptides ($A{\beta}$), is observed in brains of the patients with Alzheimer's disease (AD) and is one of the key factors in etiology of the disease. In this study, hydrolysates obtained from the sea hare (Aplysia kurodai) were investigated for ${\beta}$-secretase inhibitory peptide. The sea hare's muscle protein was hydrolyzed using six enzymes in a batch reactor. Trypsin hydrolysate had highest ${\beta}$-secretase inhibitory activity compared to the other hydrolysates. ${\beta}$-secretase inhibitory peptide was separated using Sephadex G-25 column chromatography and high-performance liquid chromatography on a C18 column. ${\beta}$-secretase inhibitory peptide was identified as eight amino acid residues of Val-Ala-Ala-Leu-Met-Leu-Phe-Asn by N-terminal amino acid sequence analysis. $IC_{50}$ value of purified ${\beta}$-secretase inhibitory peptide was $74.25{\mu}M$, and Lineweaver-Burk plots suggested that the peptide purified from sea hare muscle protein acts as a competitive inhibitor against ${\beta}$-secretase. Results of this study suggest that peptides derived from sea hare muscle may be beneficial as anti-dementia compounds in functional foods or as pharmaceuticals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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