The purpose of this study was to analyze the effects of the pre-treatment method on the measurement of probiotic cell counts. The probiotic cell count was not significantly different in the pre-treatment method such as experimenters, diluted solution, medium, and homogenization duration. The mean value of probiotic cell count with capsule was $2.2{\times}10^{10}{\pm}9.5{\times}10^9CFU/g$. This probiotic cell count was converted into $2.8{\times}10^{10}{\pm}1.2{\times}10^{10}CFU/g$ based on the net weight. The mean value of probiotic cell count without capsules was $4.3{\times}10^{10}{\pm}1.8{\times}10^{10}CFU/g$. As a result of this comparison, probiotic cell count showed significant difference with and without capsules. Thus, it is suggested that the probiotic cell count is measured by removing the capsule in capsule probiotics.
Thirty two Holstein female calves (initial body weight = $40{\pm}3.0$ kg) were used to investigate the effects of probiotic and prebiotic on average daily gain (ADG), fecal E. coli count, white blood cell count, plasma IgG1 level and cell-mediated immune response to injection of phytohemagglutinin in suckling female calves. Calves were assigned randomly to one of the four treatments, including whole milk without additives (control), whole milk containing probiotic, whole milk containing prebiotic and whole milk containing probiotic and prebiotic (synbiotic). Average daily gain was greater in calves fed probiotic, prebiotic and synbiotic at weeks 6, 7 and 8 (p<0.05). E. coli count was significantly lower in calves fed probiotic, prebiotic and synbiotic on d 56 (p<0.05). There was no significant difference between treatments in blood samples and cell-mediated response. This study showed that addition of probiotic, prebiotic and combination of these additives to milk enhanced ADG and reduced fecal E. coli count in preruminant calves.
For the probiotic feed production, aerobic liquid fermentation of pulverized food wastes was attempted with a yeast Kluyveromyces marxianus. After grinding finely, optimal fermentation conditions of the substrate was investigated by shaking culture. The most active growth of the yeast was shown at solid content of 10%. The proper addition of urea(0.5g/l), o-phosphate(0.4g/l), molasses(4g/l), and yeast extract (1g/1) increased cell growth rate and viable cell count. For optimizing, the nutrients were all added to substrate and fermentation was carried in 2 litre jar fermenter. For the stimulation of hydrolyzing enzyme excretion, mixed culture with Aspersillus oryzae was also conducted. In 12 hours of fermentation, viable cell count of the yeast Kluyveromyces marxianus amounted to the number of 1.4 $\times$10$^{10}$ /1 in the culture medium.
Adherence of probiotic bacteria to intestinal epithelium is found to be the most principal characteristics among the various physiological functionality. This study was conducted to investigate the effect of bifidobacterial growth properties and condition on the Caco-2 cell adherence and to construct a basic data on adherence-related research. Among 20 strains of bifidobacteris tested, when measured by cell surface hydrophobicity(CSH) and cell agglutination(CA), Bifidobacterium bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 were selected. Using these strains, variations of Caso-2 cell adherence depending upon experimental condition were analyzed. The results obtained are as follows : Even though Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 reached more 85% cell surface hydrophobicity there was no significant difference in cell agglutination, when reached 31.54$\pm$0.54mg/ml. By direct count method for adherence, viable cell count of M3, K1, K2, K8, K9 and K10 reached more 100 counts per 100 Caco-2 cells. When Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentistis K8, and Bif. infantis K9 were used to compare the adherence depending upon viable cell counts, reaction time, and growth phase, the more viable cell count, and the more adhered cell counts, the less adherence percentage. In addition, there was no difference in adherence percentage of bifidobacteria when bifidobacteria was incubated from 1 to 8 hrs after Caco-2 cells already formed monolayer. Considering of the effect of growth phase of bifidobacteria on adherence variation, all strains showed the highest adherence during the early stage of stationary phase. In conclusion, adherence of bifidobacteria was affected by strain specificity, viable cell count, and growth activity.
The aim of this study was to evaluate the effect of Lactobacillus acidophilus probiotic (LAP) product supplementation on the blood profile, fecal noxious gas emission, and fecal shedding of lactic acid bacteria and coliform bacteria in healthy adult Beagle dogs. In total, 14 Beagle dogs with an average initial body weight of 10.19 ± 0.61 kg were randomly assigned into two dietary treatments,with and without LAP supplementation, for a 28-day feeding trial. At the end of the experiment, there was no significant (p > 0.05) difference in the concentration of serum total cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), white blood cell (WBC), red blood cell (RBC), blood lymphocyte percentage, fecal hydrogen sulfide (H2S) and total mercaptans (R.SH) emission, and fecal coliforms counts. However, the serum concentrations of the triglyceride and fecal ammonia (NH3) emission of the LAP treatment were significantly (p < 0.05) decreased in the group compared with the CON dogs. Fecal total lactic acid bacteria counts were significantly (p < 0.05) increased in the LAP treatment. In conclusion, the supplementation of LAP in Beagle dog diets could decrease the blood triglyceride level and enhance the gut Lactobacillus count which may have positive effects on dogs.
This study was conducted to compare probiotic activities and physiological functions of Bifidobacterium longum Mk-G7 with weveral commercial and type strains of bifidobacteria. bif. longum MK-G7 showed the highest acid tolerance against HCl and acetic acid, whereas bif. infantis Y-1 showed the lowest acid tolerance and more than 4 log cycles of viable cell count decreased due to acid injuty. Viable cell counts of bifidobacteria strains decreased more than 1.5 log cycles owing to oxygen toxicity, with the exception of Bif. longum MK-G7, Bif. infantis Y-2, Bif. longum Y-3, Bif. longum Y-6, and Bif. longum RD-13 showed the highest bile tolerance, whereas Bif. longum MK-G7 showed a medium level of bile tolerance. Only Bif. longum MK-G7 howed much higher antibiotic resistance against both tetracycline and penicillin-G in the MIC(minimum inhibitory concentration) level of 24.8 mg/I and 0.52mg/I, respectively. Bif longum Y-6, and Bif. bifidum ATCC 29539 showed more than 80% of anti-mutagenicity against NQO(4-nitroquinolinel-oxide). Since the production of cytokines such as $TNF(tumor necrosis factor)-{\alpha}$ and IL (interleukin)-6, and NO(nitric oxide) in the macrophage cell line Raw 264.7 cells increased as Bif. longum MK-G7 cell concentration increased, ti was suggested that Bif. longum MK-G7 is able to enhance immunopotentiating activity in vitro. When freeze-dred Bif. longum MK-G7 was administered to mice at the dose of 1,2,4, and 6 g/kg of body weight, all of the mice survived in all feeding groups, proving the GRAS(generally recognized as safe) status of Bif. longum MK-G7. When fermented milk containing Bif. longum MK-G7 was administered to human volunteers, viable cell count of total bifidobacteria and anaerobes in the feces increased up to 0.5 log cycles more than before the administration. In particular, Bif. logum MK-G7 ingibited the growth of Bacteroides at the level of 1.0-1.5 log cycles.
남은 음식물을 기질로 생균사료를 생산하기위하여 고온성 세균에 의한 호기적 액체 발효가 시도되었다. 토양이나 남은 음식물들로부터 11종의 고온성 세균이 $55^{\circ}C$에서의 진탕배양에 의해 분리되었다. 이들 분리균 들의 기질분해능을 평가하기위해 배양액 중에서의 ${\alpha}-amylase$ 와 protease효소역가를 측정 비교하였다. 이 결과 6종의 세균이 선택되었고 남은 음식물 기질 적응력을 높이기 위해 반복 배양을 실시하였다. 발효말기에서의 생균농도는 대부분 $3{\sim}7{\times}10^9/ml$에 이르렀다. 이들 중 B3, B6가 가장 높은 효소역가를 나타냈다. B3, B6, 그리고 분양받은 균주인 Bacillus Stearothermophillus를 2L-jar fermenter를 이용해 혼합발효시킨 결과발효개시 8시간 내에 생균수가 $1.4{\times}10^{10}/ml$에 이르렀다.
본 연구는 도축 폐기물인 가축혈액의 이용을 위해 사료첨가제로서 혈분 성분이 함유된 유산균 probiotics의 생산을 목적으로 하여 수행되었다. 혈액으로부터 얻은 혈장을 질소원으로 이용한 BBPB 배지에, 시판 중인 미생물 사료첨가제로부터 분리된 probiotics용 Lactobacillus sp.를 배양하여 대조구인 MRS배지의 74%에 이르는 높은 생균수를 얻을 수 있었다. 얻어진 배양액의 동결 건조는 배양시간, 배양액의 pH보정, 배양액의 농축, 급속동결 등의 조건에 의해 균체의 생존율이 영향을 받았으며, 24시간 배양한 배양액을 pH 6.4로 보정한 뒤 10배로 농축하여 -5$0^{\circ}C$에서 3시간 동안 동결한 후 건조하는 조건으로 최적화되었다. BBPB 배지에 잔여하는 혈장 단백질 성분은 유산균의 동결건조 안정화 효과도 가지고 있는 것으로 나타났고 그 수준은 MRS와 유사하였다. 제제화를 위한 동결건조 안정제로는 Sucrose가 높은 효과를 나타내었고 10%첨가시 48.3%의 생존율로 $3.0{\times}^{10}$ CFU/g의 유산균 제제를 얻을 수 있었다. 본 연구에서의 동결건조조건을 이용하면 도축 폐혈액을 이용한 problotics의 산업적 생산이 가능할 것으로 사료된다.
전통 장류에서 유산균 성상을 보이는 균주를 분리하여, TLC와 PCR을 통하여 HoPS를 우수하게 생성하는 균주 HSB15, JSA22, JSA57, JSB22, JSB66 및 JSB89를 선발하였다. 선발된 6균주의 16S rDNA의 염기서열을 분석한 결과 HSB15는 L. alimentarius, JSA22는 L. plantarum, JSA57은 L. pentosus, JSB22는 L. brevis, JSB66는 L. alimentarius, JSB89는 L. parabrevis로 동정되었다. 항균 활성은 6균주 중에서 JSA22가 4개의 병원성균에 대한 항균을 나타내어 항균 활성이 가장 우수하게 나타났고, 인공위액 저항성은 HSB15, JSA22와 JSA57 균주가 70% 이상의 높은 인공위액 저항성으로 가장 우수했으며, 인공담즙 저항성은 HSB15를 제외한 5균주에서 80% 이상의 생존율을 나타내며 담즙액 저항성이 우수하게 나타났다. 또한 probiotic 특성을 지닌 분리 균주의 prebiotics로써 AOS를 이용한 성장율을 관찰한 결과, 모든 분리 균주가 AOS를 선택적으로 이용하며 성장하는 것을 관찰하였고 특히 JSB22가 AOS 이용 성장율이 가장 우수한 것으로 확인되었다. 본 연구를 통해 장류유래 probiotics를 선발하였고 AOS의 새로운 prebiotics로 활용을 검토한 바, synbiotics로 이용할 수 있는 가치가 있다고 판단되었다.
곱게 갈아 액화시킨 음식물 찌꺼기를 기질로 생균사료를 생산하기 위한 효모의 호기적 액상발효에 있어서 효모증식에 대한 교반속도의 영향을 연구하였다. screening을 통해 선택한 효모인 Kluyvermyces marxianus를 종균으로 2liter jar fermenter를 이용하여 호기적 조건에서 곱게 분쇄해 10% 고형분 함량을 갖는 기질에 교반속도를 500rpm, 900rpm, 1200rpm를 다르게 조정하여 $35^{\circ}C$에서 증식시켰다. 효모의 증식을 촉진시키기 위하여 고분자물질을 분해하는 효소를 분비하는 곰팡이 Aspergillus oryzae와 혼합발효를 실시하여 단독발효와 비교하였다. 발효결과 교반속도가 증가할수록 생균수도 높아져 400rpm에서보다는 900rpm에서 높은 생균수를 보였으나 1200rpm에서는 오히려 감소하였다. 혼합발효는 amylase의 역가를 높여주어 증식속도를 높여 주나 발효종료단계에서 최고 생균수를 증가시켜주지는 않는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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