To detect viral agents and isolate porcine circovirus 2 (PCV2), 60 samples of lung and lymph node were collected from 5 to 12 week-old pigs that had showed clinical signs of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Polymerase chain reactions (PCRs) were conducted to identify the viral pathogens including PCV1, PCV2, porcine parvovirus (PPV) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) that have been considered to be the causal agents of PMWS. Among 60 samples, PCV 2 was detected from 57 samples but no PCV 1 was detected. PRRSV and/or PPV were also detected from 27 (47.4%) samples and 1 (1.8%) sample of these 57 PCV 2-positive samples, respectively. Tissue homogenates were inoculated onto PCV-free PK-15 cell monolayers. Seven isolates were confirmed as PCV 2 by multiplex PCR, indirect immunofluorescence assay, and transmissible electron microscopy. These date suggest that PRRSV is a major cofactors causing PMWS in pigs that were infected with PCV2 in Korea.
Kim, Kyung-Mi;Jeong, Ji-Hye;Min, Hong-Ki;Lee, Seung-Chul;Roh, In-Soon;Kang, Shien-Young
Korean Journal of Veterinary Research
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v.44
no.2
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pp.259-268
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2004
Porcine circovirus type 2 (PCV-2) has been associated with various disease in pigs worldwide including postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) and porcine dermatitis and nephropathy syndrome (PDNS). In this study, monoclonal antibodies (MAbs) against PCV were produced, characterized and applications of MAbs as diagnostic reagents were described. Spleen or lymph node cells from BALB/c mouse immunized respectively with PCV-1, PCV-2 or expressed PCV-2/ORF2 proteins in baculovirus were fused with SP2/0 myeloma cells using polyethylene glycol (PEG) and hybridoma cells producing PCV-1 or PCV-2-specific antibody were screened by an indirect immunofluorescence (IIF) test. A total of fifteen MAbs were produced against PCV. Six MAbs were PCV-1-specific and nine were PCV-2-specific. All PCV-1-specific MAbs reacted with only PCV-1 and all PCV-2-specific MAbs were reactive with only PCV-2 by IIF test. None of the MAbs was reactive with porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine parvovirus (PPV), porcine rotavirus (PRV), and transmissible gastroenteritis virus (TGEV). Some PCV-2-specific MAbs recognized the PCV-2 infected porcine tissues by IIF or immunohistochemistry (IHC) assay. From this experiment, it was confirmed that MAbs produced in this study were PCV-specific and could be used as reliable diagnostic reagents for PCV-1/PCV-2 detection and differentiation.
Kim, Kiju;Choi, Jong-Young;Lyoo, Kwang-Soo;Hahn, Tae-Wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.58
no.3
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pp.143-146
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2018
The capsid protein of porcine circovirus type 2 (PCV2) encoded by open reading frame 2 (ORF2) is important for neutralizing activity against PCV2 infection. This study investigated the heterogeneity of the ORF2 gene of PCV2 isolated in Korea during 2016-2017. The results revealed that PCV2d is currently the predominant genotype. Moreover, comparison of ORF2 from 17 PCV2 isolates revealed 88.3-100% homology at the nucleotide (deduced amino acid 86.3-100%) level. Interestingly, 61.5% (8/13) of the PCV2d isolates had glycine at position 210. These data provide a useful information for PCV2 epidemiology in Korea.
Porcine circoviruses(PCV) are the smallest nonenveloped DNA viruses containing a unique single-stranded circular genome. No recognized link was found between PCV infection of pig and disease. But the PCV consistently identified from postweaning multisystemic wasting syndrome(PMWS) and researches indicate that there are strong relationships between PCV and PMWS. Clinical signs were emaciation, dyspnea, high fever with normal appetite. Necropsy findings showed respiratory disease complex lesion and lymph node anomalities. An indirect-immunofluorescent antibody procedure was used to assay swine sera for the presence of PCV atibodies. Antibodies against PCV were found in an average of 20% of the samples tested. The PCV DNA was amplified from lymph nodes collected from pigs. PCV specific primers were successfully amplified PCV DNAs. Further studies are needed to determine the possible role this virus might have in disease.
In order to obtain the genetic informations of the Korean isolates of porcine circovirus 2 (PCV2), nucleotide sequences of total genome of three isolates and open reading frame 2 (ORF2) of four isolates were determined and compared with those of other reference PCV2 isolates. Nucleotide sequences of 3 isolates showed over 99% homology with those of reference strain (GenBank accession no. AF027217). Point mutations were mainly determined on ORF2 regions but little on ORF1 regions. The patterns of pointmutated sites and nucleotide substitution on ORF2 regions were generally consistent between Korean isolates, and these mutated sites observed in Korean isolates were also relatively similar to those of foreign isolates. Phylogenetic analysis of nucleotide or amino acid sequences showed that there were minor branches consisting of three clusters; cluster of Korea, Canada and America, cluster of Spain and Taiwan, and the last cluster of French and China isolates. These results suggested that Korean PCV2s were probably originated from North America such as Canada or USA. The genetic informations obtained from this study could be useful for the research of diagnosis and pathogenecity of PCV2.
Lim, Jeonggyo;Jin, Myongha;Yoon, Injoong;Yoo, Han Sang
Journal of Veterinary Science
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v.23
no.3
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pp.49.1-49.13
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2022
Background: Porcine circovirus type 2 (PCV2) and Mycoplasma hyopneumoniae (MHP) are economically significant pathogens in the pig industry. The use of combined vaccines against PCV2 and MHP is one of the most effective ways of protecting pigs from both diseases, and it has become a part of general management. Objectives: This study evaluated the efficacy of two new bivalent vaccines of PCV2 and MHP (Myco-X and Myco-XD) in SPF pigs. Myco-X and Myco-XD are a combined vaccine of MHP with PCV2b and PCV2d, respectively. Methods: Sixteen pigs were divided into four groups: Myco-X-vaccinated challenged, Myco-XD-vaccinated challenged, unvaccinated challenged, and unvaccinated unchallenged. Two milliliters of Myco-X were administered intramuscularly, and 0.5 mL of Myco-XD was injected intradermally at 3 wk of age. The pigs were challenged with virulent PCV2d via the intramuscular and intranasal route 4 wk post-vaccination. Results: All vaccinated pigs showed effective reduction of the clinical signs, the PCV2d load in the blood and nasal swab samples, as well as lung and lymphoid tissue lesions in the challenge test. Compared to unvaccinated challenged animals, the vaccinated challenged animals showed significantly higher (p < 0.05) levels of anti-PCV2 IgG, PCV2d-specific interferon-γ (IFN-γ), and anti-MHP IgG. Conclusions: Based on clinical, microbiological, serological, and pathological assessments, this study confirmed that both combined vaccines could protect pigs against PCV2 infection caused by PCV2d. On the other hand, further research on the efficacy evaluation of these new vaccines against the MHP challenge and PCV2d/MHP co-challenge is needed.
Porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) are known as significant immunosuppressive viruses in pigs. In this study, we investigated the correlation of PCV2 and PRRSV in enteric lesions of porcine salmonellosis. A total of 64 cases were classified into four pig groups as group A (24 cases, S. Typhimurium), group B (11 cases, S. Typhimurium+PCV2), group C (16 cases, S. Typhimurium+PRRSV) and group D (13 cases, S. Typhimurium+PCV2+PRRSV). Comparing with group A, ulcerative enteritis in large intestine was little more prevalent in the PCV2 infected pigs in group B and D. And lymphoid depletion in gut-associated lymphatic tissue (GALT) of large intestine was also detected in PCV2 positive group B (36.4%) and D (30.8%). According to the results of immunohistochemistry (IHC), PCV2 antigens (83.3%) were more prevalently distributed in the intestinal lesions of porcine salmonellosis than PRRSV antigens (10.3%). PCV2 were also detected in the lymphoid depleted GALT of the large intestine from 7 of the 8 pigs (87.5%), but PRRSV were not found in all cases. It may explain that PCV2 can play a certain immunological role to enhance secondary bacterial infection in porcine alimentary tracts.
Porcine circovirus-2 (PCV2) has been implicated in many clinical diseases/syndromes that are now referred to as PCV-associated diseases (PCVAD). Due to significant economic losses caused by PCVAD, many swine operations have launched extensive monitoring programs for PCV2. Traditional serum sampling is, however, rather expensive and laborious, hampering effective large scale pathogen surveillance. A field-based longitudinal study was conducted to assess the utility of pen-based oral fluid sample as an alternative to serum for herd PCV2 testing. Six pens (25 pigs/pen) at each of 3 different sites were used in the study. One oral fluid and 5 random serum samples per pen were collected at 3, 5, 8, 12, and 16 weeks of age, and the sera were pooled by pen for testing. All samples were tested for PCV2 by real-time PCR and for antibodies by indirect fluorescent antibody test (for both anti-PCV2 IgG and IgA) and 3 ELISA assays (blocking ELISA, indirect ELISA, and IgG/IgM sandwich ELISA). PCV2 DNA was detected in oral fluid samples sporadically until 8 weeks and in all pens at 16 weeks. PCV2-specific IgG was detected in oral fluid samples at 3 weeks and persisted until 5 to 8 weeks in all sites. Anti-PCV2 IgG and IgA were detectable in oral fluid samples collected at 16 weeks from all of the pens at 1 site. The detection of PCV2 and anti-PCV2 antibody in oral fluid samples correlated positively with results on pooled sera, suggesting that oral fluids can be a cost-effective alternative to serum for herd monitoring of PCV2 infection.
Park Hyo-Sun;Lee Hyo-Sang;Na Ki-Bok;Lee Kwan-Bok;Kang Su-Jung;Moon Sun-Hwa
Korean Journal of Veterinary Service
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v.29
no.1
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pp.1-8
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2006
Porcine circovirus (PCV) is a small, nonenveloped virus that contains a single-stranded circular DNA genome of about 1.76 kb and belongs to the family circoviridae. The PCV-2 has been incriminated as the cause of post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) , an emerging disease in pigs. In the present study, a PCR assay was applied to detect PCV-2 in tissue samples. The presence of PCV-2 antigen in the porcine tissues was confirmed by indirect immunofluorescence (IIF) with PCV-2 specific monoclonal antibodies. And then DNA extracted from PCV-2 positive tissues was used as a template. One oligonucleotide primer suitable for PCR was selected from a published PCV-2 sequence (Genbank). Amplified PCR product was detected the same fragment lengths of 416 bp as a control. Based on these results, it was suggested that the PCR is a simple and sensitive method for support diagnostic purposes.
Regulator of G protein signaling 16 (RGS16) is known to be associated with porcine circovirus type 2 (PCV2). PCV2 associated disease (PCVAD) is a serious problem in the swine industry. The representative symptoms of PCVAD are high viral titer proliferation and decreased average daily gain. In this study, we identified single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the RGS16 region, including the upstream region. Of the 22 identified SNPs, rs332913874, rs326071195, and rs318298586 were genotyped in 142 Yorkshire pigs. These SNPs were significantly associated with the PCV2 viral load. Moreover, the haplotype combination was also related to the PCV2 viral load. The haplotype and diplotype analysis also had a significant difference with the PCV2 viral load. Taken together, our results suggest that RGS16 SNPs considerably affect the PCV2 viral load.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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