As a part of the on-going effort to conserve endangered Scrophularia takesimensis Nakai in Korea, its genetic structure and diversity from 3 population, consisted of 14 subpopulations in Ulleung Island were analyzed using RAPD band patterns. Out of 60 primers tested, 33 generated amplified bands with its genome, including 149 polymorphic and 67 monomorphic bands. The highest number (146) was found in northern population, especially, 64 in HY subpopulation; the smallest (40) in eastern population. An examination of its genetic structure with AMOVA revealed that about 60% of all variations could be assigned to among subpopulations within populations. Population differentiation among populations and subpopulations is seriously going now because of habitat fragmentation due to human activities, such as road and small port construction. Although the habitats of S. takesimensis in Ulleung Island, Korea are disappeared at an alarming rate, significant levels of genetic variation still exist at species level, and population level, especially northern population. Therefore, three conservation strategies should be needed urgently; 1) preservation of populations as it stands, 2) establishment of recovery plan to connect population and subpopulations genetically, and 3) long-term monitoring.
AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism) analysis was conducted to cultivars of tobacco, Nicotiana tabacum in order to select the cultivar-specific markers. AFLP results using 12 primer sets revealed genetic diversity among 12 field grown tobacco cultivars. Polymorphic fragments amplified by PCR was purified and cloned to identify their nucleotide sequences. From the sequences of them, 40 primer sets were designed to select cultivar-specific markers. When genomic DNA isolated from tobacco were used as PCR template, a set of primers, BrSF/BrSR showed Burley-specific band patterns. The results indicate that AFLP technique used in this experiments is useful for identifying tobacco cultivars in a rapid manner.
With the aim of inducing mutation in fern Cyrtomium caryoptideum var. coreanum, rhizome segments of In vitro-grown cultures were treated with chemical mutagens such as EMS, NMU and colchicine. Based on regeneration ratios, sensitivities for each treatments were assessed and also optimum treatment condition of each mutagens was explored. Optimum concentration for EMS treatment was considered to be 20 to 50mM and for NMU 5 to 10mM. NMU was found to be more effective in inducing chlorophyll and morphological variations than EMS. The RAPD were performed to check the genetic modification of phenotypical variants. As a result, polymorphic DNA band patterns between wild type and variants were observed by two 10-mer primers.
Amoeba sp. was cultured under the light and the dark conditions, and the activity of phosphatases was investigated. There was a linear correlation between the early reaction time and the activity of phosphatases when phosphatases were incubated at 30℃. Then the activity of acid phosphatase was about 2 times higher than that of alkaline phosphatase. The activity of phosphatase was optimal at pH 5.0 in acidic part and at pH 8.0 in alkaline part, respectively. The optimal temperature of phosphatases was near the 40℃. The isozyme patterns of cytoplasmic acid phosphatase were compared with those of membraneous one. Both the isozyme patterns were shown to bo polymorphic on the polyacyamide gel, but different band patterns were observed in the isozymes of the cytoplasmic and the membraneous acid phosphatases. The number of Amoeba sp. under the light stimulus for 48 hours decreased negative exponentially from the illumination. The activity of acid and alkaline phosphatases under the illumination of light incresed 1.7 and 1.5 times higher, respectively, than the activity of those under the dark condition. This result apperars to be related to the mechanism of the autophosphorylation.
Kim, Jong-Yeob;Choi, Sun-Young;Choo, Beng-Gil;Ryu, Jeom-Ho;Kwon, Tae-Ho;Oh, Dong-Hun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.8
no.3
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pp.266-273
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2000
The optimal conditions of PCR components for the random amplification of genomic DNA were $20\;ng/20{\mu}l$ in template DNAs, 250 mM in dNTP, 10 pM in primer $1.0unit/20{\mu}l$ in Taq DNA polymerase respectively with the annealing temperature at $36^{\circ}C$, respectively. Twelve local lines were divided into 3 groups by the coefficients of 107 polymophic bands by Jaccard and Nei. The coefficients value of group I including Chongup # 1, Seochon # 1, Andong # 1, Chinan # 1, and Danyang # 1 ranged from 0.27 to 0.05 and those of group II including Suwon # 2, Chunchon # 1, Japan # 3, Danyang#2 and $F_1$ (Variety Jihwang $1{\times}$ Seohchon) ranged from 0.29 to 0.11. While, Jihwang 1 originated from China and Japan # 1 in group III showed a distant genetic relationship to Korean local lines.
DNA polymorphisms were analyzed for 8 clones of the green peach aphid, Myzus persicae Sulzer, by random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction (RAPD-PCR). The insect has different host preferences and was even classified into two different species, M. persicae Sulzer and Myzus nicotinae Blackman by their morphological characters, but this point is still in arguement. To identify the differences between two types of the green peach aphid by RAPD-PCR, the template DNA was extracted from 4 clones each of tobacco-feeding and non-tobacco-feeding forms and one hundred primers of 10-nucleotideslong were tested in PCR. The amplified DNAs were analyzed by agarose gel electrophoresis. Eighty-three primers gave amplified DNA fragments with 1 to 22 in number and 500 to 20,000 base pairs in length, but no amplification was observed in the other 17 primers. The average number of fragment per each amplification was about 13. In the case of 82 out of 83 random primers, band patterns of amplified DNA were identical among 8 clones, even though some differences were noticed in the intensity of specific bands. Polymorphism was detected by only one primer within the tobacco-feeding forms, but not between the two host types. The results did not detect any relationship between RAPD polymorphism and their host preference.
In order to induce the mutants of Gentiana axillariflora Leveille, nodes were cultured on Schenk and Hilderbrandt (SH) medium containing TDZ 2 mg/L, BAP 2mg/L, GA3 0.5 mg/L and 0.1 mg/L NAA and each mutagen of ethylmethanesulfate (EMS), colchicine, N-methyl-N-nitrosourea (MNU), and sodium azide (NaN$_3$) through filtration. Comparision of morphological characteristics and survival rate in each mutant plants differed depending on mutagen sources and their concentrations. When EMS were treated on nodes, the regenerated plants was thin and albino, regenerated shoots appeared 'erectoides type' and get twisted. The case of colchicine were treated on nodes, the survival rate was from 84% to 97% at ail concentration after 30days but the rate of survival was decreased about 50% at 200 $\mu$M after 60days. The treatment of NaN$_3$200 $\mu$M was not survived. The survival rate was extremely decreased in MNU treatment at 500$\mu$M, according to concentrations two types of leaf characteristic were obtained. Type I of leaf characteristic was modified from oblanceolate to oboid at leaf shape and type II of leaf characteristic was modified from light green to dark violet at leaf color. RAPD analysis was carried out to check the genetic modification of regenerated plants by mutagen treatments. Three polymorphic DNA fragments out of thirty-seven obtained by RAPDs were observed in regenerated plants using 5 decamer primers.
Jo, Ick Hyun;Kim, Young Chang;Kim, Jang Uk;Lee, Seung Ho;Lim, Ji Young;Moon, Ji Young;Noh, Bong Soo;Hyun, Dong Yun;Kim, Dong Hwi;Kim, Kee Hong;Bang, Kyong Hwan
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.22
no.6
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pp.429-434
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2014
This study describes the efficient method for the discrimination of 'Cheonryang' in Panax ginseng Meyer using a STS primer. A total of 208 STS primers were applied to polymerase chain reaction (PCR) amplification for discriminating Korean ginseng cultivars. Co-dominant polymorphic band patterns were generated with two primers, MFGp 0019, MFGp 0248, and successful identification of 'Cheonryang' was achieved from out of 11 Korean ginseng cultivars. Two different sizes of DNA band patterns were detected with MFGp 0019 primer. Ten Korean ginseng cultivars shared the same size of amplified DNAs (389 bp), but 'Cheonryang' showed a different size. Thus 'Cheonryang' can be efficiently distinguished from the other ten ginseng cultivars by using the MFGp 0019 primer. In the case of MFGp 0248, two different sizes of DNA band patterns were detected in the eleven ginseng cultivars. Same sized amplified DNA bands (307 bp) were shown in five cultivars (Chunpoong, Gopoong, Kumpoong, Cheongsun, Sunhyang) and 254 bp sized DNA bands were identified in the other 6 cultivars (Yunpoong, Sunpoong, Sunun, Sunone, Cheonryang, K-1). In conclusion, the two STS primers, MFGp 0019, and MFGp 0248, provide a rapid and reliable method for the specific identification of 'Cheonryang' cultivar from a large number of samples.
We have attempted to verify 30 strains of Hypsizigus marmoreus from various mushroom stocks in Korea using random amplified polymorphic DNA (RAPD) methodology. Chromosomal DNAs of them were extracted and subjected to PCR analyses with 3 random primers. Each PCR produced approximately 30 distinct PCR bands with the size from 200 bp to 3000 bp. A dendrogram was acquired using the unweighted pair-group method with arithmetic average (UPGMA) clustering methodology on the basis of the DNA band pattern. The analysis revealed that 30 strains of H. marmoreus were clustered into two distinct clusters. Cluster 1 contained 3 subgroups while the cluster 2 consisted of rather diverse strains. Interestingly, Hm3-10, a wild strain collected from Deog-Yu mountain, was not included in either clusters, indicative of uniqueness of this strain. We nextly attempted to develop strain-specific DNA markers to verify a specific strain. A unique band in the RAPD gel lane of Hm0-4 was extracted and its sequence was determined. PCR with a primer set from the determined sequence revealed that the primer set gave a 250 bp DNA band only for Hm0-4, indicating that this approach works well for the strain-specific identification of H. marmoreus.
Aegilops genus is known to include the donor species of the Band D genome of the bread wheat(ABD). An effort to establish a better strategy for phylogenetic relationships about Aegilops polyploids by AFLPs(Amplified Fragment Length Polymorphisms) was conducted using the 19 Aegilops sPP. and T. aestivum. The 207 polymorphic bands from the amplified products on the 6% acrylamide denaturing sequencing gels were obtained with the 7 AFLP primer combinations, and used to account for the genetic similarities and cluster analysis using NTSYS program. According to the genome analysis, the $M^h$-genome of Ae. heldreichii was estimated as an intermediate genome between the M-genome of Ae. comosa and N-genome of Ae. uniaristata and supposed to be incorporated in the establishing process of UM-genome as a possible diploid donor. And Ae. ventricosa(DN) was more close to Ae. umbellulata(U) than Ae. squarrosa(D). The close relationship between Ae. squarrosa and T. aestivum was perceived as a diploid donor of D-genome. As for the polyploid species, hexaploid Ae. triaristata was more closely related to Ae. columnaris rather than tetraploid Ae. triaristata. The clustered groups were, basically same to the previous Gihara's sections based on phenotypes and pairing analysis of interspecific hybrids. AFLP was evaluated as an efficient and powerful method in the genome evaluation of closely related species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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