배추는 재배 온도에 따라 수확량과 품질에 많은 영향을 받을 수 있다. 고온 스트레스 저항성 배추품종 육성을 위해 본 연구는 스트레스 저항성에 관련이 있다고 알려진 trehalose 유전자 관련 다형성 마커를 개발하였다. 아라비돕시스 trehalose 합성 유전자와 유사한 총 28개의 배추 EST를 NCBI database에서 찾고 고온에 상대적으로 약한 지부품종과 고온에 잘 견디는 품종인 권심을 대상으로 다형성을 조사하였다. 이 중 10개의 EST에서 insertion/deletion 또는 single nucleotide polymorphism을 발견하여 이를 바탕으로 쉽게 이용이 가능한 10개의 다형성 PCR 마커를 개발하였다. 본 연구에서 개발된 trehalose 분자마커는 앞으로 배추 작물에서 환경 스트레스 저항성과 유전적 연관성을 확인하는데 이용될 수 있고 MAS를 이용한 품종육성에 이용될 수 있다고 기대된다.
The common split-gilled mushroom, Schizophyllum commune is found throughout the world on woody plants. This study was initiated to evaluate conditions for favorable vegetative growth and to determine molecular phylogenetic relationship in twelve different strains of S. commune. A suitable temperature for mycelial growth was obtained at $30^{\circ}C$. This mushroom grew well in acidic conditions and pH 5 was the most favorable. Hamada, glucose peptone, Hennerberg, potato dextrose agar and yeast malt extract were favorable media for growing mycelia, while Lilly and glucose tryptone were unfavorable. Dextrin was the best and lactose was the less effective carbon source. The most suitable nitrogen sources were calcium nitrate, glycine, and potassium nitrate, whereas ammonium phosphate and histidine were the least effective for the mycelial growth of S. commune. The genetic diversity of each strain was investigated in order to identify them. The internal transcribed spacer (ITS) regions of rDNA were amplified using PCR. The size of the ITS1 and ITS2 regions of rDNA from the different strains varied from 129 to 143 bp and 241 to 243 bp, respectively. The sequence of ITS1 was more variable than that of ITS2, while the 5.8S sequences were identical. A phylogenetic tree of the ITS region sequences indicated that the selected strains were classified into three clusters. The reciprocal homologies of the ITS region sequences ranged from 99 to 100%. The strains were also analyzed by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) with 20 arbitrary primers. Twelve primers efficiently amplified the genomic DNA. The number of amplified bands varied depending on the primers used or the strains tested. The average number of polymorphic bands observed per primer was 4.5. The size of polymorphic fragments was obtained in the range of 0.2 to 2.3 kb. These results indicate that the RAPD technique is well suited for detecting the genetic diversity in the S. commune strains tested.
감자전분젤을 매개로 한 수평식 전기영동장치를 이용하여 은행나무(Ginkgo biloba L.)의 megagametophyte로부터 15개 동위효소의 변이가 분석되었다. 분석된 효소 가운데서 ADH, G6PD, IDH, MPI, UGPP의 5개 효소에서는 변이가 나타나지 않았으며, 나머지 10개 효소의 11개 동위효소 구역(ACON-A, FST-B, GDH-A, GOT-B, MDH-B, MDH-C, MNR-A, PGI-B, PGM-A, 6PGD-B, SKDH-B)에서 다형성이 관찰되었다. 이중 MDH-B를 제외한 모든 구역에서 관찰된 동위효소 변이들이 1 : 1의 독립적 분리비를 보임으로써, 이들이 단일 유전자좌에 의해 조절되는 공우성 대립유전자임을 추정할 수 있었다. 한편, 동위효소 유전자좌의 3가지 조합(ACON-A : MDH-B, GOT-B : PGI-B, MNR-A : SKDH-B)에서 약한 연관관계가 관찰되었으며, 이들의 재조합 비율은 0.38-0.40로 계산되었다 (p<0.05).
꽃도라지(Eustoma grandiflorum) 조직배양시 발생한 5개의 변이체와 모본을 이용하여 PCR 반응으로 나타난 RAPDs 밴드 형태로 유전적인 변이 유무를 확인하려고 하였다. 6개의 분류군은 엽수, 옆모양, 줄기직경, 초장 그리고 옆면적과 같은 형태적인 특징이 달랐다. 실험한 20개의 임의 primers 중에서 모본과 변이체에서 모두 밴드를 나타낸 5개 PCR 반응에서 증폭밴드는 총 34개였으며 64.7%의 다형성을 나타냈다. 밴드의 유무를 코드화하여 NTSYS-PC (ver. 1.5)분석으로 나타난 변이체들의 유전적인 거리값의 차이가 변이체인 5개체와 정상 식물체간 비유사성 계수는 0.72에서 0.91로 밀접한 유사성을 나타냈으며 거리값이 0.79에서 두 그룹으로 나뉘어졌기 때문에 변이체의 형태적인 차이와 거의 일치되는 유전적인 차이를 나타냈다.
Genetic heterogeneity of the tropical abalone, Haliotis asinina was examined using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and microsatellite analyses. One hundred and thirteen polymorphic RAPD fragments were generated. The percentage of polymorphic bands of H. asinina across overall primers was 85.20%. The average genetic distance of natural samples within the Gulf of Thailand (HACAME and HASAME) was 0.0219. Larger distance was observed when those samples were compare with HATRAW from the Andaman Sea (0.2309 and 0.2314). Geographic heterogeneity and $F_{ST}$ analyses revealed population differentiation between H. asinina from the Gulf of Thailand and the Andaman Sea (p < 0.0001). Three microsatellite loci (CUHas1, CUHas4 and CUHas5) indicated relatively high genetic diversity in H. asinina (total number of alleles = 26, 5, 23 and observed heterozygosity = 0.84, 0.42 and 0.33, respectively). Significant population differentiation was also found between samples from different coastal regions (p < 0.0001). Therefore, the gene pool of natural H. asinina in coastal Thai waters can be genetically divided to 2 different populations; the Gulf of Thailand (A) and the Andaman Sea (B).
The expression of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) is regulated by various spliced first exons (exon 1a-1i), sharing differentially common exon 2 in diverse human tissues. The highly complex structure and regulation of human nNOS gene gave limitations of information for the precise mechanism of nNOS regulation. In the present study, we report that the repeats of polymorphic dinucleotides $(GT)^nA(TG)^n$ repeats located in just upstream to the exon 1f in human nNOS gene play suppressive role in transcription, as shown in the characteristics of Z-DNA motif in other genes. In neuronal and trophoblast cells transfected transiently with luciferase construct without dinucleotide repeats at the 5'-flanking region of exon 1f in nNOS gene, the luciferase activity was increased markedly. However, the presence of the dinucleotide repeats dramatically suppressed the luciferase activity to the basal level, and which was dependent on the length of $(GT)^n$ and $(TG)^n$ repeats. More importantly, we found the polymorphisms in the length of dinucleotide repeats in human. Furthermore, we show for the first time here that there is a significant association of the lengths of polymorphic dinucleotide $(GT)^n$ and $(TG)^n$ repeats with the risk of schizophrenia.
Korean cultivated bramble, which is known as Bokbunja-ddal-gi is regarded to be originated from Korea native Rubus coreanus. However, little scientific evidence and significant morphological differences between Korean cultivated bramble(KCB) and R. coreanus throw doubt on the ancestry of KCB. This study was carried out to obtain phylogenetic information on KCB by comparing its nuclear genomic background with those of R. coreanus, black(R. occidentalis) and red(R. idaeus) raspberry, blackberry(R. lanciniatus) and R. crataegifolius. A total of 99 random amplified polymorphic DNA(RAPD) markers were generated and used for phylogenetic analysis of 76 Rubus accessions. Accessions of each species were grouped into each distinct subclade by the RAPD markers at a similarity coefficient of about 0.59. The KCB subclade formed a clade with R. occidentalis and R. crataegifolius subclades at a similarity coefficient of 0.47. The R. coreanus subclade formed a clade with R. idaeus, R. lanciniatus and R. crataegifolius subclades at a similar similarity coefficient. Only one KCB accession from Hoengsung was included in R. coreanus subclade. The accession shows leaf and flower characteristics different from the rest of the KCB accessions. The phylogenetic relationship inferred from the RAPD markers suggests that the nuclear genomic background of KCB accessions which show morphological similarity to black raspberry is more closely related to black raspberry than to R. coreanus. This brings about the need for close scientific evaluations on the ancestry of KCB at both morphological and molecular levels.
Kumar, S. Naveen;Jayashankar, M.R.;Nagaraja, C.S.;Govindaiah, M.G.;Saravanan, R.;Karthickeyan, S.M.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제19권5호
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pp.622-626
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2006
Molecular characterization of Hallikar, the native cattle breed of Karnataka, was undertaken using 19 cattle specific, highly polymorphic microsatellite markers recommended by FAO. The genomic DNA was subjected to PCR amplification and alleles were resolved through six per cent denaturing PAGE with a 10 bp DNA ladder followed by silver staining. Genotyping of animals was done based on allele size. The number of alleles ranged from three to nine with allele sizes ranging from 102 bp to 294 bp. These alleles were distributed in the frequency range between 0.0306 and 0.8673 in the population. The mean observed number of alleles was $6.368{\pm}1.4225$. The mean observed and expected heterozygosities were $0.7515{\pm}0.1734$ and $0.7850{\pm}0.1381$, respectively. The high heterozygosity observed implies presence of higher genetic variability within Hallikar breed. The PIC (Polymorphism Information Content) values ranged from 0.2322 (ETH152) to 0.8654 (ETH225). The percentage of polymorphic loci obtained was 100 as all the 19 microsatellite markers were found to be polymorphic. Except for ETH152, all the other loci had high PIC values, indicating that these markers are highly informative for characterization of Hallikar breed. The population was tested for Hardy-Weinberg equilibrium at 19 microsatellite loci, and at 74 per cent of the loci the population was found to be in disequilibrium.
Myint, Si Lhyam;Shimogiri, Takeshi;Kawabe, Kotaro;Hashiguchi, Tsutomu;Maeda, Yoshizane;Okamoto, Shin
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제23권9호
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pp.1137-1144
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2010
In this study, to examine genetic variability within a breed and genetic relationships between populations/breeds, we genotyped 606 birds from seven Japanese native chicken breeds at seven polymorphic loci of egg white proteins and compared those with Asian native chicken populations and commercial breeds. Genotyping of the Japanese native breeds showed that ovalbumin, two ovoglobulins and ovotransferrin were polymorphic, but ovomacroglobulin, ovoflavoprotein and lysozyme were monomorphic. The proportion of polymorphic loci ($P_{poly}$) and average heterozygosity ($\bar{H}$) within a population ranged from 0.286 to 0.429 and from 0.085 to 0.158, respectively. The coefficient of gene differentiation ($G_{ST}$) was 0.250 in the Japanese native chicken breeds. This estimate was higher than that of Asian native chicken populations ($G_{ST}$ = 0.083) and of commercial breeds ($G_{ST}$ = 0.169). Dendrogram and PCA plot showed that Satsuma-dori, Jitokko, Amakusa-daio and Hinai-dori were closely related to each other and grouped into Asian native chickens and that Tsushima-jidori, Nagoya and Chan (Utaichan) were ramified far from other Japanese native chicken breeds. The egg white protein polymorphisms demonstrated that the population differentiation of the seven Japanese native chicken breeds was relatively large.
국내외에서 재배되는 12종의 마늘을 수집하여 총 143개의 임의의 primer를 이용하여 RAPD분석을 실시한 결과 55개의 primer로부터 종간에 다형성을 보이는 DNA밴드가 나타났다. RAPD에 의해 다형성을 보인 55개의 primer에서 확인된 총 DNA 밴드 수는 187개였으며, 그 중 128개(68.5%)가 12종의 마늘 지방종간에 다형성을 나타내었다. PCR에서 다형성을 보인 DNA 밴드를 대상으로 집단분석을 실시한 결과 유전적 유사도가 0.71이상에서 3개의 그룹으로 나누어 졌는데, 제1그룹은 의성, 서산, 삼척, 예천-A, 예천-B종, 의성노랑, 정선, 남도, 단양 및 육백종 등으로 대서종을 제외한 한국의 재배종이 모두 포함되었으며, 제2그룹과 제3그룹은 각각 몽골종과 대서종 단독으로 나누어졌다. 종 특이적으로 DNA밴드를 나타내는 primer를 분석한 결과 21개 primer에서 30개의 DNA밴드가 어느 특정의 지방종에만 나타나는 것으로 확인되어, 지방종 마늘 10종을 구분할 수 있는 30개의 RAPD 마커가 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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