This study was carried out to develop an effective liquid-phase double antibody enzyme immunoassay for determining of progesterone. The optimum conditions of assay system, 1st and 2nd antibodies, enzyme conjugate, and time reaction were invested. The bovine plasma progesterone level in dairy cattle and korean native bulls were also analyzed. The results obtained were as follows; 1. The reproducibility of petroleum ether was superior to that of ethyl ether as extract solvent of progesterone in plasma. 2. The optimum dilution rate of 1st and 2nd antibody was 30,000 and 10 times, respectively. Affer the reaction of enzyme conjugate to progesterone 1st antibody, and then 2nd antibody competition reaction was enough for over 1hr. 3. Average plasma progesterone level in 4 pregnant and 9 nonpregnant Holstein was $2.5{\pm}0.5$ and $0.7{\pm}0.2ng/m{\ell}$, respectively. Average plasma progesterone level of 10 Korean native bulls was $0.1{\pm}0.001ng/m{\ell}$ From these results, by using liquid phase double antibody enzyme immunoassay for progesterone is applicable to detect of early pregnancy diagnosis, factorial analysis of reproductive disorder, and also reproductive physiological function such as monitoring of cyclicity during the post-partum period.
Park, Chang-Joon;Lee, Sang-Ho;Chung, Koo-Soon;Lee, Kwang-Woo
Journal of the Korean Chemical Society
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v.37
no.9
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pp.800-805
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1993
An analytical method has been developed to determine trace elements in biological samples. The biological samples are added to a laboratory-bulit Teflon bomb together with nitric acid-hydrogen peroxide mixture and enriched stable isotopes. The samples are decomposed in a microwave oven. The decomposed sample solutions are analyzed by isotope dilution inductively coupled plasma mass spectrometry. The analytical results of the biological samples agree well with the reference values.
a-SiC has been thought as an ideal candidate for conventional silicon at many applications. However, the uniformity problem of deposition has been a obstacle for conventional use of a-SiC:H films. a-SiC:H films were deposited on (100) silicon wafer by RPECVD system in various temperature. HMDS and $H_2$ gas were used as a precursor and a carrier gas, respectively. The flow rate of HMDS source and $C_2H_2$ dilution gas was fixed in order to study the carbon effect on the film stoichiometric and bonding properties. The plasma power varied from 200 to 400W. We used three types of source delivery line to control the uniformity and film properties of deposited film. We showed that the change of source delivery line has effect on the film uniformity of deposited film and this change of line did not affect on film properties. Also, the change of deposition conditions has effect on the film uniformity.
Vertically aligned carbon nanotubes on nickel coated glass substrates were obtained at low temperatures below 600$\^{C}$ by plasma enhanced hot filament chemical vapor deposition where acetylene gas was used as the carbon source and ammonia gas was used as the dilution gas and catalyst. The diameters of the nanotubes decreased from 96 m to 41 m as NH$_3$/C$_2$H$_2$ ratio increased from 2:1 to 5:1. Total flow rate of input gases with constant NH$_3$/C$_2$H$_2$ ratio did not change the diameter of carbon nanotubes. No growth of the carbon nanotubes was observed with only C$_2$H$_2$ nor N$_2$ instead of NH$_2$. G line and D line in Raman spectra were observed, which implies that there were many structural defects in carbon nanotubes.
Objective: The aim of this study was to determine the effects of melatonin and selenium in freezing extenders on frozen-thawed rat sperm. Methods: Semen samples were collected from 20 adult male Wistar albino rats. Following dilution, the samples were divided into six groups: four cryopreserved groups with 1 mM and 0.5 mM melatonin and selenium supplements, and two fresh and cryopreserved control groups. The rapid freezing technique was used to freeze the samples. Flow cytometry was used to assess plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential, and DNA damage, while computer-assisted sperm analysis was used to assess motility. Results: Total motility was higher in the 1 mM melatonin supplementation group than in the cryopreserved control group (mean±standard error of the mean, 69.89±3.05 vs. 59.21±1.31; p≤0.05). The group with 1 mM selenium had the highest plasma membrane integrity (42.35%±1.01%). The cryopreserved group with 0.5 mM selenium had the highest mitochondrial membrane potential, whereas the cryopreserved control group had the lowest (45.92%±4.53% and 39.45%±3.52%, respectively). Conclusion: Cryopreservation of rat semen supplemented with 1 mM melatonin increased sperm motility after freeze-thawing, while supplementation with 0.5 mM selenium increased mitochondrial activity.
Competitive direct ELISA was developed to detect gentamicin residues. Mice immunized with gentamicin-keyhole limpet hemocyanin (KLH) conjugate developed good antiserum titers, which gradually increased with booster injections, indicating immunization was successfully processed. Monoclonal antibody against gentamicin was prepared using hybridoma cells cloned by limit dilution of fused cells. IgG was purified from ascites fluid of hybridoma cell-injected mice through ammonium sulfate precipitation and Sephadex G-25 gel filtration. After the gel filtration, fractions of high antibody titer were further purified through affinity chromatography on protein A/G column. Monoclonal antibody against gentamicin was confirmed as IgG1, which has kappa light chain. Cross-reactivities ($CR_{50}$) of gentamicin monoclonal antibody to other aminoglycosides (kanamycin, neomycin, and streptomycin) were less than 0.005%, indicating the monoclonal antibody was highly specific for gentamicin. Standard curve constructed through competitive direct ELISA showed measurement range (from 80 to 20% of B/$B_0$ ratio) of gentamicin was between 1 and 40 ng/ml, and 50% of B/$B_0$ ratio was about 4 ng/ml. The gentamicin concentration rapidly increased to 1,300 ng/ml after the intramuscular administration up to 2 h, then sharply decreased to less than 300 ng/ml after 4 h of withdrawal, during which the elimination half-life ($t_{1/2}$) of gentamicin in the rabbit plasma was estimated to be 1.8 h. Competitive direct ELISA method developed in this study using the prepared monoclonal antibody is highly sensitive for gentamicin, and could be useful for detecting gentamicin residues in plasma of live animals.
This experiment was carried out to determine the progesterone concentration of bovine plasma by liquid phase double antibody enzyme immunoassay. The optimum conditions of assay-system, enzyme conjugate and gelatin were invested. The sensitivity, recovery rate and reproducibility by this assay were also analyzed. The results obtained were as follows: 1. The suitable supplementation level of gelatin was 0.2%. As the gelatin level increased to 1%, coefficient variation of interassay was shown to be irregular. 2. The optimum dilution rate of enzyme conjugate was 30 times. Enzyme activity was greatly fluctuated depending on the minor condition of enzyme conjugate technique. Therefore, it was considered to be checked when determined. 3. The sensitivity of the assay was 12 pg/tube. 4. Recovery rate was decreased when the amount of sample was too little or too much, but the recovery rate was high as 97.8% when the amount of sample between 50 and $200{\mu}l$. 5. Mean intra-assay and inter-assay coefficient of variation was 4.5% and 5.9%, respectively. By using liquid phase double antibody enzyme immunoassay, progesterone in plasma can be detected, and also this assay system is applicable to study on physiological function of progesterone and to diagnosis of reproductive disorders.
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2008.04a
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pp.57-58
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2008
Microcrystalline (${\mu}c$) silicon thin films were prepared on glass by plasma-enhanced-chemical-vapor-deposition (PECVD) at various substrate temperature, and dilution ratio of $H_2$ with $SiH_4$. The structural and optical properties of. the ${\mu}c-Si$ thin films were investigated using XRD and UV-VIS spectrophotometer. The ${\mu}c-Si$ thin film with 42 nm grain size was grown at optimal condition of 2.5 Torr, spacing between electrodes of 3cm, deposition time of 3000s, RF power of 200W, substrate temperature of $350^{\circ}C$, $SiH_4$ ($20%SiH_4$+80%He) of 50sccm, and $H_2$ of 100sccm.
플라즈마에 의한 표면경화법(이하 PTA 육성용접이라고 함)은 개발된 이후 필요한 변수가 너무 많아 오랫동안 폭넓게 적용이 되지 못하고 있었다. 따라서 아주 우수한 코팅 품질을 필요로 하거나 재료측면에서 다른 방법을 사용할 수 없는 경우에 만 적용이 되어왔다. 그리고 경제성보다는 안정성이 우선적으로 보장 되어야 하는 경우, 예를 들면, 핵시설물, 화학설비 또한 엔진설비와 같은 곳에 사용이 되었다. 그 러나 최근에 들어서 특별히 microprocessor와 제어기술의 적용이 적은 비용으로도 가능해지면서 새로운 장치가 개발되었고, 많은 연구에 의하여 코팅의 특성에 미치는 영향을 파악하게 되므로써 PTA 육성용접이 신뢰성이 있으며 다른 육성방법에 비해서 우수한 공정으로 자리를 잡게 되었다. 한편 PTA 육성용접은 낮은 dilution, 좁은 열 영향부 그리고 상대적으로 높은 적층율의 특성이 있어 큰 부피를 코팅하거나 중요한 부품에 적용하기에 적합하다. PTA 장치가 반자동 또는 완전 자동화되면서 상대적으로 운용이 쉬워져 이러한 적용성은 더욱 확대되고 있다. PTA 육성용접은 Table 1에서 보는 바와 같이 다른 표면 경화법에 비하여 투자비용은 많이 들더라도 그 특성에 있 어서는 우수하다고 할 수 있다.
A certified reference material (CRM) for the analysis of nutrient elements in an edible mushroom (Ganoderma lyceum) powder has been developed (KRISS CRM 108-10-011). The mass fractions of calcium (Ca), iron (Fe), and zinc (Zn) were measured by isotope dilution inductively coupled plasma mass spectrometry (ID ICP/MS). To dissolve the fungi cell wall of mushroom consisted of chitin fibers, sample preparation method by single reaction chamber type microwave-assisted acid digestion with acid mixtures was optimized. The mean measurement results obtained from 12 sample bottles were used to assign as the certified values for the CRM and the between-bottle homogeneities were evaluated from the relative standard deviations. The certified values were metrologically traceable to the definition of the kilogram in the International System of Units (SI). This CRM is expected to be used for validation of analytical methods or quality control of measurement results in analytical laboratories when they determine the mass fractions of elements in mushroom or other similar samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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