식용 또는 약용으로 그 이용가치를 충분히 가지고 있는 강활의 미숙화서, 줄기, 그리고 엽병으로부터 캘러스 유도와 식물체 발생에 관하여 실험한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 캘러스 유도와 증식정도는 미숙화서를 2,4-D 2mg/l 첨가배지에 치상했을 때 가장 양호하였 다. 2. 2,4-D 1mg/l와 2mg/l 첨가배지에서 미숙화서로부터 유도된 담황색의 유연한 캘러스 표면에 희고 단단한 embryogenic 캘러스가 발생하였고, 그외 배지에서는 발생하지 않았다. 3. 줄기 발생은 2,4-D 0.1mg/l와 Kinetin 1mg/l 그리고 2,4-D 0.5mg/l와 Kinetin 2mg/l를 각각 조합한 배지에서 가장 효율적이었다. 4. 캘러스 유도와 식물체 재생에 가장 적합한 재료는 미숙화서라 생각된다.
Efficient transformation and regeneration methods are a priority for successful application of genetic engineering to vegetative propagated plants such as grape. In this study, methods for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation and plant regeneration of grapevine (Vitis vinifera) were evaluated. Tamnara, Heukgoosul, Heukbosek, Rizamat were co-cultivated with Agrobacterium strains, LBA4404 containing the vector pBI121 carrying with CaMV 35S promoter, GUS gene as reporter gene and resistance to kanamycin as selective agent. Seven percent of the maximum regeneration frequency was obtained from co-cultivated with explants from Rizamat with LBA4404 strain on selection medium with kanamycin. The addition of acetosyringone, 200 ${\mu}m$ in virulence induction step was a key factor for successful GUS reporter gene expression in grapevine transformation. Transgenic plants showed resistance to kanamycin and the GUS positive response in leaf ($T_0$) stem ($T_0$) and petiole ($T_0$).
자엽으로 부터 신초 유기율은 MS기본배지와 MS기본배지에 IAA 0.25mg/L 또는 0.50mg/L과 zeatin 2.0mg/L 또는 4.0mg/L를 단독 및 조합 처리한 배지중에서 M배지에 IAA 0.25mg/L + zeatin 2.0mg/L 첨가된 배지가 63%로 가장 양호하였다. 신초 유기시기는 품종 및 배지에 따라 치상후 9~25일의 차이가 있었는데 MS배지 + zeatin 2.0mg/L + IAA 0.25 mg/L배지에서 영양재래, 풋고추, 342, Kakovskij-A-35, Gris I-A-1가 빠르게 유기 되었으며, MS배지 + BA 2.0mg/L + IAA 1.0mg/L 배지에서 COO485 Long Hot P5-3, Gris I-A-1에서 유기가 빨았다. 신초 유기율도 품종 및 배지에 따라 달랐는데 MS 배지 + zeatin 2.0mg/L + IAA 0.25mg/L 배지에서는 621, 영양재래, Nikko(일광), 적색물고추, Ch-6Num-216, 풋고추, Kakovskij-A-35가, MS배지 + BA 2.0mg/L + IAA 1.0mg/L 배지에서는 Fresno Chile, PI 169126, 적색물고추, PI 297438가 90%이상으로 높았다.
Jaskani Muhammad J.;Raza H.;Khan M. M.;Kwon Sung W.
Journal of Plant Biotechnology
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제6권4호
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pp.247-252
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2004
In vitro cultures of watermelon were treated with antimitotic agent colchicine to induce ploidy alterations, particularly the induction of tetraploids. Explants cotyledon, embryonic end of seed, transverse sections of epicotyl and hypocotyl were cultured on MS media supplemented with BA ($1{\mu}M$) and colchicine ($0.01\%,\;0.05\%\;and\;0.1\%$). Explants were subcultured on colchicine free media after 4 and 7 days. Colchicine had negative effect on in vitro regeneration but this exhibited explants related response. However, hypocotyl section of seedlings induced maximum callus on $0.01\%$ colchicine. Shoot proliferation was more in cotyledon explants cultured on colchicine ($0.01\%$) for four days. Maximum root induction and root number were recorded in embryonic end explants. Overall, cotyledon and embryonic end explants, and low colchicine concentration ($0.01\%$) was found optimal in watermelon regeneration.
This study was conducted to establish mass propagation system from the axillary bud culture of chrysanthemum zawadskii H. which was used as material of medicinal plants. Shoot egeneration was better on MS medium with NAA and BA. The optimum concentraions of growth regulator for shoot regeneration differed depending on accessionsof C. Zawadskii. Shoot regeneration in Keungucheolcho was better on MS Medium with NAA 0.01mg/1 and BA 0.1mg/1 while Hyangrobonggucheocho was better with NAA 0.1mg/1and BA 0.3mg/1. Addition of NAA into medium was effective for induction of root from shoots regenerated. Shoot multiplcation was more effective when 10mg/1 spermine was added into medium than when other polyamines were treated ino medium . Randomly and specifically amplified polymorphic DAC banding patterns based on polymerase chain reaction (PCR) analysis were used to assess the genetic variation of plants regenerated from in vitro culture.
To establish the optimum condition for plant regeneration from somatic embryos of Acanthopanax sessiliflorus Rupr. et Maxim, a medicinal plant, somatic embryos were induced from zygotic embryo-derived embryogenic callus in hormoen-free MS medium. To induce plantlet conversion, cotyledonary somatic embryos were cultured on MS solid medium with GA$_3$at various concentrations (0~10 mg/L) for three weeks. Plantlets were transferred to 1/3 MS solid medium with 0.5% charcoal for 7 weeks. Stem length was increased proportionally to the concentration and treatment period of GA$_3$. Also, the highest leaf width (8.9 mm) and leaf number (2.84) of plantlet were obtained when plantlets were converted on 5,10 mg/L GA$_3$pretreatments, respectively. The highest plant conversion frequency (66.7%) was obtained when the somatic embryos were cultured on medium containing 5 mg/L GA$_3$ for 3 weeks and then were transferred to 1/3 MS medium with 0.5% charcoal. The highest survival rate of soil transfer was 90% when plantlets were regenerated on medium with 5 mg/L GA$_3$ for 3 weeks and then transferred to plastic pots containing vermiculite and sand mixture for 4 weeks.
A simple, high-frequency and reproducible protocol for induction of adventitious shoot buds and plant regeneration from leaf-disc cultures of Jatropha curcas L. has been developed. Adventitious shoot buds were induced from very young leaf explants of in vitro germinated seedlings as well as mature field-grown plants cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with thidiazuron (TDZ) ($2.27{\mu}M$), 6-benzylaminopurine (BA) ($2.22{\mu}M$) and indole-3-butyric acid (IBA) ($0.49{\mu}M$). The presence of TDZ in the induction medium has greater influence on the induction of adventitious shoot buds, whereas BA in the absence of TDZ promoted callus induction rather than shoot buds. Induced shoot buds were multiplied and elongated into shoots following transfer to the MS medium supplemented with BA ($4.44{\mu}M$), kinetin (Kn) ($2.33{\mu}M$), indole-3-acetic acid (IAA) ($1.43{\mu}M$), and gibberellic acid ($GA_3$) ($0.72{\mu}M$). Well-developed shoots were rooted on MS medium supplemented with IBA ($0.5{\mu}M$) after 30 days. Regenerated plants after 2 months of acclimatization were successfully transferred to the field without visible morphological variation. This protocol might find use in mass production of true-to-type plants and in production of transgenic plants through Agrobacterium/biolistic-mediated transformation.
An efficient method of shoot regeneration of peanut is described. In vitro shoot organogenesis from the callus of cotyledon explants of Arachis hypogaea L. was stimulated by addition of Adenine sulphate (Ads) along with 6 - benzylaminopurine (BAP) and - napthalene acetic acid (NAA). Ads (13 ${\mu}{\textrm}{m}$) had a stimulatory effect on shoot bud differentiation when combined with BAP (13 ${\mu}{\textrm}{m}$) and NAA (2 ${\mu}{\textrm}{m}$). Shoot organogenesis was markedly higher (92%) from callus induced on Ads, BAP and NAA combined media than from those formed by the individual supplementation of Ads or BAP with NAA. The shoots elongated on the media with GA$_3$ (1 ${\mu}{\textrm}{m}$). Elongated plantlets rooted with MS media containing IBA (9 ${\mu}{\textrm}{m}$).
포인세티아식물체의 줄기조직을 이용한 재분화조건을 확립하였다. MS배지에 종류 및 농도별 식물성장 조절제를 첨가하여 포인세티아의 잎, 줄기, 엽병조직으로부터의 배구조의 발생을 조사하였다. 잎과 엽병조직에서는 callus의 형성은 실험조건에서 매우 활발하였으나 배구조로의 발달은 전혀 이루어지지 않았다. 줄기조직의 경우에서는 1.5 mg/L의 BA가 첨가되는 경우 6-8주 정도의 경과 후 엽초의 발생이 관찰되었다. 이들을 식물생장조절제를 무첨가한 MS고체배지로 이동시 뿌리의 발달이 관찰되었다.
The optimal culture conditions were studied for plant regeneration from mesophyll protoplasts of Solanum sisymbriifolium. Axenic seedlings of S. sisymbriifolium were used as a explant for protoplast culture. Many viable protoplasts were isolated by incubating leaf slices in an enzyme solution containing 0.25% Meicerase and 0.05% Macerozyme for 16 hr at $25^{\circ}C$ without shaking. Protoplast density of $5.0{\times}10^4\;ml^{-1}$ in Kao medium containing 5.0 mg/L NAA, 1.0 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA was optimal for colony formation. Most colonies were formed when protoplasts were cultured at $25^{\circ}C$ after initial culture at $30^{\circ}C$ for one week. On the MS agar medium with 1.0 mg/L zeatin, 38.4% of protoplast-derived calli differentiated shoots. These shoots rooted on 1/2MS medium with 5.0 g/L sucrose and 2.5 g/L gellan gum, and developed into whole plants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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