In virucidal efficacy testing, the chemical inactivation cannot be determined for all viruses due to the difficulties or the inability to culture sufficiently or the risk of exposure to the viruses. Therefore, disinfectants against these viruses could be evaluated by different methods and surrogate viruses are used as alternative. In this study we developed a method for efficacy testing of veterinary disinfectants using one of the candidate surrogate viruses, bacteriophage MS2, as part of the research on the selection of surrogate viruses for efficiency of efficacy testing of veterinary disinfectants. This method is based on the Animal and Plant Quarantine Agency (APQA) guidelines for efficacy testing of veterinary disinfectants. Bacteriophage and disinfectant are reacted in suspension in accordance with the APQA guidelines and then a newly established double agar layer method is applied for the efficacy test. The double agar layer method is summarized as follows: 1) The bottom agar with 1.5% agar is boiled and cooled before poured into petri dishes at volume of 20 mL, and dried under biological safety cabinet. 2) The top agar with 0.7% agar is boiled and kept at 50℃ before E. coli culture was seeded. 3) The serially diluted bacteriophage MS2-disinfectant mixtures 0.05 mL and E. coli host 0.01 mL (OD600 0.2~0.3) are mixed with 5 mL of top agar and incubate them at 50℃ for 5 min for reaction. 4) The resulting mixture is poured over top of a bottom agar plate and rocked sufficiently to ensure that the top agar covers the entire surface of the bottom agar. 5) The double agar layer is then placed under biological safety cabinet to allow the agar layer to solidify and subsequently incubated at 37℃ for 24 hr. 6) Following incubation, the plates may be inspected for plaques and record results.
Kim, Bong-Sub;Yang, Hee-Ji;Lee, Su-Hyun;Ko, Seung-Hyun;Park, Kyo Nam;Choi, Eun Jin;Lee, Seong-Jin
Research in Plant Disease
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v.25
no.4
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pp.233-236
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2019
Citrus vein enation virus (CVEV), which was regulated as a quarantine virus in Korea, was firstly found on Jeju Island in 2017. In February 2018, a survey was carried out to determine the distribution of CVEV in the main commercial areas growing Citrus spp. and Poncirus trifoliata. The survey was performed at 203 groves in the southern Korean Peninsula and Jeju Island. CVEV infection was determined by reverse transcription polymerase chain reaction detection and sequencing. The coat protein (CP) gene sequences obtained from the CVEV-infected samples showed high similarities (more than 98%) to the previously reported CVEV CP sequences. In summary, CVEV was detected in 136 groves (67%), in which 85.4% of Citrus junos and 77.8% of Citrus unshiu were infected by CVEV. In Jeju Island, the infection rate of CVEV was relatively higher (90.6%). Our result revealed that CVEV has spread widely in Citrus and Poncirus in Korea. Based on the result, the Korean quarantine agency decide to exclude CVEV from quarantine in Korea.
Yerim Yu;Yong-Bong Lee;Jae-Kwang Jwa;Hyoung-ho Mo;Heungsik Lee;Youngjin Park
Korean journal of applied entomology
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v.62
no.3
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pp.131-137
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2023
The striped fruit fly, Zeugodacus scutellata (Diptera: Tephritidae), is one of important pests in Cucurbitaceae plants. The cuelure is currently using with various forms for surveillance to the Z. scutellata male as well as Z. cucurbitae, Z. tau, and Bactrocera tryoni, which are categorized as prohibited-quarantine fruit flies in Korea. This study was conducted to verify the attraction effect of applying the cuelure in different forms in field conditions. In this study, we used cuelure by 3 different forms as solid, liquid, and wax to striped fruit flies using the Steiner trap. The trap was placed in two Jeju and one Gyeongbuk regions and the number of attracted flies by each cuelure form is monitored by every 2 weeks during 2021. Attraction effect on Z. scutellata was significant difference by different cuelure forms in two Jeju regions. Liquid and wax forms of cuelure showed high attraction number to the Z. scutellata male compared with solid form when flies were occurred with high population from July to August in Jeju. However, there was no significant difference on attraction effect at low population in Juju and Gyeongbuk by different forms. Based on field assay, liquid and wax form of cuelure are recommended for surveillance against Z. scutellata male. Furthermore, these results also strongly suggest that the attractant, liquid and wax forms of cuelure, could be effective for surveillance to quarantine fruit flies such as Z. cucurbitae, Z. tau, and B. tryoni in Korea.
Standard samples were prepared for this study, and applied for BactoScanTM and BactoCountTM in order for quality control evaluation for total bacterial count in raw milk. Accordingly, the preparation of two lots of standard samples for quality control were lyophilized, which contain Lactobacillus lactis. The standard samples were prepared into three different levels of bacterial counts, those were Low 30,000~40,000, Medium 70,000~90,000, High 150,000~220,000 CFU/mL, respectively. Then, the proficiency tests were performed in total 19 laboratories for measuring total bacterial counts. The total bacterial counts in the standard samples showed 37~42, 82~105, 214~240 CFU/mL in the first lot, and it showed 30~36, 67~75, 131~163 CFU/mL in the second lot in low, medium and high levels, respectively. Based on these results, the absolute values of z-scores of six standard samples in 18 laboratories were ≤2, which means the samples are satisfactory. However, z-score in one laboratory was ≤3, which means the sample is questionable. Using two standard samples, the correlation between BactoScanTM and BactoCountTM was 0.9982, which means the results of total bacterial count measurement of both equipment were equivalent. Therefore, the standard samples manufactured in this study for quality control of total bacterial count using BactoScanTM and BactoCountTM in the raw milk could be applied to proficiency tests.
An attenuated vaccine strain AVR1/08 of Korean respiratory type of infectious bronchitis virus (IBV) was developed by 89th passages of IBV D85/06 strain in chicken eggs. The AVR1/08 strain had higher virus titer at least 20 times ($10^{1.3}$) than the parent virus D85/06 by egg inoculation method. The AVR1/08 strain had a single point mutation (S to Y) at position 56 of spike protein of IBV compared to parent virus IBV D85/06 strain. The mutation was observed consistently at viruses after 47th passage in chicken eggs. The AVR1/08 strain showed no virulence even after 6 passages in chickens and all chickens inoculated induced anti-IBV antibody 14 days after vaccination. The AVR1/08 strain had broad protective efficacy against QX type Korean nephropathogenic virus (Q43/06 strain), KM91 type Korean nephropathogenic virus (KM91 strain) and Korean respiratory virus (D85/06 strain). In contrast, Massachusetts (Mass) type attenuated vaccine strain H120 showed protection of 37.5 to 50% against these three viruses. Our results indicate that the AVR1/08 strain has potential as an attenuated vaccine effective in controlling IBVs circulating in Korea.
Gloeocercospora sorghi caused the zonate leaf spot on sorghum (Sorghum bicolor Moench) in fields in Korea. The zonate spots were conspicuous on sorghum leaves as circular, reddish purple bands alternating with tan or straw-colored areas, which formed a coarsely zonate pattern. The lesions often occurred in semicircular patterns along the margin of leaves. The fungus produced sporodochia on the surface of infected leaves in a moist chamber. The conidia, born in a pinkish to salmon-colored slimy matrix, were hyaline, elongate to filiform, straight or slightly curved, 3- to 17-septate, and of variable lenght (28-197 x 1.6-$3.4\mu\textrm{m}$). G. sorghi isolated from diseased leaves of sorghum caused characteristic reddish-brown water-soaked leaf spots when inoculated to seedlings.
Wheat streak mosaic virus (WSMV), a member of the genus Tritimovirus in Potyviridae, severely impacts wheat and corn seed worldwide, but has yet to be detected in Korea, and hence, every effort should be made to prevent its introduction. To prevent WSMV from entering the country, it is necessary to prepare a specific, sensitive, simple, and fast detection method for routine application to plant quarantine procedures. For this reason, a two-step diagnosis system consisting of RT-PCR and nested PCR is being used for WSMV detection. In addition, a novel positive control was developed for use with the system. WSMV has been detected in seed sweet corn from Japan and seed wheat from USA by a two-step diagnosis system, the details of which are described in this study. After sequence analysis, similarities of 80.6 and 100.0% with other isolates were determined by BLAST. They showed the same topology, which was classified as 4 genotypes by various phylogenetic trees, using a poly protein encoding sequence amplification. In this analysis, WSMV-JSweet-corn2868 (JX845574) is classified as clade B, while WSMV-Uwheat1944-1 (KC754959) and WSMV-Uwheat1944-2 (KC754960) belong to clade D.
Korea is carrying out weed quarantine by plant quarantine regulations including heat-treatment method to prevent the influx of exotic weeds. In order to confirm suitability for current heat-treatment criteria and find field-applicable methods which can completely devitalize quarantine weed seeds, the conditions for heat-treatment with/without 40% relative humidity were studied with 9 species among quarantine weed seeds and one weed species similar to quarantine weed. Dry heat-treatments had been tested under various temperatures and time conditions. All seeds were dead at the conditions of $95^{\circ}C$ for 48 hours, $100^{\circ}C$ for 36 hours, $110^{\circ}C$ for 24 hours, $121^{\circ}C$ for 4 hours and $130^{\circ}C$ for 30 minutes. Heat-treatments at 40% relative humidity resulted in complete seed death at the conditions of $85^{\circ}C$ for 36 hours and $90^{\circ}C$ for 16 hours. The above results show that current heat-treatment criteria are not suitable for several quarantine weeds and these conditions could be applied as a quarantine method to prevent the influx of quarantine weeds along with agricultural imports. More specific conditions for heat tolerant species such as Picris echioides and heat susceptible species such as Cuscuta spp. are necessary and will improve plant quarantine process in devitalizing quarantine weed seeds with different heat tolerances.
This paper describes the epidemiological characteristics of bovine brucellosis in Korea during January 2000~September 2004, which encompasses the period when the incidence of bovine brucellosis increased abruptly. Data from the National Animal Infectious Disease Data Management System were used for this study. A range of epidemiological measures was calculated including annual herd and animal incidence. During the study period, there were 1,183 outbreaks on 638 farms. In beef cattle, annual herd incidence increased from 0.2 (2000) to 11.5 (2004, to September) outbreaks per 10,000 and annual animal incidence varied between 3.4 (2000) and 105.8 (2004, to September) per 100,000, respectively. On 401 (62.9%) infected farms during this period, infection was eradicated without recurrence. Recurrence of infection was significantly higher on farms where abortion was reported (53.3%), compared to farms where it was not (30.0%). On beef cattle farms, infection was introduced most frequently through purchased cattle (46.2%). Based on the results of this study, the establishment and spread of brucellosis in the Korean beef cattle population were mainly due to incomplete or inappropriate treatment of aborted materials and the movement of infected cattle.
Four viruses showing cytopathic effects in MDBK cells were isolated from brains of cattle showing downer cattle syndrome in 2012. The isolates were confirmed to belong to the genus Rubulavirus of the subfamily Paramyxovirinae. Isolate QIA-B1201 had the ability to hemagglutinate red blood cells from several species of animals and was capable of adsorbing guinea pig erythrocytes on the surface of infected Vero cells. Nucleotide sequence analysis showed that two isolates (QIA-B1201 and QIA-B1204) had high similarity with other human and animal PIV5 isolates ranging from 98.1 to 99.8%. The highest sequence similarity of the two isolates corresponded to strain KNU-11 (99.8% at the nucleotide and amino acid level) isolated from suckling piglets in Korea in 2012. To evaluate the virulence of strain QIA-B1201, we inoculated bPIV5 into 5 week-old mice via both the intraperitoneal and intracranial route. Body weight was not significantly altered in mice inoculated with QIA-B1201. In this study, we isolated and characterized novel bPIV5s from brain samples showing downer cattle syndrome, but were not able to elucidate the pathogenicity of the bPIV5s in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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