Park, Hong Je;Shin, Kee Sun;Lee, Dong Hun;Bae, Kyung Sook
Journal of Microbiology
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v.34
no.2
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pp.117-123
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1996
Restriction-polymorphic patterns of nuclear-ITS were examined for the genetic relationships among 12 bisidiomycetous mushrooms to Aphyllophorales and Agaricales. The taxonomic affinity of Ganoderma species with the family Polyporaceae also was examined. With 13 restriction endonucleases, 159 restriction characters were generated form the 12 species examined. UPGMA and neighbor-joining analyses separated the 12 species into two genetically distinct groups that correspond to orders (Agaricales and Aphyllophorales) where each species is included. This result indicates that there is clear genetic demarcation between Agaricales and Aphyllophorales. Dendrograms constructed by several data analyses showed that even though Ganoderma species are somewhat in intermediate taxonomic position between the Polyporaceae and families of the Agaricales, they are genetically more related to the Polyporaceae. These results are consistent with morphological characters observed in those mushrooms. However, it is premature to conclude taxonomic status Ganoderma species in the present study employing small sample size.
Multiple sequence alignment (MSA) is the most important step for many of biological sequence analyses, homology search, and protein structural assignments. However, large amount of data make biologists difficult to perform MSA analyses and it requires much computational time to align many sequences. Here, we have developed a simple and fast web alignment tool for aligning, editing, and visualizing large amount of sequence data. We used a cluster server installed ClustalW-MPI using web services and message passing interface (MPI). It also enables users to edit multiple sequence alignments for manual editing and to download the input data and results such as alignments and phylogenetic tree.
Until now, five species (Meghimatium bilineatum, M. fruhstorferi, Limax flavus, L. marginatus, Deroceras reticulatum) in three genera of families Philomycidae and Limacidae have been reported in Korea. Philomycidae is a family of air-breathing land snails. Meghimatium hongdoensis sp. nov. is described based on its middle size (60-80 mm in body length), its body coloration (dark-red yellow), no dorsal with streaks, its genitalia, and 16rDNA sequence analysis. Specimens of this new species were collected from Hongdo island, Sinan-gun, Jeollanam-do, Korea. This species is only known from the type locality at Hongdo to date. It could be found in high-humidity sites. Meghimatium uniforme (Laidlaw 1937) was the first one reported in Korea. It was also collected from Gageodo island, Sinan-gun, Jeollanam-do, Korea. In this study, morphological characteristics including their radula and genital structures of these two species were described. Preliminary results of mitochondrial 16S rDNA sequencing and phylogenetic analyses indicated that these species belonged to the Korean clade.
Six interesting fungal strains were isolated during a survey of fungal diversity associated with freshwater; these strains were designated as CNUFC YJW2-22, CNUFC MSW11-6-2, CNUFC HRS5-3, CNUFC MSW242-6, CNUFC DMW2-2, and CNUFC CPWS-1. Based on a polyphasic approach including phylogenetic analyses of internal transcribed space (ITS), large subunit (LSU), beta-tubulin (BenA), and calmodulin (CaM) gene sequences, morphological analyses, the six strains were found to be identical to Acremonium guillematii, Cadophora novi-eboraci, Lectera nordwiniana, Mycoarthris corallina, Talaromyces siamensis, and Tetracladium globosum, respectively. To our knowledge, these are the first records of the rare Lectera, Mycoarthris, and Tetracladium genera in Korea, and the first reports of A. guillematii, C. novi-eboraci, L. nordwiniana, M. corallina, T. siamensis, and Te. globosum in a freshwater environment.
Sordariomycetes is the second largest class of Ascomycota, distributed throughout various habitat including terrestrial and aquatic environments and also existing as endophytes. We isolated endophytic fungal strains in Korea, identifying them based on their morphological characteristics and molecular analyses, using eight specific DNA regions for accurate genus identification. We identified five previously unrecorded endophytic fungal species in Korea: Chaetomium subaffine, Colletotrichum jiangxiense, Colletotrichum sydowii, Diaporthe vacuae and Neurospora tetraspora. In this study, we describe the morphological characteristics and present our phylogenetic analyses of these five fungal species.
Park, So-Hyun;Kim, Ji-Young;Kim, Young-Ju;Heo, Moon-Soo
Korean Journal of Microbiology
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v.50
no.2
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pp.152-157
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2014
The aim of this study was to investigate the bacterial community inhabited in Callyspongia elegans. Marine bacteria were isolated from the marine sponge C. elegans using marine agar. The resulting 112 isolated pure cultures were then used for further study. They were characterized by determining morphological characteristics through Gram's staining and morphological observation. The colony pigments of bacterial isolates were characterized as yellow, brown, ivory, and white. Thirty-seven strains were found to be Gram-positive and 75 strains were Gram-negative. Seventy-nine strains were coccus-shaped, while 16 strains were rod-shaped. On the basis of the results of the comparative analyses of 16S rDNA gene sequences, the 112 isolated bacteria were divided into 5 major groups: Alphaproteobacteria (39%), Gammaproteobacteria (22%), Actinobacteria (14%), Fimicutes (9%), and Bacteroidetes (6%). It is strongly suggested that fifteen isolates are candidates for a new genera or species, based on the analyses of 16S rDNA gene sequences.
A virus causing stunt, yellowing, severe mosaic, malformation symptoms on leaves and uneven development and malformation on fruits of zucchini was prevalent around Goseong, Gyeongsangnam-do, Korea. A survey conducted (2004) in the Goseong area revealed about 20% virus infection rate. The disease causative identified as Cucumber mosaic virus (CMV-Z1) was further characterized. The isolate induces mosaic symptoms on Cucumis sativus, while severe mosaic, stunt and malformation on C. pepo. Thin section analyses have shown that virus inclusions are formed in the cuticle layers as well as epidermal, parenchyma and collenchymas cells in virus-infected Nicotiana tabacum. CMV-Z1 isolate induced specific cytoplasmic inclusion bodies such as irregular clumps (IC), crystal (Cr) and irregular chloroplasts (ICh). IC was made up of virus particles interspersed with a darkly stained amorphous material and found both in the cytoplasm and vacuoles, whereas ICh and Cr were rarely found in the vacuoles. The genome of CMV-Z1 RNA-1 consists of 3359 nucleotide (nt) encoding 1a protein of 993 amino acids (aa). The CMV-Z1 RNA-2 was 3050 nt in length containing 2a (857 aa) and 2b (110 aa), while RNA-3 encoding 3a movement protein (279 aa) and coat protein (218 aa) was 2215 nt in length. Phylogenetic analyses of nucleotide sequences of CMV-Z1 isolate appeared it is more closely related to subgroup IA than to subgroup IB or II.
Development of an effective vaccine is critically needed for the prevention of malaria. One of the key antigens for malaria vaccines is the apical membrane antigen 1 (AMA-1) of the human malaria parasite Plasmodium falciparum, the surface protein for erythrocyte invasion of the parasite. The gene encoding AMA-1 has been sequenced from populations of P. falciparum worldwide, but the haplotype diversity of the gene in P. falciparum populations in the Greater Mekong Subregion (GMS), including Thailand, remains to be characterized. In the present study, the AMA-1 gene was PCR amplified and sequenced from the genomic DNA of 65 P. falciparum isolates from 5 endemic areas in Thailand. The nearly full-length 1,848 nucleotide sequence of AMA-1 was subjected to molecular analyses, including nucleotide sequence diversity, haplotype diversity and deduced amino acid sequence diversity and neutrality tests. Phylogenetic analysis and pair-wise population differentiation ($F_{st}$ indices) were performed to infer the population structure. The analyses identified 60 single nucleotide polymorphic loci, predominately located in domain I of AMA-1. A total of 31 unique AMA-1 haplotypes were identified, which included 11 novel ones. The phylogenetic tree of the AMA-1 haplotypes revealed multiple clades of AMA-1, each of which contained parasites of multiple geographical origins, consistent with the $F_{st}$ indices indicating genetic homogeneity or gene flow among geographically distinct populations of P. falciparum in Thailand's borders with Myanmar, Laos and Cambodia. In summary, the study revealed novel haplotypes and population structure needed for the further advancement of AMA-1-based malaria vaccines in the GMS.
The nucleotide sequence for a nuclear-encoded small subunit rDNA (SSU rDNA) was determined for 43 species of the class Dinophyceae, including harmful algae Cochlodinium polykrikoides and Gyrodinium aureolum. These sequences and data analyses were performed by parsimony, distances and maximum likelihood methods in PHYLIP (Phylogenetic Inference Package) version 3.573c. The species Noctiluca scintillans, Gonyaulax spinifern and Crypthecodinium cohnii occupied a basal position within the Dino- phyceae in our analyses. The genera Alexandrium and Symbiodinium were monophyletic (supported by a bootstrap value of >70%), whereas the genera Gymnedinium and Gyrodinium formed polyphyletic nodes, for which bootstrap support was strong (>70%) in the neighbor-joining and maximum likelihood methods except for the PHYLIP parsimony analysis (=59%). The sequence divergence between G. aureolum and G. dorsum/ G. galathenum was the largest at 7.4% (45 bp), whereas G. aureolum and G. mikimotoi showed an extremely low value of genetic divergence of 0.9% (5 bp). The genetic divergence between C. polykrikoides and G. aureolum was a low value of 5.2% (31 bp). In the phylogenetic analysis, the placement of G. aureolum and C. polykrikoides was closer to the genus Gymnodinium than to the genus Gyrodinium, which was supported by a moderate bootstrap value.
Cryptomonads are unicellular, biflagellate algae. Generally, cryptomonad cells cannot be preserved well because of their fragile nature, and an improved methodology should be developed to identify cryptomonads from natural habitats. In this study, we tried using several cytological fixatives, including glutaraldehyde, formaldehyde, and their combinations to preserve field samples collected from various waters, and the currently used fixative, Lugol's solution was tested for comparison. Results showed that among the fixatives tested, glutaraldehyde preserved the samples best, and the optimal concentration of glutaraldehyde was 2%. The cell morphology was well preserved by glutaraldehyde. Cells kept their original color, volume, and shape, and important taxonomic features such as furrow/gullet complex, ejectosomes, as well as flagella could be observed clearly, whereas these organelles frequently disappeared in Lugol's solution preserved samples. The osmotic adjustments and buffers tested could not preserve cell density significantly higher. Statistical calculation showed the cell density in the samples preserved by 2% glutaraldehyde remained stable after 43 days of the fixation procedure. In addition, DNA was extracted from glutaraldehyde preserved samples by grinding with liquid nitrogen and the 18S rDNA sequence was amplified by PCR. The sequence was virtually identical to the reference sequence, and phylogenetic analyses showed very close relationship between it and sequences from the same organism. To sum up, the present study demonstrated that 2% unbuffered glutaraldehyde, without osmotic adjustments, can preserve cryptomonads cells for identification, in terms of both light microscopy and phylogenetic analyses based on DNA sequences.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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