Kim, Jong Youn;Kim, Dong Hwi;Kim, Young Chang;Kim, Kee Hong;Han, Jung Yeon;Choi, Yong Eui
Journal of Ginseng Research
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v.40
no.4
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pp.409-414
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2016
Background: The low survival rate of in vitro regenerated Panax ginseng plantlets after transfer to soil is the main obstacle for their successful micropropagation and molecular breeding. In most cases, young plantlets converted from somatic embryos are transferred to soil. Methods: In vitro thickened taproots, which were produced after prolonged culture of ginseng plantlets, were transferred to soil. Results: Taproot thickening of plantlets occurred near hypocotyl and primary roots. Elevated concentration of sucrose in the medium stimulated the root thickening of plantlets. Senescence of shoots occurred following the prolonged culture of plantlets. Once the leaves of plantlets senesced, the buds on taproots developed a dormant tendency. Gibberellic acid treatment was required for dormancy breaking of the buds. Analysis of endogenous abscisic acid revealed that the content of abscisic acid in taproots with senescent shoots was comparatively higher than that of taproots with green shoots. Thickened taproots were transferred to soil, followed by exposure to gibberellic acid or a cold temperature of $2^{\circ}C$ for 4 mo. Cold treatment of roots at $2^{\circ}C$ for 4 mo resulted in bud sprouting in 84% of roots. Spraying of 100 mg/L gibberellic acid also induced the bud sprouting in 81% roots. Conclusion: Soil transfer of dormant taproots of P. ginseng has advantages since they do not require an acclimatization procedure, humidity control of plants, and photoautotrophic growth, and a high soil survival rate was attained.
This study was conducted to determine the response of newly developed chlorophyllous cells against photosynthesis inhibitory herbicides in LS medium. Inhibition of the growth of the selected chlorophyllous cells in the LS medium containing sucrose 1%, NAA $10^{-5}$ M and BA $10^{-6}$ M under light condition increased as the concentrations of paraquat increased from $10^{-6}$ M to $10^{-4}$ M. The calli died in $10^{-4}$ M paraquat treatment and the inhibition of calli growth was greater when $CO_2$ was supplied. In the treatment of herbicide diuron, the inhibition of calli growth also increased as the concentrations of diuron increased from $10^{-6}$ M to $10^{-3}$ M and more inhibition was observed at 1% sucrose than 2% sucrose.
Chromatium sp., densely populated on the bacterial plate of Lake Kaiike throughout the seasons, possibly fix N2 and concurrently produce H2 N2 Fixation and H2 production by Chromatium sp. were performed under photoautotrophic growth condition, and of which rates were much higher and showed expontial growth phase. Bacterial plater samples from Lake Kaiike collected on July 27, 1994 were used to know the effect of the light or H2S on N2 fixation and H2 productin by the bacteria. At low light intensity (250 lux), low rates of N2 fixation and H2 production were detected after 18 hours. However, high rates of the production were observed under the condition of high light intensity (1000 lux). On the other hand, a very low rate of N2 fixation was observed without an addition of H2S, while the bacterial rapilly increased N2 fixation and H2 production after adding H2S and the highest rate was observed in case of adding 20mg H2S-S/$m\ell$ to the bacterial plates.
A new hydrogen-oxidizing bacterium, Aeromonas sp. strain JS-1, that can fix $CO_2$ via the reductive pentose phosphate cycle (Calvin-Benson cycle) under chemoautotrophic conditions but not photoautotrophic conditions was isolated from fresh water. Strain JS-1 showed considerable $CO_2$ fixation ability during continuous cultivation even at high $CO_2$ concentration. Strain JS-1 used $H_2$ and $CO_2$ fixation as energy and carbon sources, respectively. Carbon dioxide fixation is carried out through the Calvin-Benson cycle, in which ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RubisCO) is the key enzyme. Hydrogen-oxidizing chemoautotrophic Aeromonas sp. strain JS-1 exhibited remarkedly strong RubisCO [EC 4.1.1.39] activity. RubisCO was purified as an $L_8S_8$-type hexadecamer with molecular mass of 560 kDa by gel filtration. The enzyme consisted of two different subunits eight large (56 kDa) and eight small (15 kDa), as demonstrated by SDS-PAGE. The specific activity of the purified enzyme was about 3.31 unit/mg and stable up to $45^{\circ}C$. The $K_m$ values for RuBP, $CO_2$, and $Mg^{2+}$ were estimated to be 0.25 mM, 5.2 mM and 0.91 mM, respectively.
In this study, a novel microalgal strain, Desmodesmus sp. KAERI-NJ5, was isolated, identified, and evaluated as a candidate for biodiesel feedstock. In a preliminary study, the effects of four general microalgal growth factors, including temperature, pH, light intensity, and concentration of nitrogen source ($KNO_3$), on the microalgal photoautotrophic growth were evaluated. With the exception of light intensity, the growth factors needed to be optimized for the microalgal biomass production. Optimization was done using response surface methodology. The optimal conditions for biomass production were pH 6.54, $27.66^{\circ}C$, and 0.52 g/l $KNO_3$. The biomass production at the optimal conditions was 1.55 g/l, which correlated well with the predicted value of 1.5 g/l. The total lipid and fatty acid methyl ester contents of the cells grown at the optimal conditions were 49% and 21.2% of cell dry weight, respectively. To increase the lipid content of the biomass, microalgae were challenged by nitrogen starvation. Enhancement of total lipid and fatty acid content up to 52.02% and 49%, respectively, were observed. Lipid analysis of the nitrogen-starved cells revealed that C16 and C18 species accounted for 95.9% of the total fatty acids. Among them, palmitic acid (46.17%) and oleic acid (39.43%) dominantly constituted the algal fatty acids. These results suggest Desmodesmus sp. KAERI-NJ5 as a promising feedstock for biodiesel production.
Porins are essential for the viability of Gram-negative bacteria. They ensure the uptake of nutrients, can be involved in the maintenance of outer membrane integrity and define the antibiotic or drug resistance of organisms. The function and structure of porins in proteobacteria is well described, while their function in photoautotrophic cyanobacteria has not been systematically explored. We compared the domain architecture of nine putative porins in the filamentous cyanobacterium Anabaena sp. PCC 7120 and analyzed the seven candidates with predicted OprB-domain. Single recombinant mutants of the seven genes were created and their growth capacity under different conditions was analyzed. Most of the putative porins seem to be involved in the transport of salt and copper, as respective mutants were resistant to elevated concentrations of these substances. In turn, only the mutant of alr2231 was less sensitive to elevated zinc concentrations, while mutants of alr0834, alr4741 and all4499 were resistant to high manganese concentrations. Notably the mutant of alr4550 shows a high sensitivity against harmful compounds, which is indicative for a function related to the maintenance of outer membrane integrity. Moreover, the mutant of all5191 exhibited a phenotype which suggests either a higher nitrate demand or an inefficient nitrogen fixation. The dependency of porin membrane insertion on Omp85 proteins was tested exemplarily for Alr4550, and an enhanced aggregation of Alr4550 was observed in two omp85 mutants. The comparative analysis of porin mutants suggests that the proteins in parts perform distinct functions related to envelope integrity and solute uptake.
Scenedesmus obliquus ABC-009 is a microalgal strain that accumulates large amounts of lutein, particularly when subjected to growth-limiting conditions. Here, the performance of this strain was evaluated for the simultaneous production of lutein and biofuels under three different modes of cultivation - photoautotrophic mode using BG-11 medium with air or 2% CO2 and heterotrophic mode using YM medium. While it was found that the highest fatty acid methyl ester (FAME) level and lutein content per biomass (%) were achieved in BG-11 medium with CO2 and air, respectively, heterotrophic cultivation resulted in much higher biomass productivity. While the cell concentrations of the cultures grown under BG-11 and CO2 were largely similar to those grown in YM medium, the disparity in the biomass yield was largely attributed to the larger cell volume in heterotrophically cultivated cells. Post-cultivation light treatment was found to further enhance the biomass productivity in all three cases and lutein content in heterotrophic conditions. Consequently, the maximum biomass (757.14 ± 20.20 mg/l/d), FAME (92.78 ± 0.08 mg/l/d), and lutein (1.006 ± 0.23 mg/l/d) productivities were obtained under heterotrophic cultivation. Next, large-scale lutein production using microalgae was demonstrated using a 1-ton open raceway pond cultivation system and a low-cost fertilizer (Eco-Sol). The overall biomass yields were similar in both media, while slightly higher lutein content was obtained using the fertilizer owing to the higher nitrogen content.
Adequate environment conditions with growth stage of potato were decided in a photoautotrophic micropropagation system using models. Total 20 day-period of growth were divided into three growth periods such as 6 (stage 1), 7(stage 2), and 7(stage 3) days. At the 1st stage, no significant differences were observed in the growth of potato plantlets at various photosynthetic photon flux density (PPFD) and $CO_2$ conditions. Considering damaged leaves, $80\;mmol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ PPFD and ambient $CO_2$ level were adequate in this stage. At the 2nd stage, significant differences were partly observed in several growth characteristics including dry weight. Based on the dry matter model, over $240\;mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ PPFD was too high to cultivate potato plantlets at this stage due to the occurrence of damaged leaves. Considering both plant growth and energy efficiency, $160\;mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ PPFD and $700\;mol{\cdot}mol^{-1}\;CO_2$ were selected for the adequate combination. At the 3rd stage, the biomass accumulation was significantly induced in potato plantlets under higher levels of PPFD and $CO_2$ concentration as suggested by increased fresh and dry weights. However, we could not find the saturated point with regard to dry matter due to continuous increase of dry mater even under maximum PPFD ($320\;mmol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1})$. Thus, $320\;mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ PPFD and $1800\;mol{\cdot}mol^{-1}\;CO_2$ were considered as the best choice at final stage in this study. In conclusion, even though the growth period of micropropagated potato plantlets was quite a short, favorable environmental conditions required at each growth stage were different. This technique could improve the growth of micropropagated plantlets compared to the conventional micropropagation and apply to other agriculturally important crops as well as potato in the future.
The repeated subcultures of in vitro plant materials in wasabi became highly vitrified and the capacity for multiple shoot formation from the vitrified plant materials was very low. In order to improve the quality of in vitro propagated planting materials, the experiments were carried out using culture vessels capped with membrane filter(MF). When vitrified shoots were cultured on MS medium with 0.2mg/L BA in the vessels with MF or without MF for 60 days, the shoots in the vessels with MF did not vitrified. In contrast, the shoots grown in the vessels without MF vitrified at 65%. The stomates of vitrified leaves were circular and inflated, whereas those of normal leaves acclimatizated in the vessels with MF were ovate in shape. The hardened shoots were also cultured on MS media without sucrose containing 0.01mg/L IBA in vessels with(photoautotrophic culture) or without(control) MF. Sucrose was necessary for survival of the in vitro plantlets in the vessels without MF. After 20 days of culture, the shoots in the vessels without MF on the sucrose-free media turned yellow and died. But the shoots in the vessels with MF in the sucrose-free media produced a lot of roots. When shoots were cultured on MS medium with 2% sucrose containing 0.01mg/L IBA in the vessels with(photomixotrophic culture) or without(heterotrophic culture) MF, best growth occured in photomixotrophic culture.
Anabaena variabilis A TCC 29413. a photoautotrophic and nitrogen fixing cyanobacteria. was investigated on the environmental factors regulating the growth and nitrogen lixation activity. A good growth of cyanobacteria] cells was observed due to nitrogen t1xation by the heterocyst differentiation in nitrogen free Allen and Arnon (]/8) medium. The nitrogenase activity was appeared to be in proportion to the cell growth lor 6 days then drastically decreased in the later growth period when the nitraTe was accumulated to high level in the culture to cause the inhibition. The optima] conditions lilr the cell growth and nitrogenase activity of A. varillbili.l were anaerobic. IO.OO0 lux. $30^{\circ}C$ and pH 8 with the nitrogen Cree minimal medium. The activity was significantly inhihited by the low concentrations of ammonium and nitrate. but was stimulated b) the ]ow Ieve] of phosphate and carbonate sources. The treatments of several toxic heavy metals showed strong inhibition of the cell growth and nitrogenase activity by O.3~10 ppm in the order of $Hg^{2+}$ > $Cd^{2+}$ > $Co^{2+}$ > $Zn^{2+}$ > $Ph^{2+}$, and the concentrations for 50% inhibition of the maximum activity were 0.41. 0.47. 0.5 L 0.66 and 8.1 ppm. respectively. The addition of carbohydrates (0.5~ 1.0%) in the dark condition stimulated the growth and activity in the order of sucrose > fructose > glucose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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