The p73 gene contains an extrinsic P1 promoter and an intrinsic P2 promoter, controlling the transcription of the pro-apoptotic TAp73 isoform and the anti-apoptotic ${\Delta}Np73$ isoform, respectively. The DNA methylation status of both promoters act equally in the epigenetic transcriptional regulation of their relevant isoforms. The aim of this study was to analyze the different effects of these p73 isoforms in 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC)-induced apoptosis in breast cancer cells. We investigated the effects of the DNA demethylation agent, 5-aza-dC, on the T-47D breast cancer cell line, and evaluated the methylation status of the p73 promoters and expression of TAp73 and ${\Delta}Np73$. Furthermore, we assessed the expression of p53 and p73 isoforms in 5-aza-dC-treated T-47D cells and p53 knockout cells. 5-aza-dC induced significant anti-tumor effects in T-47D cells, including inhibition of cell viability, G1 phase arrest and apoptosis. This was associated with p73 promoter demethylation and a concomitant increase in TAp73 mRNA and protein expression. In contrast, the methylation status of promoter P2 was not associated with ${\Delta}Np73$ mRNA or protein levels. Furthermore, demethylation of P2 failed to inhibit the expression of ${\Delta}Np73$ with 5-aza-dC in the p53 knockdown cell model. Our study suggests that demethylation of the P1 and P2 promoters has opposite effects on the expression of p73 isoforms, namely up-regulation of TAp73 and down-regulation of ${\Delta}Np73$. We also demonstrate that p53 likely contributes to 5-aza-dC-induced ${\Delta}Np73$ transcriptional inactivation in breast cancer cells.
To determine the test conditions to enhance the use of hamster test in dogs, semen were collected from four dogs which had been proven to be fertile in the past and then preserved in BWW (Biggers, Whitten, Whittingham) medium for about 20 hours. The semen were given each different treatment according to the experimental design and coincubated with zona-free hamster ova for 5 hours. The ova were stained by lacmoid and examined under phase contrast microscope to investigate the rates of ova bound with sperm(sperm binding) and ova penetrated by sperm (penetration), and also numbers of both bound and penetrated sperm per ovum. In comparison of different concentrations of canine sperm, the rate of sperm binding was higher in $1.5{\times}10^8$, $1{\times}10^8$, and $5{\times}10^7$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$ concentration(p<0.01), and also than $5{\times}10^6$ concentration(p<0.05), respectively. The number of bound sperm per ovum was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ sperm concentration than $5{\times}10^7$, $1.5{\times}10^6$, and $5{\times}10^5$ concentrations(p<0.01). The rate of penetration was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ and $1{\times}10^8$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$ concentration,(p<0.01), and also the higher result of penetration was shown in $5{\times}10^7$ than $5{\times}10^5$ (p<0.05). The number of penetrated sperm per ovum was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$(p<0.01), and also the higher number was shown in $1{\times}10^8$ than $5{\times}10^5$ (p<0.05). In comparison of the different preincubation period of canine spermatozoa, no difference was obtained in the results of hamster test among the preincubation periods of 4 hours, 18~24 hours and 48 hours. The canine spermatozoa in BWW medium with $Ca^{2+}$(1.3mM) and without FCS(fetal calf serum), with both $Ca^{2+}$(1.3mM) and FCS, with $Ca^{2+}$(2.6mM) and without FCS, and with both $Ca^{2+}$(2.6mM) and FCS showed no difference in the results of hamster test.These results indicated that the appropriate concentration of sperm should be given in hamster test for dog sperm.
The setting of dental hygiene clinics is very important to dental hygiene education, which is the place not only to educate students but also to care clients. The purpose of this study is to provide basic research material for improvement of dental hygiene care system in dental hygiene clinics by analyzing the client satisfaction. A questionnaire survey by means of self-entry method was conducted to find out satisfaction of the client, who was visited to the dental hygiene clinics in the department of dental hygiene, Yonsei University. An analysis of frequency, one way ANOVA and T-Test were performed through SPSS 12.0K program. 1. Most clients were mainly composed of students in Wonju College of Medicine. 2. The clients visited for scaling(85.8%) and oral examination(9.73%) were much than treatment(4.42%). 3. Clients aged 21 to 25 were relatively lower in satisfaction with the facilities, system, attitude than any other ages. 4. The dental hygiene students are the lowest group in satisfaction with the facility, system, attitude than medical and nursing students. 5. The clients satisfaction with dental hygiene clinics was decreased in reverse proportion to visiting frequency. 6. Most of the clients pointed out the problems of appointment system(54.0%) and fee(23.0%), which should be improved than any other operation conditions. 7. Most of the clients were not satisfied with chair time and pain during care. 8. Most clients recognized to receive the better care service than other dental offices(81.3%). Especially, they paid attention to oral health education using phase-contrast microscope. 9. Many clients were dissatisfied with facilities of the dental hygiene clinics(71.7%). The problems of appointment system(54.0%) and chair time of dental hygiene care services(63.6%) had also inconvenienced to clients. The dental hygiene clinics in school play a crucial role in dental hygiene education to foster the student to be competent as a professional dental hygienist in the future. Therefore, well-organized dental hygiene care program based on dental hygiene process is essential. It is also required to improve the environment of dental hygiene clinics including facilities, appointment system and fee etc.
노니($Morinda$$citrifolia$) 부정근의 주요 성분인 rubiadin은 간 보호 효과가 있어 제약산업에서 높은 가치가 있다. 노니 부정근의 주요 유효성분인 rubiadin의 효율적인 추출조건을 규명하고자 용매 종류, 물과 메탄올의 비율(물, 20%, 40%, 60%, 80%, 100%), 추출시간 및 추출방법을 달리하여 추출하였다. 노니 부정근에서의 rubiadin의 함량분석은 HPLC 이용 분석조건을 확립하였으며, C-18 컬럼을 사용하여 280nm에서 메탄올과 물로 농도구배를 주어 분석하였다. 용매별 추출효율은 메탄올(0.08%) > 에탄올(0.05%) > 아세토니트릴(0.03%) > 아세톤(0.02%) 및 메틸렌클로라이드(0.02%) 순으로 증가하였다. 메탄올에 물의 혼합 비율을 달리하여 초음파 추출기로 1시간 동안 추출한 결과 60% 메탄올(0.21%) > 80% 메탄올(0.13%) > 100% 메탄올(0.07%) 및 40% 메탄올(0.07%) 순으로 효과적이었으며, 환류냉각 추출기로 2시간 동안 추출한 결과 60% 메탄올(0.21%) > 40% 메탄올(0.17%) > 80% 메탄올(0.14%) 용매처리구 순으로 효율이 좋았다. 추출방법 및 추출시간에 따른 rubiadin의 추출 효율을 비교하기 위해 환류냉각추출 및 초음파추출, 진탕추출법으로 추출하였다. 추출방법 및 추출시간에 따른 rubiadin의 추출효율은 초음파추출 및 진탕추출에서 각각 8 및 24시간 동안 추출했을 때 효율적이었다.
전체 성인의 약 4%에서 정도 차이는 있지만 혈뇨가 있다고 볼 때 그 원인을 구명하는 일이 중요하다. 그 원인이 사구체성 신염인지 기타 그 외의 비 사구체성 원인에 따른 질환인지를 쉽게 감별하는 일이 중요하다. 본 연구자들은 혈뇨를 동반한 소아과 환자중에서 신 생검 조직검사까지 한 5명의 환자에서 혈뇨를 표본 제작하여 먼저 위상차현미경적 표본제작법을 통하여 적혈구를 감별하였고 방법을 달리하여 주사형 전자현미경으로 요침사를 관찰하여 형태학적 고찰을 통하여 이형적혈구를 보다 명확한 3차원구조를 관찰할 수 있었다 침생검을 통해 얻은 조직학적 소견으로는 사구체의 기저막을 통과한 혈구들의 요로를 통하여 배출과정을 광학현미경 및 투과형 전자현미경으로 확인할 수 있었다. 본 연구에서 육안적 혈뇨의 색은 유출되는 적혈구의 양과 상관관계가 있으며 용혈된 정도가 심한 경우에 콜라색 혈뇨가 있음을 알 수 있었다. 이들 결과에서 본 연구자들은 사구체성 질환을 동반한 유극적혈구 및 환형 적혈구 등과 같은 변형된 적혈구를 주사형 전자현미경으로 명확한 관찰을 함으로 사구체성 질환으로 인한 혈뇨의 감별에 주사형 전자현미경이 가장 유용한 검사 방법이라고 생각된다.
자외선 경화 반응에 의해 만들어지는 고분자/액정 복합막에서 자외선 광 개시제의 농도, 복합막의 두께 및 중합에 의한 상분리 시의 온도, 전기장의 영향 등 제조 외부 조건에 따른 복합막의 전기 광학적 특성의 변화에 대하여 조사를 하였다. 광개시제나 다관능성 단량체의 농도증가에 따라 고분자 매트릭스의 가교밀도가 증가하고 상대적으로 더 작은 액정상이 형성되며 그에 따라 액정과 고분자의 계면 면적이 넓어져 복합막의 구동전압이 증가하는 것이 관찰되었다. 분자량이 서로 다른 두 종류의 diacrylate 형의 올리고머를 사용하여 만든 복합막에 있어서는 분자량이 큰 PTDA-1000을 사용한 경우 복합막의 초기 투명도는 더 올라가지만 일정한 구동전압 이상에서 투명도의 포화 상태가 일어나는 데 반하여 분자량이 적은 PTDA-250을 사용한 경우에는 필름의 초기 투명도가 훨씬 더 낮아지는 대신 60 V 이상의 전압에서도 투명도의 포화 상태가 일어나지 않는 것이 관찰되었다. 중합에 의한 상분리시 온도가 높아질수록 복합막의 초기 투명도는 높아지는 것이 관찰되었으며 이것은 액정/UV 경화 혼합물의 온도가 높아짐에 따라 점도가 낮아지고 용해도는 증가하여서 상대적으로 큰 액정상들이 복합막 내에 생기기 때문인 것으로 생각되었다. 한편 복합막의 두께가 얇을수록 구동전압은 비례적으로 낮아졌으며 중합에 의한 상분리 시에 인가되는 외부전기장의 효과는 전장이 초기 투과도 뿐 아니라 구동전압이나 응답시간에도 영향을 미치는 것이 관찰되었다.
돼지감자의 품종별 유기산, 유리당 함량 및 휘발성 향기성분을 측정한 결과는 다음과 같다. 돼지감자에 함유된 유기산은 citric acid, malic acid, succinic acid였으며, malic acid의 함량이 가장 높았고 다음으로 citric acid로 나타났다. 총유기산 함량은 흰색이 2,065 mg/100 g, 자색은 2,482 mg/100 g으로 자색 돼지감자의 함량이 유의적으로(P<0.05) 높았다. 유리당은 sucrose, fructose, glucose로 나타났으며, sucrose의 함량이 가장 높았고 총유리당 함량은 흰색이 24.95 g/100 g, 자색이 11.57 g/100 g으로 나타나 흰색 돼지감자의 총유리당 함량이 유의적으로(P<0.05) 높게 나타났다. 휘발성 향기성분에서 돼지감자는 품종별, 처리방법과는 관계없이 acid류 5종, alcohol류 13종, aldehyde류 19종, hydrocarbon류 12종, ketone류 15종, 기타 8종, pyrazine류는 27종, terpene류는 18종이었으며, 총 117개의 휘발성 성분이 확인되었다. 돼지감자에는 terpene류가 가장 많았으며, terpene류 중에서는 ${\beta}$-bisabolene이 주된 성분이었다. 두 번째로 많은 화합물은 aldehyde류였으며, hexanal이 가장 높게 나타났다. 처리방법에 따른 차이로 볶은 시료에서는 pyrazine류가 대부분을 차지하였으며, 2,5-dimethyl-3-ethylpyrazine이 가장 높았고 다음으로 2,5-dimethylpyrazine으로 나타났다. 자색시료보다 흰색시료에 함량이 높은 화합물은 aldehyde류, hydrocarbone류였으며, 흰색시료보다 자색시료에 많은 화합물은 terpene류와 alcohol류로 나타났다.
P. gingivalis를 단독면역하거나 또는 Fusobacterium nucleatum 선면역 후 P. gingivalis 항혈청을 각각 얻어냈다. 두 종류의 항혈청이 P. gingivalis biofilm을 침투해 들어가는 능력을 confocal laser scanning microscope를 이용하여 비교 감증하였다. 항혈청의 P. gingivalis에 대한 avidity index도 측정하였다. 결과적으로 F. nucleatum의 선면역은 P. gingivalis 특이 항혈청에 대해 세균성 biofilm의 침투능력을 저하시키고, 동일한 세균에 대한 avidity도 감소시켰다.
병원성 자유생활 아메바인 Naegleria fowleri를 CGVS 배지에서 무균적으로 배양하여 그 영향형을 복강내로 주입하여 인위적으로 면역시킨 마우스에 본 원충율 비강내로 감염시켰을때 방어면역이 생성되는지를 관찰하였다. 감염 8일후부터 마우스가 사망하기 시작하였고 이 마우스의 뇌에서 전형적인 원발성 아메바성 뇌수막염이 발생했음을 관찰할 수 있었다. N. fowleri 감염으로 인한 마우스의 사망율은 대조군에서 보다 네가지 항원으로 면역시킨 실험군에서 모두 현저히 낮았으며, 감염에서 사망할 때까지의 생존기간도 면역시킨 실험군에서 대조군보다 연장되었으나, N. fowleri 세포막항원으로 면역시킨 실험군에서는 대조군과 비교할때 차이가 없었다. 또한 N. gruberi 영양형으로 면역시킨 실험군에서도 생존기간이 연장되었다. 이상의 성적을 요약하면 N. fowleri를 마우스 복강내로 주입시켜 면역시킬 때 방어면역이 생성됨을 알 수 있었다.
다중모드간섭 기반의 $1.31/1.55{\mu}m$ 파장분리기의 크기 및 성능개선을 위해 'Improved Quasi-State' 불완전 단일상 개념을 설계에 도입하였다. 코어와 클래딩의 굴절률 차이가 작은 경우의 모드간 위상오차를 역이용 하도록 설계하여 'Quasi-State'의 출력 파워와 소멸비를 월등히 개선하였다. 다중모드간섭기의 폭이 $14.4{\mu}m$, 입력도파로의 수평 이동이 $5.3{\mu}m$가 되도록 설계한 구조를 유효굴절률법과 MPA를 사용하여 분석한 결과 최대 소멸비는 양 파장대역 모두 -25dB 이하로 나타났다. 설계된 파장분리기는 일반적인 다중 모드간섭기의 길이의 1/5정도에 불과한 $2620{\mu}m$의 간섭길이를 가진다. 소프트 리소그래피 공정을 통해 설계된 파장분리기를 제작하였으며, $1.31{\mu}m$와 $1.5{\mu}m$의 성공적인 파장분리를 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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