지방산 식이가 항체 생성력에 미치는 영향을 알아보기 위하여 ICR계 마우스를 기본사료만 투여한 대조군, 돈유 투여군, 그리고 정어리유 투여군으로 나눈 다음, 추출한 지방산을 8주동안 경구 투여한 후, 마우스 간조직 중의 지방산 조성 변화, Salmonella typhi에 대한 항체 역가, 복강내 대식세포의 탐식능 및 비장세포의 증식능을 비교 관찰한 결과는 다음과 같다. 대조군에 비하여 돈유 투여군에서는 $C_{18:3}$, $C_{20:3}$, $C_{20:4}$ 등의 지방산이 감소하였고, 정어리 투여군에서는 $C_{18:1}$, $C_{18:2}$, $C_{18:0}$를 제외한 주요 불포화 지방산 성분이 감소되었다. 대식세포의 탐식능에서는 대조군에 비하여 실험군의 대식세포 탐식능이 저하되었고, 마우스 생체 항체 생성력은 돈유 투여군이 대조군 및 정어리유 투여군보다 높은 역가를 나타내었으며, 마우스 비장세포 배양 상층액 중의 항체 역가는 마우스 생체 역가와는 다르게 정어리유 투여군이 더 높은 역가는 나타내었다. 또한 비장세포 증식능은 증시능을 나타내었다. 이러한 차이는 포화, 불포화 지방산 균형 증가에 의하여 면역 억제력이 높아진 결과로 생각되며, 포화 지방산의 투여는 항체 생성력을 현저하게 증가시킬 수는 있으나 면역 억제력은 타나내지 못함을 알 수 있었다.
한국 곰소만산 암컷 바지락(Ruditapes philippinarum)의 난모세포의 발달 및 퇴화과정 중 일어나는 미세구조적 변화에 관해 기술하였다. 난소소낭은 영양성분을 저장하는 포상결체조직세포(VCT cell)들의 기질에 의해 둘러싸여 있다. 난 형성과정 초기에 초기난황형성난모세포와 보조세포(follicle cell)들 사이에 desmosome-like gap junction들이 나타났다. 난황형성과정은 골지체, 미토톤드리아, 조면소포체가 결합되어 작용하는 자율합성과정을 통하여 일어나며, 난황막 형성에 앞서 난황형성과정의 초기와 난모세포 퇴화에 없어서는 안될 역할을 하는 것으로 나타났다: 보조세포들은 식세포작용 및 난모세포 퇴화로부터 유래되는 산물들의 세포내소화에 관여한다. 이들의 기능은 난황형성에 필요한 난황전구체들로 전환이 일어나게 한다. 또한, 보조세포들은 난황형성난모세포들이 이용하는 글리코겐과 지방적들을 세포질 내에 영양물질로 축적, 저장할 수 있다. 보조세포들은 난모세포가 퇴화되는 기간 중에는 난모세포의 붕괴를 위해 리소조옴 체제를 가지며, 영양물질 저장을 위해 세포질 내에 존재하는 여러 종류의 파고소옴(phagosome)들을 흡수하였다. 그러나 보조세포들은 난황형성과정에서 난황형성을 위한 난황전구체의 주된 공급원이 아니라고 추정된다.
캡사이신 채널로 알려진 바닐로이드 수용체 TRPV1 (캡사이신채널, Transient Receptor Potential Vanilloid 1)은 통증발현에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 하지만 TRPV1의 활성조절에 관여하는 단백질에 대하여는 알려진 바가 많지 않다. 최근 rat TRPV1과 직접적으로 결합하는 단백질을 탐색하여 mouse Rab11-FIP3 (rab11-family interaction protein 3)가 rat TRPV1과 직접적으로 결합한다는 것이 보고되었다. Rab11은 여러 가지의 세포내 이동에 관여하는 것으로 보고되었다. 그러므로 Rab11-FIP3과의 결합을 통해 TRPV1의 세포막으로의 이동에 관여할 것으로 추측할 수 있다. 본 연구에서는 전에 보고된 연구가 mouse와 rat 이라는 다른 종의 단백질끼리의 결합이기 때문에 같은 종에서의 상호작용을 확인하고 Rab11-FIP3의 TRPV1의 세포막으로의 이동에서의 역할을 알아보고자 현재까지 동정되지 않은 rat의 Rab11-FIP3의 유전자를 GenBank 서열을 바탕으로 rat 뇌의 RNA 로부터 cDNA 를 클로닝하여 유전자를 분리하고 TRPV1 과의 관계를 세포생물학적으로 알아보았다. 연구결과 rat의 Rab11-FIP3는 489개의 아미노산 서열을 가지고 있으며 human과는 80%, mouse와는 90% 이상 아미노산 서열의 상동성을 보였다. 조직별 분포는 심장, 뇌, 간, 콩팥, 정소에서 발현되고 있는 것을 northern blot assay와 western blot assay 로 확인하였다. rat 의 뇌조직에서 TRPV1 과 Rab11-FIP3 단백질이 결합하여 colocalize 하는 것을 면역화학방법으로 확인하였다. 이 결합은 같은 family 의 TRPV2 와는 결합하지 않는 특이적 결합이므로 Rab11-FIP3 가 TRPV1 과 상호작용하여 세포막으로의 이동에 관여할 것이라는 것을 시사한다.
The ultrastructures of germ cells and the accessory cells during spermatogenesis and mature sperm ultrastructure in male Gomphina veneriformis, which was collected on the coastal waters of Yangyang, East Sea of Korea, were investigated by transmission electron microscope observations. The morphology of the spermatozoon has a primitive type and is similar to those of other bivalves in that it contains a short midpiece with four mitochondria surrounding the centrioles. Accessory cells are observed to be connected to adjacent germ cells, they contain a large quantity of glycogen particles and lipid droplets in the cytoplasm. Therefore, it is assumed that they are involved in the supplying of the nutrients for germ cell development, while any phenomena associated with phagocytosis of undischarged, residual sperms by lysosomes in the cytoplasm of the accessory cells after spawning was not observed in this study. The morphologies of the sperm nucleus type and the acrosome shape of this species have a cylindrical and modified long cone shape, respectively. In particular, the axial filaments in the lumen of the acrosome, and subacrosomal granular materials are observed in the subacrosomal space between the anterior nuclear fossa and the beginning part of axial filaments in the acrosome. The spermatozoon is approximately $50-55{\mu}m$ in length including a long sperm nucleus (about $7.80{\mu}m$ in length), an acrosome (about $1.13{\mu}m$ in length) and tail flagellum ($40-45{\mu}m$). The axoneme of the sperm tail flagellum consists of nine pairs of microtubules at the periphery and a pair at the center. The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. Some charateristics of sperm morphology of this species in the family Veneridae are (1) acrosomal morphology, (2) the number of mitochondria in the midpiece of the sperm,. The axial filament appears in the acrosome as one of characteristics seen in several species of the family Veneridae in the subclass heterodonta, unlikely the subclass pteriomorphia containing axial rod instead of the axial filament. As some characteristics of the acrosome structures, the peripheral parts of two basal rings show electron opaque part (region), while the apex part of the acrosome shows electron lucent part (region). These charateristics belong to the family Veneridae in the subclass heterodonta, unlikely a characteristic of the subclass pteriomorphia showing all part of the acrosome being composed of electron opaque part (region). Therefore, it is easy to distinguish the families or the subclasses by the acrosome structures. The number of mitochondria in the midpiece of the sperm of this species are four, as one of common characteristics appeared in most species in the family Veneridae.
Background: Immunization of dendritic cells (DCs) pulsed with tumor antigen can activate tumor-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) that are responsible for protection and regression. In this study, we examined whether the uptake of necrotic tumor cells could modulate DC phenotypes and whether the immunization of necrotic tumor cell-loaded DCs could elicit efficient tumor specific immune responses followed by a regression of established tumor burdens. Methods: We prepared necrotic tumor cell-pulsed DCs for the therapeutic vaccination and investigated their phenotypic characteristics, the immune responses induced by these DCs, and therapeutic vaccine efficacy against colon carcinoma in vivo. Several parameters including phagocytosis of tumor cells, surface antigen expression, chemokine receptor expression, IL-12 production, and NK as well as CTL activation were assessed to characterize the immune response. Results: DCs derived from mouse bone marrow efficiently phagocytosed necrotic tumor cells and after the uptake, they produced remarkably increased levels of IL-12. A decreased CCR1 and increased CCR7 expression on DCs was also observed after the tumor uptake, suggesting that antigen uptake could induce DC maturation. Furthermore, co-culturing of DCs with NK cells in vitro enhanced IL-12 production in DCs and IFN-${\gamma}$ production in NK cells, which was significantly dependent on IL-12 production and cell-to-cell contact. Immunization of necrotic tumor cell-loaded DCs induced cytotoxic T lymphocytes as well as NK activation, and protected mice against subsequent tumor challenge. In addition, intratumoral or contra-lateral immunization of these DCs not only inhibited the growth of established tumors, but also eradicated tumors in more than 60% of tumor-bearing mice. Conclusion: Our data indicate that production of IL-12, chemokine receptor expression and NK as well as CTL activation may serve as major parameters in assessing the effect of tumor cell-pulsed DC vaccine. Therefore, DCs loaded with necrotic tumor cells offer a rational strategy to treat tumors and eventually lead to prolonged survival.
톡소이드는 독성은 제거되고 항원성은 유지시킨 독소 단백질로써, 다양한 병원체의 감염 및 질병 예방을 위해 지속적으로 연구 되었다. 그러나, 톡소이드의 활성 감소 및 이와 함께 사용하는 어쥬번트의 부작용 등이 지속적으로 보고되면서, 면역성은 강화하고 어쥬번트의 사용은 줄일 수 있는 톡소이드 항원 전달 시스템이 필요하게 되었다. 따라서, 이러한 단점을 개선하고자 최근 새로운 백신과 약물 전달수송을 위해 다양한 분야에서 활용하고 있는 마이크로/나노 운반체를 톡소이드 항원에 도입하고 있다. 이와 같은 마이크로/나노 운반체는 미생물 자체를 이용하거나 미생물을 통해 생산해 낼 수도 있으며, 더 나아가 다양한 소재의 폴리머를 이용하여 제작할 수 있다. 본 총설에서는 톡소이드 항원 전달을 위한 마이크로/나노 운반체를 미생물 유래의 ghost cells (GCs), 그람 음성 세균이 분비하는 outer membrane vesicles (OMVs) 및 고분자 폴리머로 구성된 nanoparticles (NPs)으로 분류하였다. 마지막으로 각 운반체에 대한 톡소이드 항원의 전달 방식 및 이를 적용하였을 때 일어나는 면역반응에 대하여 서술하였으며, 이를 통해 향후 톡소이드의 효율 및 부작용이 개선되기를 기대한다.
Propolis extracts는 다양한 성분으로 구성되어 있는 수지상의 혼합물로서 여러 약리작용을 보여주기 때문에 민간요법으로 널리 이용되어왔다. 특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사 한 바 유효농도는 $50{\sim}150{\mu}g/ml$ 이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 $100{\mu}g/ml$ 이었다. In vivo상에서 양식넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 propolis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다. 그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 propolis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용가능성이 기대되어진다.
Progesterone catabolizing enzyme, the enzyme $20{\alpha}$-hydroxysteroid deltydrgenase($20{\alpha}$-HSD) is pivotal in the regulation of ovarian function in rodents, which catabolizes progesterone into biologically inactive $20{\alpha}$ hydroxypregn-4-en-3-one($20{\alpha}$-OHP). In this study was carried out the influence of $20{\alpha}$-HSD activity to ovarian function and regulation such as ovulation, formation of corpus luteum, maintenance of estrous cycles and pregnancy, we investigated changes in activities of the splenic macrophages and ovarian histological findings in rat. During the estrous cycles, the ratious of phagocytotic macrophage in splenic adherent cells were highest on the proestrous, but they were lowest on metestrous. During the pregnancy, the ratious of phagocytotic macrophages in splenic adhrent cells were lowest by 1 day and then significantly increased toward the pregnancy, which were highest pregnancy on day 12. On histological findings in rat ovary, the mean number of growing, antral and mature follicles were 15.9(72.9%), 3.4(15.9%), and 2.4(11.2%), respectively. Growing follicles reached to lowest number at diestrus and mature follicle reached to lowest number at metestrus. The numbers of corpus luteums per tissue section of the ovary were 14.4 and the number of normal and atretic follicles were 11.0(76.4%) and 3.4(23.6%), respectively. The number of corpus luteum with vacolated cell were 1.7(11.8%). In this study suggests splenic macrophages are as a source of the substance which maintainer progesterone secretion from luteal cells, and are recognized pass the vessels and reside in the fresh corpora lutea soon after ovulation via inflammatory reactions, and these macrophages are felt to have a stimulatory effect on the formation of cropora lutea. In view of the results include previous report, ovarian $20{\alpha}$-hydroxysteroid dehydrogenase enzyme and splenic macrophages consider play central role in the control and maintenance of estrous cycles and pregnancy, and also applicable to both clinical and research in a wide variety such as control of reproductive system.
Miamiensis avidus는 넙치에 폐사를 일으키는 스쿠티카 섬모충이다. M. avidus에 대한 넙치의 면역반응을 측정하기 위하여 FKC (formalin killed cell)를 마리당 2.6 × 106 cells을 복강주사하고, FKC를 초음파처리한 것을 2.4 × 106 cells/㎖로 14.9 cm (26.8 g)의 넙치에 2주 간격으로 두 번 면역하였다. 면역한 넙치의 항체는 충체의 운동성둔화 (immobilization)와 응집 (agglutination)을 유발하였다. 면역한 그룹은 면역하지 않은 그룹보다 높은 ELISA항체가를 나타내었다. 또한, 복강주사로 면역한 넙치에서 유의적으로 높은 phagocytic ratio, phagocytic index와 주화활성을 나타내었다. FKC의 면역방어효과를 검증하기 위하여 8.6 cm (6.3 g)의 넙치에 마리당 1.43 × 105 cells을 복강주사면역하고 2.2 ×105 cells/㎖의 농도로 침지면역했다. 2주 간격으로 두 번 면역하고 2.0 × 104과 2.0 × 103 cells/㎖ 농도로 침지 공격 감염시킨 후 폐사율을 관찰하였다. 감염시킨 3주 후 폐사율은 복강주사구에서 감소하였고 침지면역구는 폐사가 지연되었다. 위의 결과로부터 M. avidus의 불활화백신을 넙치에 면역하면 충에 대한 특이면역이 증강되며 증강된 면역반응이 방어력을 제공했을 것으로 생각되었다.
큰발웃수염박쥐 (Myotis macrodactylus)의 세정관 정상피의 분화과정과 미세구조적 특징들은 알아보기 위하여 광학 및 전자현미경을 이용하여 조사하였다. 정자형성 과정은 4월부터 9월까지로 나타났다. 정자형성세포의 미세 구조적 특징에 있어서, A형 (Ad, Ap)의 정원세포는 기저막 위에 위치하며, Sertoli cell에 의해 둘러싸여져 있고, 대부분의 세포는 타원형이다. Ad형은 Ap형 보다 핵과 세포질의 전자밀도가 높은 것이 특징적인 반면에, B형의 정원세포는 구형의 세포로서 A형 정원세포 보다 세포가 크며, Ap형과 마찬가지로 세포질이 밝고, 거의 핵소체가 핵막에 인접되어 있다. 정모세포는 크고 구형이지만, 제 1 정모세포가 제 2 정모세포보다 다소 크다. 정자변태는 골지, 두모, 첨체, 성숙 및 이탈기로 구분하였고, 세포구조물의 특징들에 의해 각각 전 후기로 다시 세분하여 전과정을 9 (기)로 나누었다. 핵질의 변화는 골지후기부터 서서히 응축하기 시작하여, 이탈기에서 완전한 핵을 형성하였다. 정자꼬리의 형성시기는 골지전기에서 형성하기 시작하여 이탈기에서 완성되었다. 동면직전 10월부터 동면기 (11월, 12월, 이듬해 1, 2, 3월)까지는 정자형성 세포의 퇴화과정이 일어났다. 즉 미분화 정자형성 세포들은 세르톨리 세포의 식작용에 의해 포식되어졌는데 이는 동면을 위한 에너지 효율적 이용과 번식조절을 위한 적응 메카니즘이라 여겨진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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