Kim, Eun Jin;Kang, Yeong Im;Bang, Tae Il;Lee, Myoung Han;Lee, Sang Won;Choi, In Soo;Song, Chang Seon;Lee, Joong Bok;Park, Seung Yong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.2
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pp.75-84
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2016
Probiotics that are able to provide beneficial effects on animal health have become important ingredients of dog foods. This study was conducted to characterize the probiotic potentials of two strains, Lactobacillus reuteri BCLR-42 and Lactobacillus plantarum BCLP-51, that were derived from feces of healthy dogs and evaluated based on tolerance to low pH and bile acid, antimicrobial activities, enzyme profiles, sensitivity to antibiotics, and innate immune enhancing potentials. Both strains showed survival of more than 90% at pH 3 and 0.2% bile acid and exhibited broad antimicrobial activities against indicator bacteria. Moreover, both strains showed high sensitivity to antibiotics, except vancomycin, metronidazole, and gentamicin. The alkaline phosphatase was negligible (score 0), whereas they showed strong beta galactosidase activity (score range 5 or 3, respectively). The phagocytosis and oxidative burst activities of canine granulocytes were significantly enhanced in response to both strains. These results show that both strains have the capability to act as probiotics and the potential for application as ingredients in dog foods.
In addition to the removal of dying or dead lutein cells by phagocytosis in many species, macrophages exert both luteotropic effect during maturation period and luteolytic effect during degenerative period via mediating autocrine/paracrine actions of self-producing cytokines in the corpus luteum. In this experiment, immunohistochemical and transmission electron microscopic (TEM) studies were performed to observe the morphologic changes of luteal macrophages during luteolysis. A small number of macrophages and low immunoreactivity were present at the mature stage. The number of macrophages and immunoreactivity gradually increased along the advance of luteolysis. Two subtypes of macrophages could be observed through TEM observation. One type of macrophage located between the large lutein cells contained no lipid droplets in their cytoplasm at mature stage. The other type of macrophage located near the blood vessels contained many lipid droplets in their cytoplasm during luteolysis. Particularly, no phagocytic macrophages were observed, which suggested the macrophages in the porcine corpus luteum did not involve in the phagocytotic elimination of dying lutein cells.
The fine structural modification of the granulocytes between the molt and intermolt period were investigated by the transmission electron microscopy. The granular hemocytes of the spider Araneus ventricosus were composed of three subtypes: eosinophilic granulocytes (EGs), basophilic granulocytes (BGs) and cyanocytes. Both of the EGs and BGs have electron dense granules within their cytoplasms, however the granules of BGs are larger than those of EGs. During the molt period, some of the EGs have fine structural modification in their cell organelles including formation of phagosomes as a result of active phagocytosis. However, the BGs have no phagosomes, but electron densities of the granules are changed to lower states than the intermolt period. The cyanocyte is the biggest hemocyte among the granulocytes. They contain numerous hemocyanin crystals in the cytoplasm with some electron-lucent vacuoles. During the molt period, some of the cyanocytes are changed to irregular shapes. High magnification electron micrographs reveal that the lattice sub-structure of the hemocyanin crystals are very similar to those of microtubules, and each tubule is composed of approximately 20 filaments with fine fibrillar structure.
The phagocytic petencies and birefringences of peritoneal mast cells of rats treated with particular dyes (neutral red, toluidine blue, pyronin, methylene blue, alcian blue, trypan blue, carmine, orange G, aniline blue, Janus green B, and India ink) were analyzed by means of phase contrast microscopy and polarizing microscopy. In addition, cytomorphic effects of the dyes on the peritoneal mast cells were also discussed. Phagocytic activities or ingestion of the dye particles were not observed in most cases, except for the India ink group. Hardly a macrophage appeared without some dark particles which were ingested or phagocytosed. Trypan blue and aniline blue produced very weak birefringence in the cytoplasm of mast cells but the rest did not produce even in the acid medium (neutral red and toluidine blue). The short and slender ectoplasmic processes of the mast cells and the leucocytes were also found in certain groups. The cytomorphic effects of the dyes on the mast cell were slight and variable.
The ${\beta}2$ integrins on leukocytes play important roles in cell adhesion, migration and phagocytosis. One of the ${\beta}2$ integrins, ${\alpha}X{\beta}2$ (CD11c/CD18), is known to bind ligands such as fibrinogen, Thy-1 and iC3b, but its function is not well characterized. To understand its biological roles, we attempted to identify novel ligands. The functional moiety of ${\alpha}X{\beta}2$, the ${\alpha}X$ I-domain, was found to bind plasminogen, the zymogen of plasmin, with moderate affinity ($1.92{\times}10^{-6}M$) in the presence of $Mg^{2+}$ or $Mn^{2+}$. The ${\beta}D-{\alpha}5$ loop of the ${\alpha}X$ I-domain proved to be responsible for binding, and lysine residues ($Lys^{242}$, $Lys^{243}$) in the loop were the most important for recognizing plasminogen. An excess amount of the lysine analog, 6-aminohexanoic acid, inhibited ${\alpha}X$ I-domain binding to plasminogen, indicating that binding is lysine-dependent. The results of this study indicate that leukocytes regulate plasminogen activation, and consequently plasmin activities, through an interaction with ${\alpha}X{\beta}2$ integrin.
Lactic acid bacteria (LAB) in fermented foods have attracted considerable attention recently as treatment options for immune diseases, the incidence of which has been increasing worldwide. The ability of 500 strains of LAB, isolated from kimchi, to induce TNF-${\alpha}$ production in peritoneal macrophages was investigated. Lactobacillus plantarum HY7712 most strongly induced TNF-${\alpha}$ production as well as NF-${\kappa}B$ activation. However, HY7712 inhibited NF-${\kappa}B$ activation in LPS-stimulated peritoneal macrophages. When HY7712 was orally treated in cyclophosphamide (CP)-immunosuppressed mice for 5 or 15 days, it reversed the body and spleen weights, blood RBC and WBC levels, and splenocyte and bone marrow cells that were reduced by CP. Orally administered HY7712 increased concanavalin A-induced T cell proliferation to 84.5% of the normal group on day 15, although treatment with CP alone markedly reduced it to 53.7% of the normal group. Furthermore, orally administered HY7712 significantly induced the expressions of IL-2 and IFN-${\gamma}$ in ConA-induced splenic cytotoxic T cells of CP-treated mice. Orally administered HY7712 restored the CP-impaired phagocytosis of macrophages in mice. Orally administered HY7712 also restored the cytotoxicity of NK and cytotoxic T cells derived from spleen and bone marrow against YAC-1 in CP-immunosuppressed mice. Based on these findings, orally administered HY7712 may accelerate the recovery of cyclophosphamide-caused immunosuppression, without evident side effects, by immunopotentiating NK and Tc cells, and may provide a mechanistic basis for using HY7712 as an alternative means in lessening chemotherapyinduced immunosuppression in cancer patients.
Han, Kyoung-Hee;Park, Su Jung;Choi, Sun Ju;Park, Joo Young;Lee, Kyoung-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.7
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pp.1031-1040
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2013
Candida albicans is a dimorphic fungus that commensally colonizes human mucosal surfaces. The aim of this study was to assess the role of different C. albicans morphologies in inducing pattern recognition receptors (PRRs) and cytokines in macrophages. Macrophages may respond to pathogen-associated molecular patterns via TLR2 and TLR4 by expressing cytokines. The hyphal transition of C. albicans was induced by 20% serum (S), RPMI-1640 (R), or $39^{\circ}C$ culture (H). Macrophages were then challenged with either yeast (Y) or different hyphae cultures of C. albicans, followed by RT-PCR and FACS analysis of PRRs expression. In addition, macrophages were stimulated with either yeast or different hyphae cultures of C. albicans used by RT-PCR and Bio-Plex analysis of cytokines production. Macrophages expressed high levels of TLR4 and dectin-1 after stimulation with Y cells. In contrast, stimulation with H or R cells strongly increased the expression of TLR2 and dectin-2. Stimulation with Y cells significantly enhanced the expression of IL-$1{\beta}$ and weakly increased the expression of IL-6 and IL-12. Stimulation with hyphal cells (S, R, and H) strongly increased IL-10 expression, but weakly reduced IL-$1{\beta}$ expression. The phagocytosis activity and NO production of macrophages were decreased upon treatment with hyphal cells compared with yeast, and depended on the length of hyphae. In summary, the yeast and hyphae forms of C. albicans resulted in an induction of different PRRs, with accompanying differences in immune cell cytokine profiles.
Chloroplasts are believed to be descended from certain cyanobacteria, which were taken up by phagocytosis into a host cell and lived there in a symbiotic relationship. In contrast to the current static concept on the chloroplast genome, its dynamism has been recently demonstrated: the chloroplast genome is active in intramolecular homolgous recombination, producing subgenomic circles when it obtains homolgous sequences via genetic transformation. Chloroplast tranformation in higher plants provides many advantages over nuclear transformation that include higher expression levels of transgenes, polycistronic expression of transgenes, and maternal transmission of transgenes. Tobacco has been used as a model for chloroplast genetic transformation. However, it is recently possible to transform the chloroplasts of other major food and economic crops including rice, soybean, and cotton. Chloroplast-transformed crops will be able to replace bioreactors using microorganisms for production of value-added proteins in future.
The effects of butylated hydroxyanisole and butylated hydroxytoluene on the immune status in normal male were evaluated. They exhibited significant decrease in the circulating leukocyte counts. Relative spleen and thymus weights were slightly decreased, but not stratistically significant. These were, however, significant liver hypertrophies in theier exposed mice. Splenic IgM PFCs per one million cells in 1/20 LD50 BHA and BHT exposed mice were significantly reduced IgM PFCs per spleen were similar tothose of control, except in 1/20 LD50 BHA exposed mice, where they were significantly suppressed. The precise nature of the inhibition is not clear. Direct cytotoxicity is not responsible for the depressed antibody response, even following relatively high doses of them, because the changes in spleen cellularity are not significant. Both substances, however, did not show any effects on the arthus reaction and delayed hypersensitivity reaction induced by heat aggreagted bovine serum albumin, and in vivo phagocytosis of colloidal carbon. In the light of the present results, in vivo antibody response as well as in vitro, may be sensitive to BHA of the present results, in vivo antibody response as well as in vitro, amy be sensitie to BHA and BHT. Further elucidation of the precise nature of antibody suppression in their exposed mice, is warranted.
Kaempferitrin, isolated from Kenaf (Hibiscus cannabinus), was examined to evaluate its modulatory effects on antigen-presenting cell functions of macrophages/monocytes such as phagocytosis of foreign materials, up-regulation of costimulatory molecules (CD40, CD80 and CD86), adhesion molecule activation, and antigen processing and presentation. Kaempferitrin strongly blocked up-regulation of CD40, CD80 and CD86, but not pattern recognition receptor (PRR) (e.g., TLR2). It also suppressed functional activation of CD29 (${\beta}1$-integrins), as assessed by cell-cell adhesion assay, required for T cell-antigen-presenting cell (APC) interaction. Furthermore, this compound did not block a simple activation of CD29, as assessed by cell-fibronectin adhesion assay. However, the compound did not diminish phagocytic uptake, an initial step for antigen processing, and ROS generation in RAW264.7 cells. In particular, to understand molecular mechanism of kaempferitrin-mediated inhibition, the regulatory role of LPS-induced signaling events was examined using immunoblotting analysis. Interestingly, this compound dose dependently suppressed the phosphorylation of $I{\kappa}B{\alpha}$, Src, Akt and Syk, demonstrating that it can negatively modulate the activation of these signaling enzymes. Therefore, our data suggested that kaempferitrin may be involved in regulating APC function-relevant immune responses of macrophages and monocytes by regulating intracellular signaling.
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